加工多核酸的方法技术

技术编号:42022859 阅读:18 留言:0更新日期:2024-07-16 23:14
本文描述了一种加工多核酸的方法,所述方法包括:提供包含具有酰胺基团的配体的固体载体;将所述固体载体暴露于pH小于5.5的缓冲液中的多核酸分子,以使所述多核酸分子的至少一部分结合至所述配体;c)将具有结合的多核酸分子的所述固体载体(例如微粒)暴露于pH大于6的缓冲液,以从所述微粒的所述配体释放所述结合的多核酸分子的一部分,并且保留结合至所述固体载体(例如微粒)的所述多核酸分子的一部分;以及利用含有保留的结合的多核酸分子的所述固体载体或其悬浮液。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】


技术介绍


技术实现思路

1、目前描述的是一种加工多核酸的方法,所述方法包括:

2、a)提供包含具有酰胺基团的配体的固体载体;

3、b)将所述固体载体暴露于ph小于5.5的缓冲液中的多核酸分子,以使所述多核酸分子的至少一部分结合至所述配体;

4、c)将具有结合的多核酸分子的固体载体(例如微粒)暴露于ph大于6的缓冲液,以从微粒的配体释放结合的多核酸分子的一部分,并且保留结合至固体载体(例如微粒)的多核酸分子的一部分;

5、d)任选地洗涤包含结合的和/或保留的结合的多核酸分子的固体载体(例如微粒);

6、e)任选地自包含保留的结合的多核酸分子的固体载体制备悬浮液;

7、并且

8、f)利用含有保留的结合的多核酸分子的固体载体或其悬浮液。

9、利用释放的和/或保留的和/或悬浮的多核酸分子可包括大小分离、纯化、定量、检测或修饰(例如,经由暴露于至少一种酶),诸如扩增、转录、标签化(tagmentation)、消化、连接或文库的制备(例本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种加工多核酸的方法,所述方法包括:

2.根据权利要求1所述的方法,其中包含所述配体的所述固体载体在pH 4.5下具有负或正ζ电势。

3.根据权利要求2所述的方法,其中包含所述配体的所述固体载体在pH 8.5下比在pH4.5下具有更低的ζ电势。

4.根据权利要求2至3所述的方法,其中在pH 4.5下的ζ电势与在pH8.5下的ζ电势之间的差的绝对值是至少10mV、20mV、30mV、

5.根据权利要求1至4所述的方法,所述方法还包括在步骤b)之后用pH小于5.5的缓冲液洗涤所述固体载体。

6.根据权利要求1至5所述的方法,其中...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种加工多核酸的方法,所述方法包括:

2.根据权利要求1所述的方法,其中包含所述配体的所述固体载体在ph 4.5下具有负或正ζ电势。

3.根据权利要求2所述的方法,其中包含所述配体的所述固体载体在ph 8.5下比在ph4.5下具有更低的ζ电势。

4.根据权利要求2至3所述的方法,其中在ph 4.5下的ζ电势与在ph8.5下的ζ电势之间的差的绝对值是至少10mv、20mv、30mv、

5.根据权利要求1至4所述的方法,所述方法还包括在步骤b)之后用ph小于5.5的缓冲液洗涤所述固体载体。

6.根据权利要求1至5所述的方法,其中所述f)包括分析或检测所述结合的多核酸分子或其悬浮液。

7.根据权利要求1至6所述的方法,其中当使用脉冲场毛细管电泳表征时,b)的所述多核酸分子的尺寸范围为100至50,000个碱基对。

8.根据权利要求1至7所述的方法,其中未结合的多核酸分子的上清液具有小于总初始多核酸分子的90%、80%、70%、60%、50%、

9.根据权利要求1至8所述的方法,其中所述保留的结合的多核酸分子具有大于所述总初始多核酸分子的20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%的多核酸分子质量。

10.根据权利要求1至9所述的方法,其中具有大于10,000;15,000;

11.根据权利要求1至10所述的方法,其中所述方法还包括洗脱从c)的所述固体载体释放的所述结合的多核酸分子的一部分。

12.根据权利要求1至11所述的方法,其中所述ph大于6的缓冲液具有小于1m、500mm、25...

【专利技术属性】
技术研发人员:安娜贝勒·沃茨托尼娅·D·博尼拉杰拉尔德·K·拉斯穆森乔舒亚·M·菲什曼林赛·L·特雷格泽姆劳·乔拉克·阿坦
申请(专利权)人:舒万诺知识产权公司
类型:发明
国别省市:

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