【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及测定包含化学物质的药物的反应特性的方法。
技术介绍
1、化学物质，诸如药物并且尤其是生物药物，已经成为越来越重要的治疗药物类别，因为它们在治疗许多严重疾病，诸如自身免疫性疾病、癌症和糖尿病中提供了主要益处。主要优点是高特异性和内源性化合物(如胰岛素和红细胞生成素)的有效替代或取代。然而，化学物质诸如生物药物的治疗效果可能因人而异。因此，可能需要对个体进行监测，以测量个体中的治疗药物浓度，以及监测针对治疗的不需要的免疫原性反应的发作，正式称为免疫原性。
2、免疫原性的后果范围从没有明显的不利作用到严重的副作用，诸如降低治疗效果甚至过敏反应。另外，给定个体的免疫原性反应可能随时间而变化，例如随一生中的治疗方案而变化、随激素相关周期而变化和/或根据个体的身体和/或心理状态而变化。
3、在生物学上，这可能通过循环抗药物抗体(ada)的产生和/或存在而表现出来。ada包括中和药物的生物活性的中和抗体(nab)和与药物结合的非中和抗体(非-nab)，后者可能会改变药代动力学和/或药效学，从而影响其疗效。中和抗体和非中和抗体两种都可能通过增强清除率(从而缩短血清半衰期)或相反通过延长血清半衰期和产品活性来改变产品的药代动力学。
4、用于检测和定量ada的分析试验具有临床意义，并作为药物反应和治疗方案选择的重要衡量标准。因此，有必要采用合适的分析方法来检测和表征ada，以确保患者安全和治疗效果。然而，目前的试验经常是在与人类生物学不相似的条件下进行的。通常，免疫原性评估依赖于使用基于细胞的试验或
5、样品中治疗药物分子的存在(即药物耐受性)也可能对试验性能产生负面影响。因此，理想的方法将提供在生物相关条件下(例如在生物基质中和药物分子存在下)免疫原性的绝对测量，包括评估ada类型(即非-nab或nab)。
6、w0 2021/046316描述用于检测测试样品中的抗药物抗体(ada)诸如抗cl-抑制剂抗体(cl inh-ada)的免疫试验。所述免疫试验包括以下步骤：(i)将所提供的测试样品中的抗药物抗体与药物进行酸解离；(ii)中和含有解离的药物-ada复合物的测试样品；(iii)将样品与过量结合亲和力示踪的药物一起孵育；(iv)在亲和力结合底物表面上捕获所得的ada结合亲和力示踪的药物复合物；(v)添加标记的抗人类抗体；以及(vi)定量捕获的亲和力示踪的药物-ada复合物。poulsen,n.n.等人“用于探测系统性红斑狼疮患者抗dsdna抗体结合异质性的流动诱导的分散分析：迈向诊断和患者分层的新方法(flow-induceddispersion analysis for probing anti-dsdna antibody binding heterogeneity insystemic lupus erythematosus patients:toward a new approach for diagnosis andpatient stratification)”。analytical chemistry,2016,88.18:9056-9061描述用于检测免疫反应的方法，该方法通过使用流动诱导的分散分析检测针对荧光示踪的双链dna(dsdna)的自身抗体检测免疫反应。
7、通过使用固定浓度的荧光示踪的dsdna和多个不同浓度的针对dsdna的模型抗体提供参考标准曲线。此后，基于标准曲线测定了来自狼疮患者的六个血浆样品中针对示踪的dsdna的自身抗体。
8、pedersen，m.e.等人，“使用流动诱导的分散分析对阿达木单抗和tnf-α相互作用进行基于尺寸的表征：亲和力稳定的多重结合物种的评估(size-based characterizationof adalimumab and tnf-αinteractions using flow induced dispersion analysis:assessment of avidity-stabilized multiple bound species)”scientific reports,2021,11.1:1—10；https://doi.org/10.1038/s41598-021-84113-z，描述使用流动诱导的分散分析(fida)在预孵育的缓冲液样品中溶液内表征tnf-α和阿达木单抗的相互作用，并基于示踪的tnf-α的流体动力学半径测定样品中阿达木单抗的浓度。最初，在不存在阿达木单抗的情况下测量示踪的tnf-α的流体动力学半径(尺寸)，因此测量未结合的tnf-α的尺寸，证实分子的结构完整性。随着阿达木单抗浓度的增加，tnf-α的表观尺寸由于更高的结合程度而增加。
9、us2013/0344621描述用于测定样品中一种或多种抗药物抗体(ada)同种型的试验方法。该方法涉及示踪药物(优选荧光示踪)，将荧光示踪的药物与样品(患者血浆或血清样品)一起孵育，并使用色谱法根据尺寸分离荧光示踪的药物及其与抗药物抗体形成的复合物。该方法相当麻烦且耗时。
10、wo 98/39656描述用于检测样品中免疫反应分子存在的方法，其包括将样品与孵育混合物中的一种或多种免疫反应参比分子的标准溶液接触，以便能够在免疫反应参比分子和用于检测的免疫反应分子之间形成免疫复合物，以及通过将孵育混合物的组分的分子量、电荷和形式的一个或多个物理参数与标准溶液的组分的相同物理参数进行比较来测定免疫复合物是否已形成，其中测定免疫复合物是否已形成是通过孵育混合物的组分的柱层析分离来实现的，以与前述分离相同的方式对标准溶液的组分进行柱层析分离，并比较两次分离的洗脱模式，其中孵育混合物中免疫反应参比分子的洗脱速度相对于标准溶液中相同免疫反应参比分子的洗脱速度的变化表明免疫复合物的形成。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种可靠且相对快速的方法，该方法用于测定包含化学物质的药物的反应特性，尤其是测定指示样品中ada存在的反应特性。
2、在一个实施方案中，目的是提供一种可靠且相对快速的用于测定对化学物质的体内免疫原性反应的方法。
3、在一个实施方案中，目的是提供一种可靠且相对快速的用于测定对化学物质的体外免疫原性反应的方法。在一个实施方案中，目的是提供一种免疫学筛选方法。
4、在一个实施方案中，目的是提供一种可靠且相对快速的用于测定包含化学物质的药物的反应特性的方法，其中反应特性指示样品中ada的存在和类型。
5、在一个实施方案中，目的是提供一种可靠且相对快速的用于测定包含化学物质的药物的反应特性的方法，其中反应特性指本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种测定化学物质的免疫原性反应特性的方法，所述方法包括
2.权利要求1所述的方法，其中所述生物液体样品是来自个体，优选来自哺乳动物诸如人；家畜诸如山羊、牛、美洲驼、猪、绵羊或羊驼；啮齿动物诸如小鼠或大鼠；兔形目动物诸如兔子和/或宠物诸如马、狗或猫的样品。
3.权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述生物液体样品选自细胞外液、细胞内液、血液、尿液、精液(semen)(精液(seminalfluid))、阴道分泌物、脑脊液(CSF)、滑液、胸膜液(胸膜腔灌洗液)、心包液、腹膜液、羊水、唾液、鼻腔液、粘液、耳液、胃液、母乳、细胞培养液或其任意组合。
4.前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述化学物质至少部分可溶解于所述生物液体样品中，所述化学物质优选包括化学活性实体、化学活性分子或化学活性复合物。
5.前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述化学物质包括蛋白质、肽、生物学活性聚合物剂、生物学活性无机剂、生物学活性金属剂或其任意组合。
6.前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述化学物质包括生物药物，所述生物药物优选地选
7.前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述化学物质是用于治疗癌症、心血管疾病、代谢疾病或神经退行性疾病中的至少一种的活性剂。
8.前述权利要求中任一项所述的方法，其中使所制备的样品经受流动的步骤包括使所述样品经受层流足够的时间以进行光学标记物的至少一次读出，优选地，在制备的样品已经处于层流中的情况下，所述光学标记物的读出在至少5秒钟，诸如至少10秒钟，诸如至少30秒钟，诸如至少1分钟，诸如至少5分钟之后进行。
9.前述权利要求中任一项所述的方法，其中提供至少一个制备的样品的步骤包括向所述部分的生物液体样品中添加缓冲液体系。
10.前述权利要求中任一项所述的方法，其中从生物液体样品提供至少一个制备的样品包括从体液样品提供多个制备的样品，其中多个制备的样品包括至少2个，诸如至少3个，诸如4至100个具有不同选定生物液体样品浓度的制备的样品。
11.权利要求9或权利要求10所述的方法，其中所述缓冲液体系具有约4至约8的缓冲液pH值，优选地所述缓冲液体系选自磷酸盐缓冲液体系、三(三(羟甲基)氨基甲烷)缓冲液体系和HEPES((4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸)缓冲液体系。
12.前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述特性流动参数包括分散参数、扩散参数、流体动力学半径参数或其任何衍生物，优选地，特性流动参数包括标记的结合配偶体和包含标记的结合配偶体的复合物的加权平均流体动力学半径以及标记的结合配偶体和包含标记的结合配偶体的复合物的加权平均离差或其任何衍生物中的至少一个。
13.前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述方法包括使制备的样品经受流动之前将标记的结合配偶体添加至制备的样品中，或者所述方法包括使标记的结合配偶体在流动通道中与制备的样品接触。
14.权利要求13所述的方法，其中将所述标记的结合配偶体以选定的浓度添加至制备的样品中，优选地，将所述标记的结合配偶体与缓冲液的添加一起添加至制备的样品中。
15.权利要求13或权利要求14所述的方法，其中从生物液体样品提供至少一个制备的样品包括从体液样品提供多个制备的样品，其中多个制备的样品中的每一个的标记的结合配偶体的选定摩尔浓度是相同的或变化至多10mol％，优选地，所有制备的样品的标记的结合配偶体的选定摩尔浓度是相同的或变化至多10mol％，任选地，两个或更多个制备的样品的标记的结合配偶体的选定摩尔浓度彼此不同。
16.前述权利要求中任一项所述的方法，其中从生物液体样品提供至少一个制备的样品包括通过添加缓冲液体系从体液样品提供多个制备的样品，其中各个制备的样品被提供为具有不同的生物液体样品的浓度，优选地，多个制备的样品通过制备稀释系列来提供。
17.前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述特性流动参数的测定通过一种方法来进行，所述方法包括使至少一种制备的样品的测试部分和至少一种载液在公共通道中经受层流，其中所述测试部分与载液界面接触，检测光学标记物的浓度分布并测定特性流动参数。
18.权利要求17所述的方法，其中所述至少一种载液包含缓冲液体系，优选与制备的样品的任选的缓冲液体系相同的缓冲液体系，任选地，所述载液包含选自所述化学物质和/或对应于或等同于所述化学物质的标记的化学物质的另外结合配偶体的另外的活性组分，其中所述另外的活性组分是未标记的或用与标记的结合配偶体的标记物不同的标记物进行标记的。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种测定化学物质的免疫原性反应特性的方法，所述方法包括
2.权利要求1所述的方法，其中所述生物液体样品是来自个体，优选来自哺乳动物诸如人；家畜诸如山羊、牛、美洲驼、猪、绵羊或羊驼；啮齿动物诸如小鼠或大鼠；兔形目动物诸如兔子和/或宠物诸如马、狗或猫的样品。
3.权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述生物液体样品选自细胞外液、细胞内液、血液、尿液、精液(semen)(精液(seminalfluid))、阴道分泌物、脑脊液(csf)、滑液、胸膜液(胸膜腔灌洗液)、心包液、腹膜液、羊水、唾液、鼻腔液、粘液、耳液、胃液、母乳、细胞培养液或其任意组合。
4.前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述化学物质至少部分可溶解于所述生物液体样品中，所述化学物质优选包括化学活性实体、化学活性分子或化学活性复合物。
5.前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述化学物质包括蛋白质、肽、生物学活性聚合物剂、生物学活性无机剂、生物学活性金属剂或其任意组合。
6.前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述化学物质包括生物药物，所述生物药物优选地选自细胞因子、抗体、酶、激素、免疫调节剂、疫苗剂。
7.前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述化学物质是用于治疗癌症、心血管疾病、代谢疾病或神经退行性疾病中的至少一种的活性剂。
8.前述权利要求中任一项所述的方法，其中使所制备的样品经受流动的步骤包括使所述样品经受层流足够的时间以进行光学标记物的至少一次读出，优选地，在制备的样品已经处于层流中的情况下，所述光学标记物的读出在至少5秒钟，诸如至少10秒钟，诸如至少30秒钟，诸如至少1分钟，诸如至少5分钟之后进行。
9.前述权利要求中任一项所述的方法，其中提供至少一个制备的样品的步骤包括向所述部分的生物液体样品中添加缓冲液体系。
10.前述权利要求中任一项所述的方法，其中从生物液体样品提供至少一个制备的样品包括从体液样品提供多个制备的样品，其中多个制备的样品包括至少2个，诸如至少3个，诸如4至100个具有不同选定生物液体样品浓度的制备的样品。
11.权利要求9或权利要求10所述的方法，其中所述缓冲液体系具有约4至约8的缓冲液ph值，优选地所述缓冲液体系选自磷酸盐缓冲液体系、三(三(羟甲基)氨基甲烷)缓冲液体系和hepes((4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸)缓冲液体系。
12.前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述特性流动参数包括分散参数、扩散参数、流体动力学半径参数或其任何衍生物，优选地，特性流动参数包括标记的结合配偶体和包含标记的结合配偶体的复合物的加权平均流体动力学半径以及标记的结合配偶体和包含标记的结合配偶体的复合物的加权平均离差或其任何衍生物中的至少一个。
13.前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述方法包括使制备的样品经受流动之前将标记的结合配偶体添加至制备的样品中，或者所述方法包括使标记的结合配偶体在流动通道中与制备的样品接触。
14.权利要求13所述的方法，其中将所述标记的结合配偶体以选定的浓度添加至制备的样品中，优选地，将所述标记的结合配偶体与缓冲液的添加一起添加至制备的样品中。
15.权利要求13或权利要求14所述的方法，其中从生物液体样品提供至少一个制备的样品包括从体液样品提供多个制备的样品，其中多个制备的样品中的每一个的标记的结合配偶体的选定摩尔浓度是相同的或变化至多10mol％，优选地，所有制备的样品的标记的结合配偶体的选定摩尔浓度是相同的或变化至多10mol％，任选地，两个或更多个制备的样品的标记的结合配偶体的选定摩尔浓度彼此不同。
16.前述权利要求中任一项所述的方法，其中从生物液体样品提供至少一个制备的样品包括通过添加缓冲液体系从体液样品提供多个制备的样品，其中各个制备的样品被提供为具有不同的生物液体样品的浓度，优选地，多个制备的样品通过制备稀释系列来提供。
17.前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述特性流动参数的测定通过一种方法来进行，所述方法包括使至少一种制备的样品的测试部分和至少一种载液在公共通道中经受层流，其中所述测试部分与载液界面接触，检测光学标记物的浓度分布并测定特性流动参数。
18.权利要求17所述的方法，其中所述至少一种载液包含缓冲液体系，优选与制备的样品的任选的缓冲液体系相同的缓冲液体系，任选地，所述载液包含选自所述化学物质和/或对应于或等同于所述化学物质的标记的化学物质的另外结合配偶体的另外的活性组分，其中所述另外的活性组分是未标记的或用与标记的结合配偶体的标记物不同的标记物进行标记的。
19.权利要求17或权利要求18所述的方法，其中将至少一种制备的样品的测试部分和至少一种载液沿着公共通道的长度以相应的部分一个接一个地供给到公共通道中，之后使所述部分经受层流。
20.权利要求19所述的方法，其中所述方法包括在将样品供给到公共通道中之前将标记的结合配偶体添加至制备的样品中。
21.权利要求19所述的方法，其中所述方法包括在将载液供给到公共通道之前将标记的结合配偶体添加至载液中。
22.权利要求17或权利要求18所述的方法，其中将至少一个制备的样品的测试部分供给到公共通道中并与通道中的载液混合，其中所述载液包含所述标记的结合配偶体。
23.权利要求17-22中任一项所述的方法，其中所述方法包括将载液的第一部分供给到公共通道中，将测试部分供给到公共通道中以与载液的第一部分界面接触，以及将载液的第二部分供给到公共通道中以与测试部分界面接触，并使所述部分经受层流。
24.权利要求17或权利要求18所述的方法，其中，所述方法包括将测试部分...
【专利技术属性】
技术研发人员：亨瑞克·詹森，摩根·英格汉芙·彼泽森，
申请(专利权)人：飞达生物系统公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。