一种检测非洲猪瘟病毒的体系、构建方法、试剂盒技术

本发明专利技术涉及基因工程技术领域，公开了一种基于CRISPR Cas12a检测非洲猪瘟病毒的体系，所述基于CRISPR Cas12a检测非洲猪瘟病毒的体系包含Cas12a蛋白和crRNA，所述crRNA通过靶标序列PAM序列后的20‑23bp的靶点序列设计得到，所述crRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述靶标序列为LAMP引物组扩增得到的扩增产物序列，所述LAMP引物组是针对ASFV衣壳蛋白VP72编码基因设计得到的，此外本申请还公开了一种基于CRISPR Cas12a检测非洲猪瘟病毒的试剂盒及基于CRISPR Cas12a检测非洲猪瘟病毒的体系的构建方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程，尤其涉及一种检测非洲猪瘟病毒的体系、构建方法、试剂盒。

技术介绍

1、非洲猪瘟(african swine fever，asf)是由非洲猪瘟病毒(african swine fevervirus，asfv)引起的一种急性、热性、高度接触性传染病，发病时间短，死亡率高，是对养猪业危害最为严重的疫病。afsv是一种双链dna病毒，二十面体形态，具有囊膜和独特的多层结构，是非洲猪瘟病毒属的唯一成员。asfv强毒株感染后引起急性临床症状，表现为呕吐，腹泻，脾脏肿大，淋巴结出血等典型症状。目前针对asf尚无可用的疫苗及治疗药物，因此asfv的早期诊断对非洲猪瘟的防控至关重要。

2、目前针对asfv的分子生物学检测方法主要包括普通pcr以及荧光定量p cr。然而这两种方法具有一定的局限性，一方面这两种检测方法都需要较长的检测时间，过程繁琐，另一方面需要在特定的实验室进行操作，而且实验仪器昂贵，不适用于生产一线。基于目前asf的现实情况，更需要一种实验仪器简单，操作简便的生产一线检测方法。

3、jennifer a.dou本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于CRISPR Cas12a检测非洲猪瘟病毒的体系，其特征在于，所述基于CRISPRCas12a检测非洲猪瘟病毒的体系包含Cas12a蛋白和crRNA，所述crRNA通过靶标序列PAM序列后的20-23bp的靶点序列设计得到，所述crRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；

2.根据权利要求1所述的基于CRISPR Cas12a检测非洲猪瘟病毒的体系，其特征在于，所述LAMP引物组包括ASFV-F3、ASFV-B3、ASFV-FIP、ASFV-BIP；

3.一种基于CRISPR Cas12a检测非洲猪瘟病毒的试剂盒，其特征在于，包含权利要求1-2...

【技术特征摘要】

1.一种基于crispr cas12a检测非洲猪瘟病毒的体系，其特征在于，所述基于crisprcas12a检测非洲猪瘟病毒的体系包含cas12a蛋白和crrna，所述crrna通过靶标序列pam序列后的20-23bp的靶点序列设计得到，所述crrna的核苷酸序列如seq id no.1所示；

2.根据权利要求1所述的基于crispr cas12a检测非洲猪瘟病毒的体系，其特征在于，所述lamp引物组包括asfv-f3、asfv-b3、asfv-fip、asfv-bip；

3.一种基于crispr cas12a检测非洲猪瘟病毒的试剂盒，其特征在于，包含权利要求1-...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘定祥，郜婷，刘思颖，
申请(专利权)人：岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心，
类型：发明
国别省市：