一种可剪切环状引物及其试剂盒与扩增方法技术

技术编号:41748805 阅读:26 留言:0更新日期:2024-06-21 21:34
一种可剪切环状引物及其试剂盒与扩增方法,可剪切环状引物,包含:通用引物序列、目标特异序列,所述目标特异序列包含至少一个核糖核苷酸。本发明专利技术设计的可剪切环状引物有效避免引物之间形成二聚体;核糖核苷酸的高特异剪切特性既提高了从环状引物至线性引物转化的效率,也提高了高特异性的目标物扩增的效率;环状引物结构进一步提升引物的稳定性进而提升扩增的稳定性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物检测领域,具体涉及一种可剪切环状引物及其试剂盒与扩增方法


技术介绍

1、基因测序领域在生命科学的研究中起着十分重要的意义,而高通量测序技术是目前测序领域中最重要的技术之一。对样本序列进行高通量测序,首先需要构建可用于测序的dna文库。传统鸟枪法测序文库构建流程步骤较长,一般需要经过以下过程:(1)将待测基因组dna分子用超声波打碎成200~500bp长的序列片段;(2)将打碎后的基因组进行末端补平;(3)将补平后的dna片段加上a尾;(4)对加上a尾的片段进行接头连接;(5)对接头连接后dna片段进行pcr扩增;(6)对扩增后的文库进行磁珠纯化。传统鸟枪法dna高通量测序针对的是全基因组dna,包含了大量的非目标基因序列,这些非目标序列严重干扰目标序列的分析,甚至导致目标区域无法被测序到,比如在肿瘤基因变异检测、病原微生物检测上,95%以上基因序列为无用序列,使用鸟枪法基因组dna测序无法达到检测目的。

2、为了降低测序中非目标序列的干扰,行业内发展出高通量靶向测序技术(tngs)。高通量靶向测序的具体流程为,针对目标检测区本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种可剪切环状引物,其特征在于,所述可剪切环状引物包含:通用引物序列、目标特异序列,所述目标特异序列包含至少一个核糖核苷酸。

2.如权利要求1所述的可剪切环状引物,其特征在于,所述通用引物序列为脱氧核糖核苷酸序列;

3.如权利要求1所述的可剪切环状引物,其特征在于,所述目标特异序列包括位于所述至少一个核糖核苷酸下游的脱氧核糖核苷酸,所述脱氧核糖核苷酸中的碱基序列可与模板核酸分子的靶标序列中的碱基序列反向互补配对;

4.如权利要求1所述的可剪切环状引物,其特征在于,所述至少一个核糖核苷酸中的碱基序列与模板核酸分子的靶标序列中的碱基序列反向互补配对或错...

【技术特征摘要】

1.一种可剪切环状引物,其特征在于,所述可剪切环状引物包含:通用引物序列、目标特异序列,所述目标特异序列包含至少一个核糖核苷酸。

2.如权利要求1所述的可剪切环状引物,其特征在于,所述通用引物序列为脱氧核糖核苷酸序列;

3.如权利要求1所述的可剪切环状引物,其特征在于,所述目标特异序列包括位于所述至少一个核糖核苷酸下游的脱氧核糖核苷酸,所述脱氧核糖核苷酸中的碱基序列可与模板核酸分子的靶标序列中的碱基序列反向互补配对;

4.如权利要求1所述的可剪切环状引物,其特征在于,所述至少一个核糖核苷酸中的碱基序列与模板核酸分子的靶标序列中的碱基序列反向互补配对或错配。

【专利技术属性】
技术研发人员:任胜强朱方何陆才瑞张涛
申请(专利权)人:广东润鹏生物技术有限公司
类型:发明
国别省市:

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