【技术实现步骤摘要】
一种用于病毒核酸检测的荧光可视化便携试剂盒及其制备方法和应用
[0001]本专利技术属于荧光生物传感及核酸检测
,具体涉及一种用于病毒核酸检测的荧光可视化便携试剂盒及其制备方法和应用。
技术介绍
[0002]新型冠状病毒肺炎在全球造成极大的影响,引起了各国政府与世界卫生组织(WHO)的高度关注。新型冠状病毒肺炎是由2019新型冠状病毒感染导致的肺炎引起的,对全人类的健康与世界经济发展造成巨大威胁。因此,针对新型冠状病毒的检测方案有助于将公共卫生安全风险降至最低,以便于更快地治疗现有案例,并减缓疫情传播速度。PCR是新冠病毒核酸(SARS
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2)检测的有效方法,可实现对目标基因的扩增和检测,但是传统的PCR技术需要在反应终点时,通过凝胶电泳来判断目标基因是否存在,且其检测灵敏度比较低,定量也不够准确。通过PCR技术与荧光标记相结合,使用荧光标记的引物为探针来产生荧光信号,可极大的提高检测的准确性。但是,RT
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PCR技术仍需要专业的控温仪器与专业的实验人员, ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种用于病毒核酸检测的荧光可视化便携试剂盒,其特征在于,包括磁性检测探针和DNA扩增元件F1、F2;所述磁性检测探针包括磁颗粒,所述磁颗粒表面修饰有DNA锚定链P1,DNA探针链L1、L2、L3及DNA荧光链R1;所述L1和L2的序列分别与两段待测病毒核酸特征序列T1、T2互补;所述P1一端连有生物素或氨基,可以使DNA锚定链连接到亲和素或羧基修饰的磁珠上,P1的序列与L1的序列部分互补;所述L1上杂交有荧光修饰的序列R1以及L2,并且L1的序列与一段待测病毒核酸特征序列T1部分互补;所述L2与L3的序列部分互补,并且L2的序列与另一段待测病毒核酸特征序列T2部分互补;所述F1与L1的序列部分互补;所述F2与L2的序列部分互补;所述F1和F2可以在T1、T2同时存在时打开P1/L1/L2/L3/R1的杂交体,释放出荧光链R1,指示体系中待测病毒核酸特征序列T1、T2的同时存在;在此过程中释放出T1、T2进行循环利用,实现信号扩增。2.根据权利要求1所述的一种用于病毒核酸检测的荧光可视化便携试剂盒,其特征在于,所述R1所修饰的荧光为近红外二区荧光分子、上转换粒子、量子点、罗丹明、花菁染料、金纳米簇、含芳香烃/杂环结构的荧光团中的一种。3.根据权利要求1所述的一种用于病毒核酸检测的荧光可视化便携试剂盒,其特征在于,还包括待测病毒核酸阳性检测样本和Tris缓冲液;所述待测病毒核酸阳性检测样本包括特征序列T1、T2。4.根据权利要求3所述的一种用于病毒核酸检测的荧光可视化便携试剂盒,其特征在于,所述T1、T2包括但不限于SARS
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2N基因片段、SARS
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2E基因片段,以及ORF1ab特征基因片段。5.根据权利要求1所述的一种用于病毒核酸检测的荧光可视化便携试剂盒,其特征在于,所述待测病毒为SARS
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2;所述P1具有如SEQ ID No.1所示的序列;所述L1具有如SEQ ID No.2所示的序列;所述L2具有如SEQ ID No.3所示的序列;所述L3具有如SEQ ID No.4所示的序列;所述R1具有如SEQ ID No.5所示的序列;所述F1具有如SEQ ID No.6所示的序列;所述F2具有如SEQ ID No.7所示的序列;所述T1为SARS
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2N基因片段,具有如SEQ ID No.8所示的序列;所述T2为SARS
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2E基因片段,具有如SEQ ID No.9所示的序列。6.根据权利要求1所述的一种用于病毒核酸检测的荧光可视化便携试剂盒,其特征在于,所述磁颗粒是由链霉亲和素或羧基包覆的,其粒径为10nm~2μm。7.权利要求1所述的一种用于病毒核酸检测的荧光可视化便携试剂盒的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将DNA锚定链P1通过生物素
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链霉亲和素作用...
【专利技术属性】
技术研发人员:张峻诚,吴鸿宇,朱丹,汪联辉,晁洁,
申请(专利权)人:南京邮电大学,
类型:发明
国别省市:
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