【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物工程，具体涉及一种提高重组stable菌株发酵生产mrna模板质粒的产量的方法。
技术介绍
0、背景
1、mrna模板质粒在生物技术和医学领域有广泛的应用，尤其是在基因治疗、疫苗开发和蛋白质生产等方面。
2、大肠杆菌是一种常用于发酵生产mrna模板质粒的微生物，其中stable菌株转化效率高而备受关注。然而不管是stable菌株还是其他大肠杆菌菌株，在发酵过程中都常因自身代谢与发酵培养基配方和发酵工艺的不匹配导致发酵副产物有机酸(如乙酸)的积累，使得碳源浪费，副产物有机酸的积累抑制菌体的生长和抑制终产物mrna模板质粒的合成。因此，仍有必要优化重组stable菌株的发酵方法，在保证质粒质量的前提下进一步提高碳源利用率和进一步目标质粒产量，尤其是提高单位菌体表达量，从而随着生产规模的扩大，mrna模板质粒的单位成本降低，将有利于提高mrna模板质粒在基因治疗和疫苗开发中的应用。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种提高重组stable菌株发酵...
【技术保护点】
1.一种提高重组Stable菌株发酵生产mRNA模板质粒的产量的方法，其特征在于，在发酵培养重组Stable菌株时，先将重组Stable菌株的种子液接种至基础培养基中进行发酵培养，然后连续加入补料培养基进行连续补料发酵培养，
2.根据权利要求1所述的提高重组Stable菌株发酵生产mRNA模板质粒的产量的方法，其特征在于，所述基础培养基的配方为：七水合硫酸亚铁10-120mg/L，二水合氯化铜8-70mg/L，对羟基苯甲酸50-400mg/L，葡萄糖10-15g/L，酵母浸粉10-30g/L，酵母蛋白胨5-15g/L，氯化钠0.3-0.7g/L，硫酸铵5-...
【技术特征摘要】
1.一种提高重组stable菌株发酵生产mrna模板质粒的产量的方法，其特征在于，在发酵培养重组stable菌株时，先将重组stable菌株的种子液接种至基础培养基中进行发酵培养，然后连续加入补料培养基进行连续补料发酵培养，
2.根据权利要求1所述的提高重组stable菌株发酵生产mrna模板质粒的产量的方法，其特征在于，所述基础培养基的配方为：七水合硫酸亚铁10-120mg/l，二水合氯化铜8-70mg/l，对羟基苯甲酸50-400mg/l，葡萄糖10-15g/l，酵母浸粉10-30g/l，酵母蛋白胨5-15g/l，氯化钠0.3-0.7g/l，硫酸铵5-15g/l，无水硫酸镁1-2g/l，十二水磷酸氢二钠4-8g/l，磷酸氢二钾2-5g/l，硫酸卡那霉素0.03-0.07g/l和消泡剂0.05-0.5ml/l，余量去离子水，
3.根据权利要求1所述的提高重组stable菌株发酵生产mrna模板质粒的产量的方法，其特征在于，所述基础培养基的配方为：七水合硫酸亚铁10-30mg/l，二水合氯化铜8-20mg/l，对羟基苯甲酸50-100mg/l，葡萄糖10-15g/l，酵母浸粉15-25g/l，酵母蛋白胨5-15g/l，氯化钠0.3-0.7g/l，硫酸铵5-15g/l，无水硫酸镁1-2g/l，十二水磷酸氢二钠4-8g/l，磷酸氢二钾2-5g/l，硫酸卡那霉素0.03-0.07g/l和消泡剂0.05-0.2ml/l，余量去离子水，
4.根据权利要求1所述的提高重组stable菌株发酵生产mrna模板质粒的产量的方法，其特征在于，所述发酵培养的条件为：接种量体积比为4.5％-5.5％，温度36.5-37.5℃，ph6.8-7.0，溶氧量30％-70％，通气量0.8-1.5vvm，转速300-1000r/min。
5.根据权利要求4所述的提高重组stable菌株发酵生产mrna模板质粒的产量的方法，其特征在于，所述溶氧量为40％-50％。
6.根据权利要求4所述的提高重组stable菌株发酵...
【专利技术属性】
技术研发人员：孔帅，李光勇，朴希俊，王琳琳，叶炜，任科云，王潇，黄日，杨静静，朱亮，
申请(专利权)人：楷拓生物科技苏州有限公司，
类型：发明
国别省市：
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