一种表达肝型脂肪酸结合蛋白的重组大肠杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术涉及生物工程技术领域，公开了一种表达肝型脂肪酸结合蛋白的重组大肠杆菌及其应用。本发明专利技术通过对人源FABP1基因(NCBI Accession:NM_001443)进行密码子优化，得到核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的优化FABP1基因，将其通过表达载体导入大肠杆菌中进行表达，从重组大肠杆菌的菌体中分离、纯化可获得高纯度的肝型脂肪酸结合蛋白，纯度达95％。所述FABP1基因编码的蛋白氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明专利技术制备得到的肝型脂肪酸结合蛋白，可以作为标准品，以及应用于其多克隆抗体和单克隆抗体制备中的抗原。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物工程，尤其涉及一种表达肝型脂肪酸结合蛋白的重组大肠杆菌及其应用。

技术介绍

1、肝型脂肪酸结合蛋白(liver fatty acid binding protein，l-fabp)，又称脂肪酸结合蛋白1，是脂肪酸结合蛋白家族的重要成员，主要在肝脏、小肠及肾脏等组织中表达。它是一种低分子量的胞浆蛋白，在哺乳动物中广泛存在，包括小肠、心、脑、骨骼肌等多种细胞内。l-fabp的主要功能是调节脂肪酸的摄取和胞内运输，能够将脂肪酸从细胞膜上运送到细胞内部，参与脂肪酸、胆固醇、胆汁酸等的转运过程。

2、l-fabp不仅在脂质代谢中起到转运作用，还与多种疾病的发生发展密切相关，如脂肪肝、肝硬化、肝癌、糖尿病等。近年来的研究发现，l-fabp不仅在肝脏疾病中有重要作用，还在肾脏疾病、肥胖、糖尿病肾病等多种疾病中发挥着关键作用，特别是在急性肾损伤(aki)的早期检测中，l-fabp作为一种新发现的生物标志物，可用于诊断和预测aki的严重程度和病因。

3、l-fabp在不同疾病中的具体作用机制涉及其在脂质代谢调节、炎症反应以及作为生物本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种表达肝型脂肪酸结合蛋白的重组大肠杆菌，其特征在于：所述重组大肠杆菌中含有连接了FABP1基因的表达载体，所述FABP1基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

2.一种表达肝型脂肪酸结合蛋白的重组大肠杆菌的构建方法，其特征在于：包括以下步骤：

3.如权利要求2所述的构建方法，其特征在于：所述表达载体为pET-28a(+)，所述大肠杆菌为大肠杆菌BL21。

4.如权利要求1所述的重组大肠杆菌，或如权利要求2-3任意一项所述的构建方法构建得到的重组大肠杆菌在制备肝型脂肪酸结合蛋白中的应用。

5.一种肝型脂肪酸结合蛋白的制备方法，其...

【技术特征摘要】

1.一种表达肝型脂肪酸结合蛋白的重组大肠杆菌，其特征在于：所述重组大肠杆菌中含有连接了fabp1基因的表达载体，所述fabp1基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。

2.一种表达肝型脂肪酸结合蛋白的重组大肠杆菌的构建方法，其特征在于：包括以下步骤：

3.如权利要求2所述的构建方法，其特征在于：所述表达载体为pet-28a(+)，所述大肠杆菌为大肠杆菌bl21。

4.如权利要求1所述的重组大肠杆菌，或如权利要求2-3任意一项所述的构建方法构建得到的重组大肠杆菌在制备肝型脂肪酸结合蛋白中的应用。

5.一种肝型脂肪酸结合蛋白的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，在35–37℃、150–180r...

【专利技术属性】
技术研发人员：王洋，郭雨川，陈婷，李杰，王熠鹏，崔文荣，梅建凤，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：