【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及菌株提取领域，尤其涉及一种空间诱变抗氧化节杆菌及其蓝色素的提取方法和应用。
技术介绍
1、大多数细菌能够生产功能性次级代谢产物，但由于目前大多数细菌的遗传操作体系不成熟，导致细菌所产生的功能性次级代谢产物无法用于大规模生产。细菌是原核生物，所以细胞结构简单，基因组相对于真核生物小得多，为了适应各种环境就更容易变异，因此利用细菌容易变异的特点实施空间诱变育种，利用太空微重力效应、高真空、极端温差、弱磁场和高能粒子辐射等诱变作用，能够快速且高效获得目的菌株。
2、汞在环境中以多种形态存在，有单质汞、无机汞以及有机汞。相比单质汞和无机汞，有机汞具有更强的毒性。20世纪中期震惊世界的日本水俣岛事件的主要诱因便是由于水体中甲基汞含量超标导致，甲基汞由于其脂溶性强使其极易被生物体吸收，进而通过食物链传播进入人体，攻击人体神经中枢。因此，如何简单、快速、高效检测水体中甲基汞浓度对于预防甲基汞中毒事件具有十分重要的意义。
3、目前甲基汞的分析方法主要有色谱法、质谱法以及荧光光谱法等。虽然这些方法具有灵敏度高、检测限低等优势，但这些方法需要昂贵的仪器设备、专业的操作人员、检测时间长，且成本高。此外，相比于色谱法等检测方法，比色检测方法可以通过肉眼或吸收光谱立刻读出，具有快速、便捷、能够实现现场检测以及经济等显著优点，极具吸引力。
技术实现思路
1、本专利技术所要解决的技术问题是提供一种空间诱变抗氧化节杆菌。
2、本专利技术所要解决的另一个技术问题是提
3、本专利技术所要解决的第三个技术问题是提供该蓝色素的应用。
4、为解决上述问题，本专利技术所述的一种空间诱变抗氧化节杆菌，其特征在于：该抗氧化节杆菌为 arthrobacter antioxidansm171，其经太空诱变得到；所述 arthrobacter antioxidansm171的保藏编号为gdmcc no. 64289，保藏于广东省微生物菌种保藏中心（保藏单位地址：中国.广东.广州市先烈中路100号大院59号楼5楼；保藏日期：2024年01月17日）。
5、如上所述的一种空间诱变抗氧化节杆菌的蓝色素的提取方法，包括以下步骤：
6、⑴抗氧化节杆菌以0.1%的接种量划线接种于r2a固体平板培养基，15℃培养7天，得到活化后的纯培养菌株；
7、⑵将所述活化后的纯培养菌株以1%的接种量接种于5×r2a一级种子液体培养基，于15℃、160rpm摇床培养4天，得到一级种子液；
8、⑶将所述一级种子液以5%的接种量接种于1×r2a发酵培养基中，于15℃、160rpm摇床培养3~4天，得到发酵液；
9、⑷所述发酵液经过5000rpm 离心10min，得到菌体发酵液；
10、⑸所述菌体发酵液先用xad-16型大孔树脂吸附，再经100%纯甲醇解吸后蒸干，即得发酵液上清粗提物；
11、⑹所述发酵液上清粗提物先通过0.45nm铝膜过滤，然后通过lh-20葡聚糖凝胶柱反向硅胶柱获得蓝色素，流动相为100%甲醇；最后冲洗非蓝色馏分后经100%纯水冲洗获得蓝色馏分。
12、所述步骤⑴中r2a固体平板培养基是指将0.25g蛋白胨、0.5 g酸水解酪蛋白、0.5g酵母浸粉、0.5 g可溶性淀粉、0.3 g磷酸氢二钾、0.1 g硫酸镁、0.3 g丙酮酸钠、12.0 g琼脂、0.25 g蛋白胨、0.5 g葡萄糖、20g琼脂与1l纯水混合均匀后，即得。
13、所述步骤⑵中5×r2a一级种子液体培养基是指将1.25g蛋白胨、2.5g酸水解酪蛋白、2.5g酵母浸粉、2.5g可溶性淀粉、1.5g磷酸氢二钾、0.5g硫酸镁、1.5g丙酮酸钠、1.25 g蛋白胨、2.5g葡萄糖与1l纯水混合均匀后，即得。
14、所述步骤⑶中1×r2a发酵培养基是指将0.25g蛋白胨、0.5 g酸水解酪蛋白、酵0.5g母浸粉、0.5 g可溶性淀粉、0.3 g磷酸氢二钾、0.1 g硫酸镁、0.3 g丙酮酸钠、0.25 g蛋白胨、0.5 g葡萄糖与1l纯水混合均匀后，即得。
15、如上所述方法制得的蓝色素在水体甲基汞比色检测中的应用。
16、本专利技术与现有技术相比具有以下优点：
17、1、本专利技术采用的抗氧化节杆菌m171所产生的蓝色素提取简便，在获得发酵液后仅需2步提纯工艺，同时该材料为天然来源，在环境中易降解，不具备二次污染。
18、2、本专利技术所得蓝色素在甲基汞检测中能够反应迅速，检测在五分钟以内完成，甲基汞检出限达到50ppt。
19、3、本专利技术蓝色素在使用时，具有特异性强、携带方便、快速、廉价且分析灵敏等特点。
20、4、本专利技术成本低且可以通过原位检测实现甲基汞形态的现场快速分析。
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1.一种空间诱变抗氧化节杆菌，其特征在于：该抗氧化节杆菌为Arthrobacter antioxidans M171，其经太空诱变得到；所述Arthrobacter antioxidans M171的保藏编号为GDMCC No. 64289。
2.如权利要求1所述的一种空间诱变抗氧化节杆菌的蓝色素的提取方法，包括以下步骤：
3.如权利要求2所述的一种空间诱变抗氧化节杆菌的蓝色素的提取方法，其特征在于：所述步骤⑴中R2A固体平板培养基是指将0.25g蛋白胨、0.5 g酸水解酪蛋白、0.5 g酵母浸粉、0.5 g可溶性淀粉、0.3 g磷酸氢二钾、0.1 g硫酸镁、0.3 g丙酮酸钠、12.0 g琼脂、0.25g蛋白胨、0.5 g葡萄糖、20g琼脂与1L纯水混合均匀后，即得。
4.如权利要求2所述的一种空间诱变抗氧化节杆菌的蓝色素的提取方法，其特征在于：所述步骤⑵中5×R2A一级种子液体培养基是指将1.25g蛋白胨、2.5g酸水解酪蛋白、2.5g酵母浸粉、2.5g可溶性淀粉、1.5g磷酸氢二钾、0.5g硫酸镁、1.5g丙酮酸钠、1.25 g蛋白胨、2
5.如权利要求2所述的一种空间诱变抗氧化节杆菌的蓝色素的提取方法，其特征在于：所述步骤⑶中1×R2A发酵培养基是指将0.25g蛋白胨、0.5 g酸水解酪蛋白、酵0.5 g母浸粉、0.5 g可溶性淀粉、0.3 g磷酸氢二钾、0.1 g硫酸镁、0.3 g丙酮酸钠、0.25 g蛋白胨、0.5g葡萄糖与1L纯水混合均匀后，即得。
6.如权利要求2~5任一项所述方法制得的蓝色素在水体甲基汞比色检测中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种空间诱变抗氧化节杆菌，其特征在于：该抗氧化节杆菌为arthrobacter antioxidans m171，其经太空诱变得到；所述arthrobacter antioxidans m171的保藏编号为gdmcc no. 64289。
2.如权利要求1所述的一种空间诱变抗氧化节杆菌的蓝色素的提取方法，包括以下步骤：
3.如权利要求2所述的一种空间诱变抗氧化节杆菌的蓝色素的提取方法，其特征在于：所述步骤⑴中r2a固体平板培养基是指将0.25g蛋白胨、0.5 g酸水解酪蛋白、0.5 g酵母浸粉、0.5 g可溶性淀粉、0.3 g磷酸氢二钾、0.1 g硫酸镁、0.3 g丙酮酸钠、12.0 g琼脂、0.25g蛋白胨、0.5 g葡萄糖、20g琼脂与1l纯水混合均匀后，即得。
4.如权利要求...
【专利技术属性】
技术研发人员：于雪，张威，章高森，张昺林，刘光琇，陈拓，吴玉洁，武师宇，
申请(专利权)人：中国科学院西北生态环境资源研究院，
类型：发明
国别省市：
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