高表达白蛋白的hWJ-MSCs肝细胞体外诱导体系、诱导培养方法及应用技术

本发明专利技术提供了高表达白蛋白的hWJ‑MSCs肝细胞体外诱导体系、诱导培养方法及应用，用于体外诱导hWJ‑MSCs细胞分化为肝成熟细胞，包含基础培养基以及与该基础培养基分别组合使用的内胚层细胞诱导分化因子、肝前体细胞诱导分化因子、肝成熟细胞诱导分化因子。其中，基础培养基为无血清IMDM培养基；内胚层细胞诱导分化因子包括EGF、FGF2、丁酸钠和Wnt信号通路激动剂；肝前体细胞诱导分化因子包含FGF2、HGF和ITS‑X，肝成熟细胞诱导分化因子包含抑瘤素M、地塞米松和ITS‑X。使用本发明专利技术的化学成份明确的体外诱导体系对第4代hWJ‑MSCs细胞进行诱导后，细胞形态呈现成熟肝细胞典型的双核特征，表达上皮细胞和成熟肝细胞基因，并且具备一定生理功能的成熟肝细胞，特别是白蛋白显著高表达。该诱导方案为获取用于细胞治疗的肝细胞提供了新的思路，且重复性好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医药工程，涉及一种高表达白蛋白的hwj-mscs肝细胞体外诱导体系、诱导培养方法及应用。

技术介绍

1、hwj-mscs作为一种分离自人脐带华通氏胶的间充质干细胞，可以通过非手术方法获得，被认为是来源最丰富，最有应用前景的脐带间充质干细胞。迄今为止，已有多篇研究报道了hwj-mscs分化为外胚层及衍生细胞(神经元细胞、视网膜祖细胞和精子样细胞等)、中胚层衍生细胞(心肌细胞、骨骼肌细胞和内皮细胞等)和内胚层及衍生细胞(肝细胞样细胞和胰腺细胞等)的化学诱导方案。

2、小分子化合物具有半衰期长、作用稳定、效应明确等特点，因此更适合于干细胞的长期分化诱导过程。考虑到临床治疗的需求，在肝向分化的研究中，研究人员普遍采用了无血清培养基中添加小分子化合物的诱导方案，经过一步或多步骤的诱导实现细胞的重编程，但目前报道的多个诱导方案在适用性和诱导效率方面仍然有很大的改进的空间，特别是很多诱导方案的可重复性有待进一步给出评价。

3、小分子化合物在体内细胞的诱导分化过程中起着重要作用：丁酸钠(sodiumbutyrate，nabu)是丁本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种高表达白蛋白的hWJ-MSCs肝细胞体外诱导体系，其特征在于，用于体外诱导hWJ-MSCs细胞分化为肝成熟细胞，包含基础培养基以及与该基础培养基分别组合使用的内胚层细胞诱导分化因子、肝前体细胞诱导分化因子、肝成熟细胞诱导分化因子，

2.根据权利要求1所述的高表达白蛋白的hWJ-MSCs肝细胞体外诱导体系，其特征在于：

3.根据权利要求1所述的高表达白蛋白的hWJ-MSCs肝细胞体外诱导体系，其特征在于：

4.采用权利要求1～3任一项所述的诱导体系体外诱导hWJ-MSCs细胞分化为肝成熟细胞的方法，其特征在于，包括如下步骤：</p>

5.根据...

【技术特征摘要】

1.一种高表达白蛋白的hwj-mscs肝细胞体外诱导体系，其特征在于，用于体外诱导hwj-mscs细胞分化为肝成熟细胞，包含基础培养基以及与该基础培养基分别组合使用的内胚层细胞诱导分化因子、肝前体细胞诱导分化因子、肝成熟细胞诱导分化因子，

2.根据权利要求1所述的高表达白蛋白的hwj-mscs肝细胞体外诱导体系，其特征在于：

3.根据权利要求1所述的高表达白蛋白的hwj-mscs肝细胞体外诱导体系，其特征在于：

4.采用权利要求1～3任一项所述的诱导体...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱海英，丁赛，张红霞，虞欣璐，
申请(专利权)人：中国人民解放军海军军医大学，
类型：发明
国别省市：