基因组合及其用途制造技术

本发明专利技术涉及一种用于控制外源基因不在植物的特定组织中表达的新的基因组合，以及应用该基因组合培育转基因植物的方法。所述方法可用于培育例如胚乳0表达型转基因水稻，即由所述水稻所生产的稻米胚乳中没有任何转基因产物蛋白的合成和积累，从而排除公众对转基因粮食作物食用安全性的担忧。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及转基因植物领域。具体地，本专利技术涉及一种用于控制植物中的外源目的基因的表达的基因组合，以及应用该基因组合培育转基因植物的方法。

技术介绍

1、转基因技术自上世纪八十年代专利技术以来取得了举世瞩目的成就。培育的转基因作物已在全球28个国家种植，2014年生产面积已达1.815亿公顷(james，et al.，2014)。目前，已有超过10个粮食和纤维作物被批准商业化种植，范围从大宗的粮食、经济作物如玉米、大豆和棉花等到小宗的水果、蔬菜作物如木瓜、茄子和南瓜等。

2、水稻是全球50％人口的主粮作物。尽管已于2000年宣告成功研制出转基因水稻系(tu，et al.，2000)，例如优良的转基因恢复系明恢63/bt(华恢1号)及其杂交稻汕优63/bt，并于2009年11月在经过研制方和第三方反复验证其无生物安全性风险的情况下，获得我国颁发的生物安全证书。然而，由于这些传统的转bt基因抗虫水稻是胚乳表达型的，即所生产的转基因大米中有bt基因的表达产物积累，依然很难使公众认可它的食用安全性，其商业化种植也因此一直未获批准。这种状况不仅在中国本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于控制植物中的外源目的基因的表达的基因组合，其由锁定元件和钥匙基因组成，其中所述锁定元件包含SEQ ID NO:5或8所示的核苷酸序列，并且能够锁定与其可操作连接的外源目的基因的表达的核苷酸序列；所述钥匙基因包含SEQ ID NO:3或6所示的核苷酸序列，并且能够解除所述锁定元件对于外源目的基因的表达锁定的核苷酸序列，

2.权利要求1的基因组合，其中所述组成型启动子选自花椰菜花叶病毒35S启动子、来自根癌农杆菌Ti质粒T-DNA区域的胭脂碱合成酶基因Ocs启动子、水稻肌动蛋白启动子Actin I和玉米泛素基因启动子Ubi。

3.权利要求1的基因组合，其中...

【技术特征摘要】

1.一种用于控制植物中的外源目的基因的表达的基因组合，其由锁定元件和钥匙基因组成，其中所述锁定元件包含seq id no:5或8所示的核苷酸序列，并且能够锁定与其可操作连接的外源目的基因的表达的核苷酸序列；所述钥匙基因包含seq id no:3或6所示的核苷酸序列，并且能够解除所述锁定元件对于外源目的基因的表达锁定的核苷酸序列，

2.权利要求1的基因组合，其中所述组成型启动子选自花椰菜花叶病毒35s启动子、来自根癌农杆菌ti质粒t-dna区域的胭脂碱合成酶基因ocs启动子、水稻肌动蛋白启动子actin i和玉米泛素基因启动子ubi。

3.权利要求1的基因组合，其中所述组织特异性启动子选自水稻绿色组织特异性启动子核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶小亚基rbcs启动子、玉米磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶pepc启动子、水稻绿色组织特异表达dx1启动子、水稻光系统ii10kda多肽d540启动子、水稻富亮氨酸重复序列类受体蛋白激酶lp2启动子，以及玉米叶绿体c4 pdk启动子。

4.权利要求1-3中任一项所述的基因组合，其中所述外源目的基因是抗虫基因或抗除草剂基因，其中所述抗虫基因选自来自自苏云金芽胞杆菌(bacillus thuringiensis)的cry1ab、cry1ac、cry1ab/ac、cry1c、cry2a和vip3抗虫基因、来自嗜虫沙雷氏菌(serratiaentomophila)的anf、sep基因，来自双酶梭菌(clostridium bifermentans)的cmb基因、来自球形芽孢杆菌(bacillus sphaericus)的mtx基因、来自嗜线虫致病杆菌(xenorhabdusnematophilus)的杀虫蛋白基因、来自发光光杆状菌(photorhabdus luminescens)的tca、tcb基因，以及来自金龟子绿僵菌(metarhizium anisopliae)的prl基因；和/或所述抗除草剂基因选自抗草甘膦的epsp合成酶基因、鼠伤寒沙门氏菌epsp突变基因aroa、抗草丁膦的bar基因、抗米唑啉酮的als突变基因ilv g、抗稀禾定的accl-s2基因、抗溴苯腈的bxn基因和抗绿磺隆的csrl基因。

5.权利要求1-4中任一项所述的基因组合，其中所述植物选自小麦、大麦、燕麦、玉米、粟米、高粱、薏米、红薯、马铃薯、莲子、大豆和花生；优选地，所述植物是玉米或大豆。

6.一种用于控制植物中的外源目的基因的表达的方法，所述方法包括将锁定元件和钥匙基因导入受体植物中，其中所述锁定元件包含seq id no:5或8所示的核苷酸序列，并且能够锁定与其可操作连接的外源目的基因的表达的核苷酸序列；所述钥匙基因包含seq idno:3或6所示的核苷酸序列，并且能够解除所述锁定元件对于外源目的基因的表达锁定的核苷酸序列；

7.一种培育转基因植物的方法，所述方法包括将包含锁定元件的第一亲本与包含钥匙基因的第二亲本进行杂交，从而获得包含所述锁定元件和钥匙基因的转基因植物，其中所述锁定元件包含seq id no:5或8所示的核苷酸序列，并且能够锁定与其可操作连接的外源目的基因的表达的核...

【专利技术属性】
技术研发人员：凃巨民，陈浩，胡培松，罗炬，张晓波，刘玉君，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：