【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药体外诊断领域，具体涉及一种环肽发光耦合分子及其制备方法和应用。
技术介绍
1、抗体与抗原具有高度特异性结合的能力，将抗原抗体与信号分子，如吖啶酯，进行化学交联形成复合物，使其具备双重功能，即具有特异性结合目标物和产生检测信号的能力，在免疫诊断中的应用十分普及。
2、目前开发出的多种蛋白化学交联剂，大多数通过利用单个反应基团位点特性，以及利用抗体自身活化程度来控制蛋白间的偶联程度，这种方法无法有效控制抗体与小分子间的偶联比例。利用抗原抗体的结合特异性以及发光分子的发光特性交联形成复合物，在免疫检测实验中，需要单个复合物分子的不同功能具有差异化程度。例如，需要检测信号灵敏度增强时，发光分子应具有更高的比例，以及基于亲和力增强时，需提高抗体的比例；基于更宽的检测范围时，发光分子偶联的比例需要降低。利用活化的发光分子与抗体进行直接偶联，无法精准控制抗体与发光分子的偶联比例，实际免疫检测复合物的功能受控性差，较难达到理想的功能可控性分子性质。
技术实现思路
1、本专利技术旨在提供一种环肽发光耦合分子及其制备方法和应用，以改善现有技术中对吖啶类发光分子偶联比例的可控性差的问题。
2、一方面，本专利技术提供一种环肽发光耦合分子，所述环肽发光耦合分子由吖啶类发光分子偶联不同比例赖氨酸氨基残基的环肽得到，所述环肽发光耦合分子为八环肽发光耦合分子或十二环肽发光耦合分子；
3、所述八环肽发光耦合分子的氨基酸序列为lys-x1-x2-x3-cys-
4、所述十二环肽发光耦合分子的氨基酸序列为lys-x1-x2-x3-lys -x4-x5-x6-cys-x7-x8-x9；
5、所述x1、x2、x3、x4、x5、x6、x7、x8、x9相互独立地包括ser、thr、gly、ala中任意一种。
6、另一方面，本专利技术提供一种环肽发光耦合分子的制备方法，将多肽自身首端和末端的羧基和氨基连接，制得环肽；通过吖啶类发光分子偶联不同比例赖氨酸氨基残基的环肽，构建得到环肽发光耦合分子。
7、进一步的，通过nsp-sa-nhs或nsp-dmae-nhs等吖啶类发光分子修饰环肽，制得环肽发光耦合分子；所述修饰包括巯基修饰、炔基修饰和琥珀酰亚胺酯修饰中任意一种。
8、可选地，制备得到八环肽发光耦合分子，其氨基酸序列为lys-x1-x2-x3-cys-x4-x5-x6；所述x1、x2、x3、x4、x5、x6相互独立地包括ser、thr、gly、ala中任意一种。
9、可选地，制备得十二环肽发光耦合分子，其氨基酸序列为lys-x1-x2-x3-lys -x4-x5-x6-cys-x7-x8-x9；所述x1、x2、x3、x4、x5、x6、x7、x8、x9相互独立地包括ser、thr、gly、ala中任意一种。
10、本专利技术还提供了环肽发光耦合分子在控制抗体与吖啶类发光分子的偶联比例中的应用。
11、本专利技术还提供了环肽发光耦合分子在制备免疫检测试剂或药物中的应用。
12、本专利技术还提供一种试剂盒，所述试剂盒包含环肽发光耦合分子。
13、本专利技术还提供了一种抗体偶联小分子药物，它包含环肽发光耦合分子。
14、本专利技术还提供一种控制吖啶类发光分子偶联抗体比例的方法，将环肽发光耦合分子与蛋白进行反应，纯化后制得环肽发光耦合分子蛋白复合物；
15、将修饰后的蛋白与环肽发光耦合分子蛋白复合物进行偶联，制得环肽发光耦合分子标记的蛋白；所述修饰后的蛋白为抗原或抗体。
16、具体地，修饰后的蛋白为巯基化修饰的蛋白或叠氮修饰的蛋白。
17、本专利技术具备的有益效果包括：
18、（1）本专利技术提供环肽发光耦合分子的制备方法，方法简单，能够快速制得环肽发光耦合分子；
19、（2）本专利技术提供环肽发光耦合分子，可用于进行抗体或蛋白的偶联，能够精准控制吖啶类发光分子与抗体的偶联比例，制得高纯度特定比例的偶联复合物，达到吖啶类发光分子比例可控的效果。
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1.一种环肽发光耦合分子，其特征在于，所述环肽发光耦合分子由吖啶类发光分子偶联不同比例赖氨酸氨基残基的环肽得到，所述环肽发光耦合分子为八环肽发光耦合分子或十二环肽发光耦合分子；
2.一种如权利要求1所述的环肽发光耦合分子的制备方法，其特征在于，将多肽自身首端和末端的羧基和氨基连接，制得环肽；通过吖啶类发光分子偶联不同比例赖氨酸氨基残基的环肽，构建得到环肽发光耦合分子。
3.根据权利要求2所述的环肽发光耦合分子的制备方法，其特征在于，所述吖啶类发光分子为NSP-SA-NHS、NSP-DMAE-NHS中任意一种。
4.如权利要求1所述的环肽发光耦合分子在控制抗体与吖啶类发光分子的偶联比例中的应用。
5.如权利要求1所述的环肽发光耦合分子在制备免疫检测试剂或药物中的应用。
6.一种试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含权利要求1所述的环肽发光耦合分子。
7.一种抗体偶联小分子药物，其特征在于，包含权利要求1所述的环肽发光耦合分子。
8.一种控制吖啶类发光分子偶联抗体比例的方法，其特征在于，权利要求1所述的环
9.根据权利要求8所述的一种控制吖啶类发光分子偶联抗体比例的方法，其特征在于，修饰后的蛋白为巯基化修饰的蛋白或叠氮修饰的蛋白。
...【技术特征摘要】
1.一种环肽发光耦合分子，其特征在于，所述环肽发光耦合分子由吖啶类发光分子偶联不同比例赖氨酸氨基残基的环肽得到，所述环肽发光耦合分子为八环肽发光耦合分子或十二环肽发光耦合分子；
2.一种如权利要求1所述的环肽发光耦合分子的制备方法，其特征在于，将多肽自身首端和末端的羧基和氨基连接，制得环肽；通过吖啶类发光分子偶联不同比例赖氨酸氨基残基的环肽，构建得到环肽发光耦合分子。
3.根据权利要求2所述的环肽发光耦合分子的制备方法，其特征在于，所述吖啶类发光分子为nsp-sa-nhs、nsp-dmae-nhs中任意一种。
4.如权利要求1所述的环肽发光耦合分子在控制抗体与...
【专利技术属性】
技术研发人员：许德荣，沈志伟，卢萍，徐思，
申请(专利权)人：江西省转化医学研究院，
类型：发明
国别省市：
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