基于LAMP检测传染性疾病病毒的引物组、试剂盒及测序方法技术

本发明专利技术提供了一种基于LAMP快速检测传染性疾病病毒的引物组、试剂盒及测序方法，涉及生物检测技术领域。所述传染性疾病选自SARS

Primer set, kit and sequencing method for detecting infectious disease virus based on lamp

【技术实现步骤摘要】
基于LAMP检测传染性疾病病毒的引物组、试剂盒及测序方法


[0001]本专利技术涉及生物检测
，具体涉及一种基于LAMP快速检测传染性疾病病毒的引物组、试剂盒及测序方法。

技术介绍

[0002]环介导等温扩增技术(Loop
‑
mediated isothermal amplification)，2000年由日本学者专利技术(Tsugunori N,Hiroto O,Harumi M,et al.Loop
‑
mediated isothermal amplification of DNA[J].Nuclc Acids Research(12):12.)。该技术的特点是在目标区域上下游分别选取3个区段、各设计2条引物，在扩增时扩增产物能形成茎环结构，其扩增环境根据所使用的Bst DNA聚合酶设置。
[0003]LAMP技术的明显优势在于：(1)特异性高，每个目标片段引物设计位点共有6个，当且仅当全部引物匹配时，该体系才能正常运行，其特异性明显高于普通PCR；(2)高效，可在15<br/>‑
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于LAMP快速检测传染性疾病病毒的引物组，其特征在于，所述传染性疾病选自SARS
‑
CoV
‑
2或流感病毒B，所述引物组包括特异性扩增SARS
‑
CoV
‑
2病毒arf1ab和N基因的引物对，如Seq ID No.1～12所示，或特异性扩增流感病毒B的HA基因和M基因的引物对，如Seq ID No.13～24所示，同时，引物组还包括特异性扩增作为内参基因的GAPDH的引物对，如Seq ID No.25～30所示。2.一种基于LAMP快速检测传染性疾病病毒的试剂盒，其特征在于，包含如权利要求1所述的SARS
‑
CoV
‑
2病毒arf1ab和N基因的引物对和/或流感病毒B的HA基因和M基因的引物对。3.根据权利要求2所述的基于LAMP快速检测传染性疾病病毒的试剂盒，其特征在于，包括以下成分：组分浓度Isothermal Amplification Buffer10
×
MgSO4100mmol/LdNTP Mix10mmol/LFIP/BIP Primers25
×
F3/B3 Primers25
×
LoopF/B Primers25
×
Bst2.0 DNA Polymerase8,000U/mlNuclease
‑
free Water
‑
4.一种基于LAMP快速检测传染性疾病病毒序列的方法，其特征在于，包括以下步骤：S41：对待检样品提取质粒样本，获得DNA Sample；S42：进行LAMP反应，并对反应产物进行纯化，其中，每25μL体积的LAMP反应体系为：试剂添加量10
×
Isothermal Amplification Buffer2.5μlMgSO4(100mmol/L)1.5μldNTP Mix(10mmol/L)3.5μlFIP/BIP Primers(25
×
)1μlF3/B3 Primers(25
×
)1μlLoopF/B Primers(25
×
)1μlBst2.0 DNA Polymerase(8,000U/ml...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁帆，全伟鹏，李净净，汪德鹏，
申请(专利权)人：武汉希望组生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：