一种利用超晶格辅助三色可视化试剂盒检测色氨酸的方法技术

本发明专利技术公开一种利用超晶格辅助三色可视化试剂盒检测色氨酸的方法，利用色氨酸酶TnaA特异性催化L型色氨酸生成吲哚和丙酮酸。吲哚与对二甲氨基苯甲醛反应生成玫瑰红色的吲哚啉衍生物(Rose‑Indole)。丙酮酸在丙酮酸氧化酶的作用下可以生成双氧水，双氧水随即被具有类过氧化物酶性质的铂超晶格材料催化生成活性氧ROS，去氧化TMB生成蓝色的TMB<supgt;+</supgt;。两步显色反应的颜色复合，可以实现颜色从明度变化到色度变化的转变，有效提高裸眼识别的准确度。提出的这种比色方法在手性色氨酸的即时检测试剂盒方面应用前景广泛。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及纳米材料学和检测，具体涉及一种利用超晶格辅助三色可视化试剂盒检测色氨酸的方法。

技术介绍

1、色氨酸(try)是一种人体必需氨基酸，有旋光性，有左旋、右旋、消旋三种异构体。右旋体d-try和消旋体在人体中含量少、几乎无法被代谢，而左旋体l-try在人体生理活动中扮演了极为重要的作用，涉及神经元功能、代谢、炎症应答、氧化压力、免疫应答以及肠道稳态等。人体中l-try的轻微波动，都可能昭示人体生理环境的异动或疾病进展。所以，迫切需要制定有效方法来监测人体内的l-try，以预测人体健康。

2、l-try的吲哚丙酮酸途径(ipa途径)代谢产物吲哚能与芳香酮类化合物(dmaba)反应生成深红色的吲哚啉衍生物(rose-indole)。这个反应被称为ehrlich试剂反应，是微生物鉴定的经典方法。但rose-indole受限于其较低的消光系数，在低浓度梯度(纳摩尔级别)中吲哚无法触发显色反应。此外，人眼对颜色明度变化的响应远远弱于对颜色色度变化的识别。仅通过吲哚的显色反应检测l-try不具备高的可信度。据已报道的研究，不同颜色的染料复合可以增本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种利用超晶格辅助三色可视化试剂盒检测色氨酸的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2-1中，PBs缓冲体系为pH 5～7，PBs缓冲液、TnaA溶液和L-Try溶液的体积比为5～15:3～5:1。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤2-1中，色氨酸酶溶液和L-色氨酸溶液的浓度比为10～20U/L:1mM。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2-1中，孵育温度为25～35℃，孵育时间为40～60min。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2-2中，混合...

【技术特征摘要】

1.一种利用超晶格辅助三色可视化试剂盒检测色氨酸的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2-1中，pbs缓冲体系为ph 5～7，pbs缓冲液、tnaa溶液和l-try溶液的体积比为5～15:3～5:1。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤2-1中，色氨酸酶溶液和l-色氨酸溶液的浓度比为10～20u/l:1mm。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2-1中，孵育温度为25～35℃，孵育时间为40～60min。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2-2中，混合溶液a、dm...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄又举，丁彩萍，陈子康，
申请(专利权)人：杭州师范大学，
类型：发明
国别省市：