用于检测产气荚膜梭菌的三模态比率生物传感器及其应用制造技术

本发明专利技术提供用于检测产气荚膜梭菌的三模态比率生物传感器及其应用，属于食品安全检测技术领域。所述传感器，包括DNA驱动磁珠。该DNA驱动磁珠，是在磁珠表面修饰有适配体DNA探针，所述适配体DNA探针通过碱基互补配对原则与G‑四链体结合；所述适配体DNA探针的序列如SEQ ID NO:1所示。所述G‑四链体采用如下方法制备：利用RCA模板、引物和T4 DNA连接酶合成环状DNA模板，所述RCA模板、引物序列如SEQ ID NO:2‑3所示；将所述环状DNA模板、捕获探针、phi29 DNA聚合酶和dNTPs混合、反应。本发明专利技术传感器，易操作，可以在多场景中快速、准确、高灵敏度地检测产气荚膜梭菌。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及食品安全检测，具体涉及用于检测产气荚膜梭菌的三模态比率生物传感器及其应用。

技术介绍

1、产气荚膜梭菌是一种严格意义上的厌氧细菌，能形成具有较强抗逆性的孢子。它甚至在哺乳动物和家禽的肠道中发现，并可引起各种食源性疾病，如气性坏疽和人类胃肠道疾病。产气荚膜梭菌中毒的主要来源是未完全煮熟的高蛋白肉，因此，在肉类中检测产气荚膜梭菌是保证食品安全的必要措施。目前，产气荚膜梭菌(c.perfringens)等食源性致病菌的检测手段，包括传统的培养法(平板计数法)、以多肽、蛋白质为分析目标的检测方法(免疫传感器、质谱分析等)等。这些方法中，平板计数法检测结果较为可靠，但耗时较长并且过程繁琐，不利于快检；基于免疫分析的检测方法虽然达到了快速检测的目的，但是易产生假阳性，灵敏度较低；而质谱分析等技术则需要专业仪器和专业人员才可以操作，不利于实际操作。因此，现有技术中缺乏可以快速、准确、高灵敏度、易操作的检测产气荚膜梭菌的方法。

技术实现思路

1、本专利技术的目的是提供用于检测产气荚膜梭菌的三模态比率生物传感器，本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.用于检测产气荚膜梭菌的DNA驱动磁珠，其特征在于是在磁珠表面修饰有适配体DNA探针，所述适配体DNA探针通过碱基互补配对原则与G-四链体结合；所述适配体DNA探针的序列如SEQ ID NO:1所示。

2.根据权利要求1所述磁珠，其特征在于所述G-四链体采用如下方法制备：

3.权利要求1所述用于检测产气荚膜梭菌的DNA驱动磁珠的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

4.根据权利要求3所述制备方法，其特征在于在含有1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺的溶液中，加入羧基磁珠，对磁珠进行活化；在活化后的磁珠中加入适配体DNA探针，...

【技术特征摘要】

1.用于检测产气荚膜梭菌的dna驱动磁珠，其特征在于是在磁珠表面修饰有适配体dna探针，所述适配体dna探针通过碱基互补配对原则与g-四链体结合；所述适配体dna探针的序列如seq id no:1所示。

2.根据权利要求1所述磁珠，其特征在于所述g-四链体采用如下方法制备：

3.权利要求1所述用于检测产气荚膜梭菌的dna驱动磁珠的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

4.根据权利要求3所述制备方法，其特征在于在含有1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺和n-羟基琥珀酰亚胺的溶液中，加入羧基磁珠，对磁珠进行活化；在活化后的磁珠中加入适配体dna探针，孵育，将适配体dna探针修饰在羧基磁珠表面。

5.根据权利要求3或4所述制备方法，其特征在于步骤(2)中所述g-四链体采用如下方法制备：利用rca模板、引物和t4 dn...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘芳，孙芝兰，王道营，王文卓，林婷婷，袁伟，
申请(专利权)人：江苏省农业科学院，
类型：发明
国别省市：