一种以山梨糖为底物合成D-塔格糖的方法技术

本发明专利技术公开了一种以山梨糖为底物合成D‑塔格糖的重组地衣芽孢杆菌，属于生物技术领域。D‑塔格糖是一种具有营养价值的低热量功能性糖，在食品、医药、保健等领域具有广泛的应用前景。本发明专利技术的重组地衣芽孢杆菌细胞高效表达了D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶，可以山梨糖为底物转化生成D‑塔格糖。所述的全细胞催化方法及条件：pH 5.0～9.0，细胞添加量OD<subgt;600</subgt;为5～40，底物L‑山梨糖浓度50g/L～500g/L，50～65℃反应0～3h。本发明专利技术合成D‑塔格糖具有催化剂使用成本低，进一步地可为利用山梨醇等廉价原料合成D‑塔格糖奠定实验基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种以山梨糖为底物合成d-塔格糖的方法，属于生物。

技术介绍

1、d-塔格糖(d-tagatose)是一种天然稀有单糖，其结构与d-阿洛酮糖相似，是一种果糖差向异构体。d-塔格糖现已被批准为新食品原料，其具有热量低、甜度高、易吸收、吸湿性低、热稳定性好等优势。研究表明，d-塔格糖对龋齿、高血糖等健康疾病具有一定的预防和理疗作用，因而其在化妆品、医药、食品加工领域拥有广阔应用前景。然而与其它稀有单糖如d-阿洛酮糖相比，d-塔格糖合成技术壁垒高且生产成本居高不下，目前市场占比较低。

2、d-塔格糖可以通过化学法进行合成，化学合成法具体是以半乳糖为原材料，在碱性催化剂作用下制得成品，该法具有生产成本高、生产流程复杂等缺陷，不适合规模化生产。随着膳食营养与生命健康产业的发展，功能代糖的开发逐渐成为生物
的研究热点，基于合成生物学策略开发高附加值、低热量甜味剂的绿色、低成本生产路线将替代传统的化学合成方法。因此，生物合成法是目前d-塔格糖制备的主要途径。生物合成法目前主要以乳糖为原材料，通过乳糖酶水解作用获得半乳糖，再经阿拉伯糖酶异构本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.D-阿洛酮糖-3-差向异构酶在生产D-塔格糖中的应用，其特征在于，所述D-阿洛酮糖-3-差向异构酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.一种全细胞催化制备D-塔格糖的方法，其特征在于，所述方法以山梨糖为底物，利用重组菌作为细胞催化剂组成催化体系，催化合成D-塔格糖；所述重组菌为表达有D-阿洛酮糖-3-差向异构酶的宿主细胞，所述D-阿洛酮糖-3-差向异构酶的氨基酸序列如SEQ IDNO.1所示。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述宿主细胞为地衣芽孢杆菌。

4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述细胞催化剂的制备方法具体...

【技术特征摘要】

1.d-阿洛酮糖-3-差向异构酶在生产d-塔格糖中的应用，其特征在于，所述d-阿洛酮糖-3-差向异构酶的氨基酸序列如seq id no.1所示。

2.一种全细胞催化制备d-塔格糖的方法，其特征在于，所述方法以山梨糖为底物，利用重组菌作为细胞催化剂组成催化体系，催化合成d-塔格糖；所述重组菌为表达有d-阿洛酮糖-3-差向异构酶的宿主细胞，所述d-阿洛酮糖-3-差向异构酶的氨基酸序列如seq idno.1所示。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述宿主细胞为地衣芽孢杆菌。

4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述细胞催化剂的制备方法具体如下：将重组菌的种子液以3％～5％的接种量转接至发酵培养基中，37℃～42℃培养24h～48h后，从发酵液中收集菌体细胞，即为细胞催化剂。

5.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：李由然，吴志勇，石贵阳，刘智恺，
申请(专利权)人：无锡特殊食品与营养健康研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：