乳腺癌临床穿刺样本解离得到乳腺癌类器官的方法技术

本发明专利技术公开一种乳腺癌临床穿刺样本解离得到乳腺癌类器官的方法，涉及生物医学技术领域，该种乳腺癌临床穿刺样本解离得到乳腺癌类器官的方法包括如下步骤：S1、样本处理：S2、酶解：将剪碎的肿瘤组织转移到组织解离液中，消化处理，使组织充分解离，释放肿瘤细胞；S3、红细胞裂解；S4、过筛：将裂解后的细胞悬液进行细胞筛过滤、充分洗涤细胞筛网，收集滤液离心，得到高纯度的原代肿瘤细胞；S5、铺板培养：用Matrigel将细胞沉淀进行重悬，待基质胶凝固后加入乳腺癌类器官完全培养基；本申请提供了一种乳腺癌临床穿刺样本解离得到乳腺癌类器官的方法，其显著提升了乳腺癌临床穿刺样本的细胞得率，并提高了乳腺癌穿刺样本的类器官构建成功率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医学领域技术，尤其是指一种乳腺癌临床穿刺样本解离得到乳腺癌类器官的方法。

技术介绍

1、类器官(organoid) 是来源于干细胞或器官祖细胞的三维细胞聚集体, 可分化和自组织形成具有人体相应器官的部分特定功能和结构。由于类器官具有人源性，可模拟器官发育和形成，在体外长期扩增中具有基因组稳定性，并能够形成活体生物库进行高通量筛选等优势，成为近年来备受关注的体外模型。个性化癌症疗法对每位患者采用特定的治疗方法。使用与原始肿瘤特征相似的个性化肿瘤模型，可以更准确地预测患者对药物的反应。与传统的模型相比，肿瘤类器官模型有几个优点，包括保留了原始肿瘤的分子和细胞组成。这些优势凸显了肿瘤类器官在个性化癌症治疗中的巨大潜力，特别是在临床前药物筛选和预测患者对选定治疗方案的反应方面。

2、乳腺癌是全球女性最常见的癌症，乳腺癌在女性患者中己超过肺癌成为发病率最高的恶性肿瘤。因此，构建出高质量的人乳腺癌类器官能够为乳腺癌患者药物反应预测和治疗选择提供有力的技术支持。目前，针对组织量比较大的手术样本的乳腺癌类器官的构建技术已相对成熟，然而乳腺癌穿本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种乳腺癌临床穿刺样本解离得到乳腺癌类器官的方法，其特征在于：包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的乳腺癌临床穿刺样本解离得到乳腺癌类器官的方法，其特征在于：所述步骤S2中的组织解离液包括终浓度为1X的Advanced DMEM/F12、终浓度为1%的Penicillin-Streptomycin、终浓度为1.5mg/mL的胶原酶Ⅲ、终浓度为10mM的HEPES、终浓度为1X的GlutaMAX、终浓度为10μM的Y-27632和终浓度为2%的FBS。

3.根据权利要求1所述的乳腺癌临床穿刺样本解离得到乳腺癌类器官的方法，其特征在于：所述步骤S5中乳腺癌类器官...

【技术特征摘要】

1.一种乳腺癌临床穿刺样本解离得到乳腺癌类器官的方法，其特征在于：包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的乳腺癌临床穿刺样本解离得到乳腺癌类器官的方法，其特征在于：所述步骤s2中的组织解离液包括终浓度为1x的advanced dmem/f12、终浓度为1%的penicillin-streptomycin、终浓度为1.5mg/ml的胶原酶ⅲ、终浓度为10mm的hepes、终浓度为1x的glutamax、终浓度为10μm的y-27632和终浓度为2%的fbs。

3.根据权利要求1所述的乳腺癌临床穿刺样本解离得到乳腺癌类器官的方法，其特征在于：所述步骤s5中乳腺癌类器官完全培养基包括终浓度为10%的r-spondin3、终浓度为10%的noggin、终浓度为1x的b27含va、终浓度为10mm的nicotinamide、终浓度为1.25mm的n-acetylcysteine、终浓度为100ug/ml的primocin、终浓度为5um的y-27632、终浓度为5nm的neuregulin1、终浓度为5ng/ml的fgf-7、终浓度为20ng/ml的fgf-10、终浓度为0.5um的a83-01、终浓度为5ng/ml的egf、终浓度为1um的sb202190和终浓度为100μm的β-estradiol。

4.根据权利要求1所述的乳腺癌临床穿刺样本解离得到乳腺癌类器官的方法，其特征在于：所述步骤s4中充分洗涤细胞筛网所用的洗涤液包括终浓度为1x的advanced dmem/f12、终浓度为1%的penicillin-streptomycin、终浓度为10mm的hepes...

【专利技术属性】
技术研发人员：张梦娜，黄珊瑜，杨智颖，蔡车国，胡隽源，
申请(专利权)人：深圳市北科生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：