一种甲型流感病毒的快速检测方法技术

本发明专利技术公开了一种甲型流感病毒的快速检测方法，涉及分子诊断技术领域，其技术方案要点是：所述方法包括以下步骤：利用RT‑ERA技术对甲型流感病毒的RNA进行逆转录和酶促重组扩增；设计针对甲型流感病毒四种亚型H1N1、H3N2、H5N1、H7N9的膜蛋白(MA)或血凝素(HA)保守区域的特异性引物和探针；在40℃条件下恒温孵育20分钟内完成检测；检测灵敏度达到至少102copies/μL的甲型流感病毒四亚型重组质粒或质控品；确保与甲型流感病毒其他亚型、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒、新型冠状病毒、登革热病毒等无交叉反应；本发明专利技术不仅提高了甲型流感病毒重要亚型检测的速度和准确性，还降低了对设备和技术人员的依赖，使得检测更加便捷，适用于基层或资源匮乏的实验室进行现场快速风险筛查，为甲型流感病毒重要亚型的防控提供了有力的技术支持。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子诊断，更具体地说，它涉及一种甲型流感病毒的快速检测方法。

技术介绍

1、甲型流感病毒是一种重要的人畜共患病呼吸道疾病病原体，属于正黏病毒科，负链rna病毒。其表面糖蛋白血凝素(ha)和神经氨酸酶(na)变异程度高，对病毒分类和传播有重要影响。甲型流感病毒宿主广泛，包括禽类、哺乳动物、爬行类及人类。

2、目前，甲型流感病毒的检测方法主要分为免疫学方法和分子生物学方法。免疫学方法如胶体金免疫层析法操作便捷、检测快速，但存在敏感性和准确度不足的问题，尤其在检测流感病毒变异株时容易漏检。分子生物学方法如实时荧光定量pcr灵敏度高、能区分具体亚型，但对设备和专业技术人员要求高，且检测时间长，不适用于基层推广。

3、本专利技术提出的rt-era技术，针对甲型流感病毒部分重要亚型的快速检测，具有时间短(20分钟内完成)、灵敏度高、特异性强的特点，且无需精密复杂的仪器设备，适用于普通现场环境或恶劣环境。该技术操作简单，经过简单培训即可操作，非常适合基层或资源匮乏的实验室进行甲型流感病毒的快速检测或筛查，有望为特定亚型的甲型流感病毒本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种甲型流感病毒的快速检测方法，其特征是：所述方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征是：所述方法还包括：对于荧光型ERA，探针长度为45b-55bp之间，内部标记有荧光基团FAM、荧光猝灭基团BHQ及四氢呋喃残基THF，尾端加设阻断基团C3-spacer。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征是：所述方法还包括：对于试纸型ERA，设计引物和探针以适应测流层析试纸法，其中引物的5’端进行生物素标记以提高灵敏度和特异性。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征是：所述方法针对H1N1亚型的引物对如SEQ IDNO.1-SEQ ID NO...

【技术特征摘要】

1.一种甲型流感病毒的快速检测方法，其特征是：所述方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征是：所述方法还包括：对于荧光型era，探针长度为45b-55bp之间，内部标记有荧光基团fam、荧光猝灭基团bhq及四氢呋喃残基thf，尾端加设阻断基团c3-spacer。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征是：所述方法还包括：对于试纸型era，设计引物和探针以适应测流层析试纸法，其中引物的5’端进行生物素标记以提高灵敏度和特异性。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征是：所述方法针对h1n1亚型的引物对如seq idno.1-seq id no.8所示，所述方法针对...

【专利技术属性】
技术研发人员：张逸龙，张冬梅，张骏，赵晓阳，张闯，姜鹏月，周方斌，银子麒，朱佳昕，
申请(专利权)人：中国人民解放军海军军医大学，
类型：发明
国别省市：