【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及丝素蛋白提取的，尤其是涉及一种琥珀蚕丝素蛋白的提取方法。
技术介绍
1、蚕丝是一种天然蛋白纤维，属多孔性物质，透气性好、吸湿性极佳，被用于纺织业已有上千年的历史，而从蚕丝中提取的丝素蛋白更是凭借优良的性能被用于各个领域的研究。与家蚕相比，大蚕蛾科的非桑蚕通常在野外或半野外饲养，其氨基酸的极性更高，生物活性更强，而琥珀蚕就是野蚕的一种。
2、琥珀蚕，大蚕蛾科、鳞翅目属，其丝以耐磨和富有金黄色光泽而闻名，吸湿性能优异，热分解温度为378.4℃，拥有很好的热稳定性，此外，还具有强度、初始模量和断裂伸长高的特点，赋予了琥珀蚕丝强而柔韧的特点。与家蚕丝一样，琥珀蚕丝也拥有优良的生物学特性，其独特的结构和性能在纺织、生物医药、生物材料等领域有较好的开发利用潜力，经济价值较高。
3、从文献来看，如今的研究大多集中在桑蚕丝，还有部分研究是针对柞蚕丝，对其余蚕种的丝素蛋白研究较少。琥珀蚕由于资源限制，对其丝素蛋白的研究不多，提取研究更是少见，boyoung lee等人(《species identification of silks by protein massspectrometry reveals evidence of wild silk use in antiquity》)曾对包括琥珀蚕在内的不同蚕种做提取研究，发现像氯化钙/乙醇/水三元溶液、溴化锂溶液等一些常用于桑蚕丝素蛋白的提取溶液对于琥珀蚕并不完全适用，琥珀蚕丝素蛋白的提取率较低，提取时间也较长。
技术实现思路b>
1、为了解决上述的技术问题，本专利技术提供了一种琥珀蚕丝素蛋白的提取方法，通过采用含铜乙二胺、磺化琥珀酸二辛酯钠盐和磷酸氢二钠复合的提取液，达到协同提取效果，提升丝素蛋白提取率的同时，无需对琥珀蚕茧进行脱胶预处理，缩短提取时间。
2、本专利技术的目的通过以下技术方案予以实现：一种琥珀蚕丝素蛋白的提取方法，包括如下步骤：
3、(1)将未经脱胶的琥珀蚕丝加入提取液中，加热溶解；之后冷却，调节ph至7～9，得到混合溶液；其中，所述提取液为含铜乙二胺、磺化琥珀酸二辛酯钠盐和磷酸氢二钠的水溶液；(2)将混合溶液进行离心、透析、冷冻干燥，得到琥珀蚕丝素蛋白。
4、本专利技术提取液中的铜乙二胺起到主要的提取丝素蛋白作用，通过反应以及配合物形成，能够破坏蚕丝纤维分子的化学键，使其失去稳定性，从而加强对琥珀蚕丝丝素蛋白的溶解，然而天然丝素纤维含有大量分子内和分子间氢键，尤其是琥珀蚕丝的热稳定性更好，蚕丝的强度高和柔韧性好，结晶度较高而难溶解于一般溶剂，常规提取溶液容易造成蚕丝蛋白提取不彻底，从而造成了材料的浪费。
5、再加上蚕丝主要由丝胶和丝素蛋白组成，丝素为纤维状蛋白，丝胶包围在丝素纤维表层，起胶粘作用，因而采用未经脱胶的琥珀蚕茧碎片，即使琥珀蚕的含胶率较低，丝胶仍会对其中丝素蛋白的提取效果产生较大影响。本专利技术加入的磺化琥珀酸二辛酯钠盐具有高渗透力和润湿性，渗透快速且均匀，能够协同铜乙二胺进入蚕丝内部，溶解其中的丝素蛋白，而加入的磷酸氢二钠可作为缓冲剂，保持碱性环境，以及辅助形成配合物，从而加快丝素蛋白的溶解，经过蛋白质组学检测，最终的溶液基本不含丝胶蛋白，能够得到提取率较高的琥珀蚕丝素蛋白。
6、作为优选，所述琥珀蚕丝在提取液中的浴比为1：40～60。
7、作为优选，所述提取液的配制方法为：将氢氧化铜溶于水中，再加入乙二胺搅拌，得到第一溶液；将磺化琥珀酸二辛酯钠盐和水混合后，再加入磷酸氢二钠搅拌，得到第二溶液；将第一溶液和第二溶液混合得到提取液。
8、采用该配置方法得到提取液的均一性更佳，而且在该配比限定范围条件下，协同配合效果更好，丝素蛋白提取率更高。
9、作为优选，所述磺化琥珀酸二辛酯钠盐、磷酸氢二钠和第二溶液的质量体积比为0.4～0.7g：2～3.5g：50ml。
10、作为优选，所述氢氧化铜、乙二胺和第一溶液的质量体积比为2～4g：3～5g：50ml。
11、作为优选，所述第一溶液和第二溶液的体积比为1：1。
12、作为优选，所述加热溶解的温度为55～65℃，时间为45～55min。
13、作为优选，所述透析时选用透析袋的截留分子量为5000～7000，透析时间为2～3天。
14、作为优选，所述离心的转速为10000～12000r/min，时间为10～15min。
15、与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
16、(1)采用本专利技术方法提取丝素蛋白，琥珀蚕茧不用脱胶，而且提取效率高，缩短了整个提取过程的时间；
17、(2)提取液配置简单，操作易上手，能够成功提取出琥珀蚕丝素蛋白。
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1.一种琥珀蚕丝素蛋白的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.如权利要求1所述琥珀蚕丝素蛋白的提取方法，其特征在于，所述琥珀蚕丝在提取液中的浴比为1：40~60。
3.如权利要求1所述琥珀蚕丝素蛋白的提取方法，其特征在于，所述提取液的配制方法为：将氢氧化铜溶于水中，再加入乙二胺搅拌，得到第一溶液；将磺化琥珀酸二辛酯钠盐和水混合后，再加入磷酸氢二钠搅拌，得到第二溶液；将第一溶液和第二溶液混合得到提取液。
4.如权利要求3所述琥珀蚕丝素蛋白的提取方法，其特征在于，所述氢氧化铜、乙二胺和第一溶液的质量体积比为2~4g：3~5g：50mL。
5.如权利要求3所述琥珀蚕丝素蛋白的提取方法，其特征在于，所述磺化琥珀酸二辛酯钠盐、磷酸氢二钠和第二溶液的质量体积比为0.4~0.7g：2~3.5g：50mL。
6.如权利要求3-5之一所述琥珀蚕丝素蛋白的提取方法，其特征在于，所述第一溶液和第二溶液的体积比为1：1。
7.如权利要求1-3之一所述琥珀蚕丝素蛋白的提取方法，其特征在于，所述加热溶解的温度为55~65℃，时间为4
8.如权利要求1所述琥珀蚕丝素蛋白的提取方法，其特征在于，所述透析时选用透析袋的截留分子量为5000~7000，透析时间为2~3天。
9.如权利要求1或8所述琥珀蚕丝素蛋白的提取方法，其特征在于，所述离心的转速为10000~12000r/min，时间为10~15min。
...【技术特征摘要】
1.一种琥珀蚕丝素蛋白的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.如权利要求1所述琥珀蚕丝素蛋白的提取方法，其特征在于，所述琥珀蚕丝在提取液中的浴比为1：40~60。
3.如权利要求1所述琥珀蚕丝素蛋白的提取方法，其特征在于，所述提取液的配制方法为：将氢氧化铜溶于水中，再加入乙二胺搅拌，得到第一溶液；将磺化琥珀酸二辛酯钠盐和水混合后，再加入磷酸氢二钠搅拌，得到第二溶液；将第一溶液和第二溶液混合得到提取液。
4.如权利要求3所述琥珀蚕丝素蛋白的提取方法，其特征在于，所述氢氧化铜、乙二胺和第一溶液的质量体积比为2~4g：3~5g：50ml。
5.如权利要求3所述琥珀蚕丝素蛋白的提取方法，其特征在于，所述...
【专利技术属性】
技术研发人员：郑海玲，李俊婷，杜浩，周旸，
申请(专利权)人：中国丝绸博物馆，
类型：发明
国别省市：
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