一种用于检测抗CD22的单克隆抗体的活性的方法及其应用技术

技术编号:41285200 阅读:56 留言:0更新日期:2024-05-11 09:34
本发明专利技术公开了一种用于检测抗CD22的单克隆抗体的活性的方法,所述方法包括将待测抗CD22的单克隆抗体与RAMOS细胞共孵育,检测内吞的待测抗CD22的单克隆抗体的浓度,将内吞的待测抗CD22的单克隆抗体的浓度与待测抗CD22的单克隆抗体的原始浓度相比,得到待测抗CD22的单克隆抗体的活性。本发明专利技术的方法针对抗CD22抗体独特的作用机制,本发明专利技术提供了一种特异性的基于细胞的活性检测方法,适用于SM03、SM06等抗CD22的单克隆抗体的质量控制;通过测定抗体结合CD22的内化率来实现对抗CD22的单克隆抗体的活性检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物检测领域,具体的说,涉及一种用于检测抗cd22的单克隆抗体的活性的方法及其应用。


技术介绍

1、cd22是bcr的共受体,通过能够区分病原体(“非自身”)或表达2,6-连接唾液酸配体的自体(“自身”)细胞上的抗原来调节有害的自身抗原信号转导,其中cd22将与2,6-连接唾液酸配体结合并调节有害的bcr信号转导(nitschke et al.,1997,cornall et al.,1999,kawasaki et al.,2011)。cd22先前被证明存在于事先形成同源多聚体的纳米团簇中,其形成依赖于相邻cd22分子与2,6-连接唾液酸配体的顺式结合(gasparrini et al.,2016)。cd22纳米团簇被覆盖从而限制bcr的调节。另一方面,当自体细胞(自身)上的自身抗原与bcr结合时,cd22优先与自体细胞的α2,6-连接唾液酸配体反式结合,增加b细胞活化的免疫调节,从而导致对自身抗原的免疫耐受(courtney et al.,2009,pfrengle et al.,2013,lübbers et al.,2018,kish本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于检测抗CD22的单克隆抗体的活性的方法,其特征在于,包括将待测抗CD22的单克隆抗体与RAMOS细胞共孵育,检测内吞的待测抗CD22的单克隆抗体的浓度,将内吞的待测抗CD22的单克隆抗体的浓度与待测抗CD22的单克隆抗体的原始浓度相比,得到待测抗CD22的单克隆抗体的活性的步骤。

2.根据权利要求1所述的用于检测抗CD22的单克隆抗体的活性的方法,其特征在于,所述检测内吞的待测抗CD22的单克隆抗体的浓度的方法包括如下步骤:

3.根据权利要求2所述的用于检测抗CD22的单克隆抗体的活性的方法,其特征在于,所述步骤1)中的诱导温度为37℃,诱导时间为1小...

【技术特征摘要】

1.一种用于检测抗cd22的单克隆抗体的活性的方法,其特征在于,包括将待测抗cd22的单克隆抗体与ramos细胞共孵育,检测内吞的待测抗cd22的单克隆抗体的浓度,将内吞的待测抗cd22的单克隆抗体的浓度与待测抗cd22的单克隆抗体的原始浓度相比,得到待测抗cd22的单克隆抗体的活性的步骤。

2.根据权利要求1所述的用于检测抗cd22的单克隆抗体的活性的方法,其特征在于,所述检测内吞的待测抗cd22的单克隆抗体的浓度的方法包括如下步骤:

3.根据权利要求2所述的用于检测抗cd22的单克隆抗体的活性的方法,其特征在于,所述步骤1)中的诱导温度为37℃,诱导时间为1小时;所述步骤1)中酸洗的酸洗使用的酸洗液的为甘氨酸、氯化钠的水溶液。

4.根据权利要求2所述的用于检测抗cd22的单克隆抗体的活性的方法,其特征在于,所述步骤2)中固定使用的固定液为4%多聚甲醛溶液;室温静置固定10分钟。

5.根据权利要求2所述的用于检测抗cd22的单克隆抗体的活性的方法,其特征在于,所述步骤3)中使用的通透液为用1×pbs配制1%bsa溶液0.1%triton-x 1...

【专利技术属性】
技术研发人员:黄健乐庄智豪
申请(专利权)人:海南赛乐敏生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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