一种用于提取血液或细胞样本中DNA的试剂盒及方法技术

本发明专利技术涉及一种用于提取血液或细胞样本中DNA的试剂盒及方法，该试剂盒包含裂解缓冲液A、裂解缓冲液B，清洗缓冲液C和蛋白酶；裂解缓冲液A包含：5‑100mM第一pH稳定剂、5‑100mM第一金属离子螯合剂和50‑500mM DNA稳定剂；裂解溶液B包含阴离子表面活性剂，所述阴离子表面活性剂的浓度为10‑30％(w/v)；清洗缓冲液C包含：1‑150mM渗透压稳定剂、0.1‑20mM第二pH稳定剂、1‑20mM第二金属离子螯合剂和0.1‑0.5wt％非离子表面活性剂；蛋白酶的浓度为1‑25mg/ml。本发明专利技术的试剂盒和方法能够实现DNA长度和纯度的两者兼得。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子生物学，尤其涉及一种用于提取血液或细胞样本中dna的试剂盒及方法。

技术介绍

1、基因组作为生物的蓝图，包含着生物的全部遗传信息。为了解开生命密码，各国研究人员陆续对多个物种进行基因组测序，试图绘制最全的物种基因组图谱，但是，由于短读长测序技术的限制，早期测序组装的基因组不完整，存在大量的缺失区域。随着科学技术的发展，新的测序技术不断出现，特别是以单分子测序为代表的第三代测序，凭借其长读长的测序，为动植物基因组的组装提供了强大的技术支持，有望实现无缺失的基因组组装图谱。

2、相较于二代测序，三代单分子测序对dna的分子长度和纯度提出了更高的要求，其中，牛津纳米孔测序平台(ont)的超长测序要求最为严苛，其要求提取制备的dna在拥有超高分子长度的同时，还要保持较高的纯度，从而实现最大的测序读长，以及良好的测序数据产量。

3、一方面，现有常规dna提取方法(例如qiagen血液细胞系dna提取试剂盒)的基本实验方案为：采用高浓度的裂解液破坏细胞膜结构，使细胞中的物质释放到消化溶液中；通过蛋白酶k、rna酶消化，使溶液中本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于提取血液或细胞样本中DNA的试剂盒，其特征在于，包含裂解缓冲液A、裂解溶液B、清洗缓冲液C和蛋白酶；其中，

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述第一金属离子螯合剂和所述第二金属离子螯合剂分别选自EDTA、乙二胺四乙酸二钠盐、乙二胺四乙酸四钠盐、乙二醇四乙酸、1,2-双(邻氨基苯氧基)乙烷-N,N,N’N’-四乙酸、二亚乙基三胺五乙酸和N,N-双(羧基甲基)甘氨酸中的一种；和/或

3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，所述第一pH稳定剂为Tris-HCl缓冲对；和/或

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述裂解...

【技术特征摘要】

1.一种用于提取血液或细胞样本中dna的试剂盒，其特征在于，包含裂解缓冲液a、裂解溶液b、清洗缓冲液c和蛋白酶；其中，

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述第一金属离子螯合剂和所述第二金属离子螯合剂分别选自edta、乙二胺四乙酸二钠盐、乙二胺四乙酸四钠盐、乙二醇四乙酸、1,2-双(邻氨基苯氧基)乙烷-n,n,n’n’-四乙酸、二亚乙基三胺五乙酸和n,n-双(羧基甲基)甘氨酸中的一种；和/或

3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，所述第一ph稳定剂为tris-hcl缓冲对；和/或

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述裂解缓冲液a包含：8-15mm tris-hcl、15-25mm edta和70-120mm nacl，所述裂解缓冲液a的ph值为7.8-8.2；

5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包含rna酶和洗脱缓冲液；其中，

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，

7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述rna酶a的浓度为8-12mg/ml；

8.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述血液样本为哺乳动物血液样本或非哺乳动物血液样本。

9.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，所述血液样本为人血液样本、鸭血液样本或熊猫血液样本。

10.一种提取血液或细胞样本中dna的方法，其特征在于，包括以下步骤：

11.根据权利要求10所述的方法，其中，所述第一金属离子螯合剂和...

【专利技术属性】
技术研发人员：王洋，李慧，王超，李小康，梁梦蝶，陶庆，赵云龙，梁帆，汪德鹏，
申请(专利权)人：武汉希望组生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：