一种转氨酶及其在合成（R）-2-（2,5-二氟苯基）吡咯烷中的应用制造技术

本发明专利技术提供了重组转氨酶及其在合成(R)‑2‑(2,5‑二氟苯基)吡咯烷中的应用，所述转氨酶是野生型转氨酶的突变体。本发明专利技术通过对SEQ ID NO:1所示的野生型转氨酶的第13～312位氨基酸中的一个或多个氨基酸进行取代突变，获得的如SEQ ID NO:25所示的转氨酶突变体具有显著提高的转氨酶活性，可以高效催化4‑氯‑1‑(2,5‑二氟苯基)丁‑1‑酮合成(R)‑2‑(2,5‑二氟苯基)吡咯烷，反应条件温和，成本低廉，在(R)‑2‑(2,5‑二氟苯基)吡咯烷以及拉罗替尼的工业化生产领域具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物酶进化及医药制造，涉及重组转氨酶及其在合成拉罗替尼关键手性中间体(r)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷中的应用。

技术介绍

1、拉罗替尼(larotrectinib)是由array biopharma公司研发、由拜耳公司与loxooncology公司共同临床开发的一种选择性原肌球蛋白受体激酶(trk)抑制剂，是一种广谱抗癌药。结构式如下：

2、

3、目前，larotrectinib的制备通常是先合成其关键手性中间体(r)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷，再利用(r)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷继续合成，最终制得larotrectinib。(r)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷的cas号为：1218935-59-1，分子式为c10h11f2n，分子量为：183.20，结构式如下：

4、

5、目前，合成中间体(r)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷主要有化学合成法和生物合成法两类：

6、化学合成法主要是通过有机合成手段合成(r)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷。wo20100483本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种转氨酶突变体，其特征在于，所述转氨酶突变体的氨基酸序列为SEQ ID NO:25所示的氨基酸序列。

2.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1所述的转氨酶突变体；

3.一种重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体包括权利要求2所述的核酸分子。

4.一种重组宿主细胞，其特征在于，所述重组宿主细胞表达权利要求1所述的转氨酶突变体。

5.根据权利要求4所述的重组宿主细胞，其特征在于，所述重组宿主细胞的基因组中整合有权利要求2所述的核酸分子。

6.根据权利要求4所述的重组宿主细胞，其特征在于，所述重组宿主细胞含有...

【技术特征摘要】

1.一种转氨酶突变体，其特征在于，所述转氨酶突变体的氨基酸序列为seq id no:25所示的氨基酸序列。

2.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1所述的转氨酶突变体；

3.一种重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体包括权利要求2所述的核酸分子。

4.一种重组宿主细胞，其特征在于，所述重组宿主细胞表达权利要求1所述的转氨酶突变体。

5.根据权利要求4所述的重组宿主细胞，其特征在于，所述重组宿主细胞的基因组中整合有权利要求2所述的核酸分子。

6.根据权利要求4所述的重组宿主细胞，其特征在于，所述重组宿主细胞含有权利要求3所述的重组表达载体。

7.一种权利要求1所述的转氨酶突变体的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

8.一种组合物，其特征在于，所述组合物包括seq id no:25所示的转氨酶突变体。

9.根据权利要求8所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：乐庸堂，张跃，胡集铖，王松鹤，
申请(专利权)人：上海飞腾医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：