一种3-甾酮-Δ1-脱氢酶及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶及其编码基因和应用，提供了含有其基因的表达载体和含有该表达载体的基因工程重组菌株。本发明专利技术提供的3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶为一新的3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶，该酶对22‑羟基‑23,24‑二降胆‑4‑烯‑3‑酮具有高的活性。本发明专利技术提供的重组菌株可用于转化22‑羟基‑23,24‑二降胆‑4‑烯‑3‑酮，以高底物投料浓度，获得高收率的目标产物，无副产物，转化率不低于94％，有效的减少了底物4‑HBC的残留，减少了分离提取的步骤，具有很好的产业化前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程和酶工程，具体涉及一种3-甾酮-δ1-脱氢酶及其应用。

技术介绍

1、甾体是一类具有环戊烷多氢菲环结构的化合物，通常在c-10和c-13位有甲基基团，在c-17位有烷基侧链。甾体作为一种细胞膜的组分，在生物体中具有重要的作用。一些甾体还具有激素和信号分子的作用。自上世纪50年代发现甾体药物以来，到目前为止已经鉴定了400多种甾体药物。甾体药物具有很强的抗感染、抗过敏、抗病毒和抗休克等药理作用。近年来，甾体药物在医疗领域的应用范围不断扩大，被广泛用于治疗风湿病、心血管、胶原性病症、淋巴白血病、人体器官移植、抗肿瘤、细菌性脑炎、皮肤病、内分泌失调、老年性疾病等，甾体激素药物已成为仅次于抗生素的第二大类药物。

2、

3、ⅰ

4、22-羟基-23，24-双降胆甾-1,4-二烯-3-酮，英文名为22-hydroxy-23,24-bisnorchol-1,4-dien-3-one（1,4-hbc），结构式如式ⅰ所示，可以作为合成许多甾体激素药物的中间体，如肾上腺皮质激素，孕激素，蛋白同化激素等。

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【技术保护点】

1.一种3-甾酮-Δ1-脱氢酶，其为如下(1)或(2)的蛋白质；(1)氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示的蛋白质；(2)与(1)中蛋白质具有至少80％、至少90%、至少95%、至少99%同源性、且具有(1)中蛋白质功能的蛋白质。

2.一种多核苷酸，其编码如权利要求1所述的3-甾酮-Δ1-脱氢酶。

3.如权利要求2所述的多核苷酸，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。

4.一种基因工程表达载体，包含如权利要求2或3所述的多核苷酸。

5.一种基因工程表达载体，其特征在于，其出发载体为pET-21a。>

6.一种基因...

【技术特征摘要】

1.一种3-甾酮-δ1-脱氢酶，其为如下(1)或(2)的蛋白质；(1)氨基酸序列如seq id no：1所示的蛋白质；(2)与(1)中蛋白质具有至少80％、至少90%、至少95%、至少99%同源性、且具有(1)中蛋白质功能的蛋白质。

2.一种多核苷酸，其编码如权利要求1所述的3-甾酮-δ1-脱氢酶。

3.如权利要求2所述的多核苷酸，其特征在于，其核苷酸序列如seq id no：2所示。

4.一种基因工程表达载体，包含如权利要求2或3所述的多核苷酸。

5.一种基因工程表达载体，其特征在于，其出发载体为pet-21a。

6.一种基因工程表达菌株，含有如权利要求4或5所述重组表达载体，或者基因组中整合有外源的如权利要求2或3所述的多核苷酸。

【专利技术属性】
技术研发人员：王玉，张瑞，冯进辉，吴洽庆，朱敦明，马延和，
申请(专利权)人：中国科学院天津工业生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：