【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及基因编辑领域，特别是规律成簇的间隔短回文重复(crispr)。具体而言，本专利技术涉及一种降低脱靶效率的cas蛋白及其应用。
技术介绍
1、crispr/cas技术是一种被广泛使用的基因编辑技术，它通过rna引导对基因组上的靶序列进行特异性结合并切割dna产生双链断裂，利用生物非同源末端连接或同源重组进行定点基因编辑。
2、crispr/cas9系统是最常用的ii型crispr系统，它识别3’-ngg的pam基序，对靶标序列进行平末端切割。crispr/cas type v系统是一类新发现的crispr系统，它具有5’-ttn的基序，对靶标序列进行粘性末端切割，例如cpf1，c2c1，casx，casy。然而目前存在的不同的crispr/cas各有不同的优点和缺陷。例如cas9，c2c1和casx均需要两条rna进行指导rna，而cpf1只需要一条指导rna而且可以用来进行多重基因编辑。casx具有980个氨基酸的大小，而常见的cas9，c2c1，casy和cpf1通常大小在1300个氨基酸左右。此外，cas9...
【技术保护点】
1.一种Cas突变蛋白，所述突变蛋白与亲本Cas蛋白的氨基酸序列相比，在对应于SEQID No.1所示氨基酸序列的以下氨基酸位点处存在突变：第876位和/或第890位；优选的，所述Cas突变蛋白与亲本Cas蛋白的氨基酸序列相比，还在对应于SEQ ID No.1所示氨基酸序列的下述任一或任意几个氨基酸位点处存在突变：第7位、第233位、第267位、第369位、第433位；更优选的，所述亲本Cas蛋白来源于Cas12家族蛋白。
2.一种融合蛋白，所述融合蛋白包括权利要求1所述的Cas突变蛋白以及其他的修饰部分。
3.一种分离的多核苷酸，其特征在于，...
【技术特征摘要】
1.一种cas突变蛋白，所述突变蛋白与亲本cas蛋白的氨基酸序列相比，在对应于seqid no.1所示氨基酸序列的以下氨基酸位点处存在突变：第876位和/或第890位；优选的，所述cas突变蛋白与亲本cas蛋白的氨基酸序列相比，还在对应于seq id no.1所示氨基酸序列的下述任一或任意几个氨基酸位点处存在突变：第7位、第233位、第267位、第369位、第433位；更优选的，所述亲本cas蛋白来源于cas12家族蛋白。
2.一种融合蛋白，所述融合蛋白包括权利要求1所述的cas突变蛋白以及其他的修饰部分。
3.一种分离的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸为编码权利要求1所述cas突变蛋白的多核苷酸序列，或编码权利要求2所述融合蛋白的多核苷酸序列。
4.一种载体，其特征在于，所述载体包含权利要求3所述的多核苷酸以及与之可操作连接的调控元件。
5.一种crispr-cas系统，其特征在于，所述系统包括权利要求1所述的cas突变蛋白以及至少一种grna；
6.一种组合物，其特征在于，所述组合物包含：
7.一种工程化的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞包含权利要求1所述的cas突...
【专利技术属性】
技术研发人员：梁亚峰，
申请(专利权)人：山东舜丰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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