一种源自费氏链霉菌的环氧化物水解酶、基因、重组载体、工程菌及其应用制造技术

本发明专利技术涉及生物工程技术领域，具体涉及一种源自费氏链霉菌的环氧化物水解酶、基因、重组载体、工程菌及其应用，所述环氧化物水解酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明专利技术构建了含有优化后基因的重组质粒pCold II‑sfeh2和基因工程菌E.coil/sfeh2，诱导该工程菌过量表达重组环氧化物水解酶SfEH2，底物谱分析表明该酶针对多种环氧化物具有催化活性。应用E.coil/sfeh2全细胞催化外消旋苄基缩水甘油醚的手性拆分反应中可以获得高光学纯度(ee＞99％)的S构型苄基缩水甘油醚，产率达到40％以上。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物工程，尤其涉及一种源自费氏链霉菌的环氧化物水解酶、基因、重组载体、工程菌及其应用。

技术介绍

1、环氧化物水解酶(epoxide hydrolases,ec 3.3.2.-)，来自酶家族，其以不对称方式将环氧化物水解为相应的邻二醇。这些酶存在于许多生物体中，如细菌、植物、真菌和昆虫。而环氧化物也是合成生物活性分子的关键合成子，如hiv蛋白酶抑制剂、β肾上腺素能受体阻断药物、神经保护剂和钙通道阻滞剂。(s)-苄基甘油醚是一种多用途的中间体，存在于许多重要的药物化合物中，比如可以用来进一步合成过氧化物酶体增殖物激活受体激动剂，其在ii型糖尿病的治疗中起着重要作用(tetrahedron lett.2014,55:3223–3226)。由于环氧化物水解酶在自然界中的广泛存在，在水解过程中对辅因子的依赖性不强，以及利用表达环氧化物水解酶的全细胞作为催化剂的能力，及环氧化物水解酶自身具备的来源广泛、绿色环保和高立体选择性等优点，也越来越多的环氧化物水解酶被开发，同时越来越多的以环氧化物水解酶为基础的环氧化物酶促水解反应被研究。</p>

2、近年本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种源自费氏链霉菌的环氧化物水解酶，其特征在于，所述环氧化物水解酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。

2.一种编码权利要求1所述源自费氏链霉菌的环氧化物水解酶基因，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，经密码子优化后基因的序列如SEQ ID NO.2所示。

3.一种含权利要求2所述优化后基因的克隆载体与表达载体。

4.一种含权利要求2所述优化后基因的工程菌。

5.根据权利要求4所述的工程菌，其特征在于，所述工程菌是以真菌或细菌为宿主构建表达得到的。

6.根据权利要求1所述环氧化物水解酶、编码所...

【技术特征摘要】

1.一种源自费氏链霉菌的环氧化物水解酶，其特征在于，所述环氧化物水解酶的氨基酸序列如seq id no.3所示。

2.一种编码权利要求1所述源自费氏链霉菌的环氧化物水解酶基因，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如seq id no.1所示，经密码子优化后基因的序列如seq id no.2所示。

3.一种含权利要求2所述优化后基因的克隆载体与表达载体。

4.一种含权利要求2所述优化后基因的工程菌。

5.根据权利要求4所述的工程菌，其特征在于，所述工程菌是以真菌或细菌为宿主构建表达得到的。

6.根据权利要求1所述环氧化物水解酶、编码所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：李闯，张贤，王雨晴，薛正莲，黄瑞，
申请(专利权)人：安徽工程大学，
类型：发明
国别省市：