一种重组人白介素-2或/和其突变体在原核体系中可溶性表达及高效纯化的方法技术

本发明专利技术提供的一种重组人白介素‑2或/和其突变体在原核体系中可溶性表达及高效纯化的方法，该方法利用两个及以上的Sumo序列串联融合的方法，实现人IL‑2在大肠杆菌表达体系中的可溶性表达，避免了传统大肠杆菌体系表达IL‑2形成包涵体，避免IL‑2及IL‑2M以无结构、无活性的包涵体形式表达，避免下游进行IL‑2蛋白复性的工序；并通过简单的层析步骤从组分复杂的细菌破碎上清液体系中高效纯化得到rhIL‑2及IL‑2M蛋白；具有操作简便，适合规模化放大、周期短、纯度高、工艺稳定等特点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及了人白介素-2的制备，具体涉及了一种重组人白介素-2或/和其突变体在原核体系中可溶性表达及高效纯化的方法。

技术介绍

1、人白介素-2(hil-2)，又被称为t细胞生长因子，是人体内众多重要细胞因子之一。天然人白介素-2由133个氨基酸组成，其理论分子量约为15.4kda，理论等电点为6.7。人il-2中含有较高比例的亮氨酸(16.5％)，1个糖基化位点(thr3)和含有3个半胱氨酸，其中cys58和cys105之间形成的二硫键对il-2的结构稳定性和生物活性至关重要。人il-2通过与il-2rα(cd25)、il-2rβ(cd122)和il-2rγc(cd132)三种受体结合介导生理信号并发挥免疫调节的生理功能，其中il-2rα是il-2的特异性受体(kd＝～10-8m)；il-2rβ是il-2与il-15共同受体；而il-2rγc则为il-2、il-4、il-7、il-9、il-15、il-21的共同受体。il-2与il-2rα单独结合并不能介导有效的生理信号，il-2与二聚化受体(il-2rβ和il-2rγc，kd＝～10-9m)和三聚本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种可溶性表达及高效纯化重组人白介素-2及/或其突变体的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的可溶性表达及高效纯化重组人白介素-2及/或其突变体的方法，其特征在于，所述步骤1中，将人源白介素-2的氨基酸序列或/和人源白介素-2突变体的氨基酸序列依次进行基因序列转换、大肠杆菌宿主偏好密码子优化，获得人源白介素-2或/和人源白介素-2突变体的基因序列。

3.根据权利要求2所述的可溶性表达及高效纯化重组人白介素-2及/或其突变体的方法，其特征在于，人源白介素-2的基因序列如SEQ ID NO：1所示。

4.根据权利要求1所述的可溶性表...

【技术特征摘要】

1.一种可溶性表达及高效纯化重组人白介素-2及/或其突变体的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的可溶性表达及高效纯化重组人白介素-2及/或其突变体的方法，其特征在于，所述步骤1中，将人源白介素-2的氨基酸序列或/和人源白介素-2突变体的氨基酸序列依次进行基因序列转换、大肠杆菌宿主偏好密码子优化，获得人源白介素-2或/和人源白介素-2突变体的基因序列。

3.根据权利要求2所述的可溶性表达及高效纯化重组人白介素-2及/或其突变体的方法，其特征在于，人源白介素-2的基因序列如seq id no：1所示。

4.根据权利要求1所述的可溶性表达及高效纯化重组人白介素-2及/或其突变体的方法，其特征在于，所述步骤2中，原核感受态细胞为大肠杆菌或枯草芽孢杆菌。

5.根据权利要求4所述的可溶性表达及高效纯化重组人白介素-2及/或其突变体的方法，其特征在于，所述步骤2中，质粒载体为pet系列质粒或pbv系列质粒。

6.根据权利要求5所述的可溶性表达及高效纯化重组人白介素-2及/或其突变体的方法，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：张纯，余蓉，郑永祥，张敏慧，王洒，
申请(专利权)人：四川大学，
类型：发明
国别省市：