用于提取细菌中质粒DNA的超滤浓缩方法技术

本申请公开了用于提取细菌中质粒DNA的超滤浓缩方法，采用“初浓缩→洗滤→再浓缩”的顺序对样品进行超滤浓缩，其中初浓缩和洗滤通过第一循环路径进行，再浓缩通过第二循环路径进行，第二循环路径能够将原液尽可能的收集至储液袋中；本申请采用分步浓缩方式，一方面可减少中空纤维及管路滞留体积，提高收率；另一方面，可提高洗滤阶段膜通量，降低中空纤维超滤膜组件使用数量；另外通过再浓缩，使样品浓度在短时间内达到目标浓度，并保证稳定的收率。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及生物制药,特别是涉及用于提取细菌中质粒dna的超滤浓缩方法。

技术介绍

1、随着生物制药领域的不断发展，对质粒dna的需求量逐渐增加，如何获得高纯度、高质量的质粒dna变得尤为重要。应用于基因治疗和细胞治疗的质粒dna，主要从大肠杆菌中，通过裂解、固液分离、纯化、超滤浓缩等工艺来获得。

2、在生物药的生产工艺过程中，超滤浓缩通常是生产工艺的最后一步。超滤(ultrafiltration、uf)是按照被制备生物分子大小为基础的膜过滤和换液技术。超滤主要包括垂直过滤和切向流过滤，通常过滤介质为孔径细小的超滤膜或微滤膜时料液中固形物含量很高时，采取垂直过滤方式，流速将急速降低，因此垂直过滤只能处理小体积的料液。当对于较大规模的料液过滤时，就需要采用切向流过滤方式，液体流动在过滤介质表面产生剪切力，减小了滤饼层或凝胶层的堆积，保证了稳定的过滤速度。切向流超滤技术中，目标产物一定压力下不断循环切向流过超滤膜得到浓缩。切向流超滤技术对于低或者中浓度的生物大分子溶液的制备非常有效的，而且批次之后的差异性也可以得到很好的控制。p>

3、但是对本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.用于提取细菌中质粒DNA的超滤浓缩方法，其特征在于，步骤如下：

2.根据权利要求1所述的用于提取细菌中质粒DNA的超滤浓缩方法，其特征在于，所述第一循环路径包括补料泵、样品罐、第一循环泵、中空纤维超滤膜组件、A1夹止件、A3夹止件、B2阀。

3.根据权利要求2所述的用于提取细菌中质粒DNA的超滤浓缩方法，其特征在于，所述第一循环泵、补料泵为隔膜泵。

4.根据权利要求1所述的用于提取细菌中质粒DNA的超滤浓缩方法，其特征在于，所述第二循环路径包括储液袋、第二循环泵、中空纤维超滤膜组件、A2夹止件、A4夹止件、B1阀。

5.根据权利要求4所...

【技术特征摘要】

1.用于提取细菌中质粒dna的超滤浓缩方法，其特征在于，步骤如下：

2.根据权利要求1所述的用于提取细菌中质粒dna的超滤浓缩方法，其特征在于，所述第一循环路径包括补料泵、样品罐、第一循环泵、中空纤维超滤膜组件、a1夹止件、a3夹止件、b2阀。

3.根据权利要求2所述的用于提取细菌中质粒dna的超滤浓缩方法，其特征在于，所述第一循环泵、补料泵为隔膜泵。

4.根据权利要求1所述的用于提取细菌中质粒dna的超滤浓缩方法，其特征在于，所述第二循环路径包括储液袋、第二循环泵、中空纤维超滤膜组件、a2夹止件、a4夹止件、b1阀。

5.根据权利要求4所述的用于提取细菌中质粒dna的超滤浓缩方法，其特征在于，所述第二循环泵为蠕动泵。

6.根据权利要求2所述的用于提取细菌中质粒dna的超滤浓缩方法，其特征在于，所述第一循环路径中所述补料泵与所述样品罐的入口端相连，所述样品罐的出口端与所述第一循环泵的入口端相连，所述样品罐与所述第...

【专利技术属性】
技术研发人员：于开鹏，居维艳，胡晨飞，吴宗圣，刘丹，苏保卫，
申请(专利权)人：艾棣维欣苏州生物制品有限公司，
类型：发明
国别省市：