【技术实现步骤摘要】
本文涉及生物检测技术，尤指一种合成磷脂试剂在如活化部分凝血活酶时间(aptt)检测中的应用及使用方法。
技术介绍
1、活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time，aptt)是用于评价血液凝固的一个指标，由于早期使用高岭土和脑磷脂进行该项测试实验，因此该测试的历史曾用名为高岭土-脑磷脂凝固时间(kaolin-cephalin clotting time，kcct)。aptt是通过体外标准时间内以接触因子激活物(如白陶土、鞣酸等)激活凝血因子ⅻ，以部分凝血活酶(脑磷脂)替代pf3，加入ca2+后激活内源性凝血途径，观察血浆凝固所需的时间。活化部分凝血活酶时间反映血浆中凝血因子i、ii、v、viii、ix、x、xi、xii活性，是检查机体内源性凝血系统功能有无障碍的过筛试验，也用于口服肝素的监测。
2、在疑患血友病或凝固因子异常症等的与凝固因子的缺乏或异常关联的疾病的受试者的血液中存在狼疮抗凝物(la)时，通过由以往的aptt测定用试剂的测定无法判别凝固时间的延长起因于凝固因子的缺乏或异常，还是起因于la。
3、狼疮抗凝物(la)是一种可在体内自然产生或因自身免疫而产生的磷脂依赖的病理性循环抗凝物质，多数为igg，少数为igm或二者混合存在。狼疮抗凝物(la)在体外试验中延长磷脂依赖的凝血试验时间，因首先在系统性红斑狼疮(sle)患者血清中发现而得名。主要通过结合β2糖蛋白ⅰ(β2-gpⅰ)及其他带负电荷的磷脂结合而使磷脂依赖的凝血时间延长。狼疮抗凝物(la
4、狼疮抗凝物(la)在1％-5％健康人中存在，可随着年龄增加而增加，多表现为弱阳性，无aps临床表现。同时，感染、肿瘤和某些药物均可导致la暂时升高。因此，患者初次检测后，应在12周之后再次进行狼疮抗凝物检测，以明确诊断。患者进行肝素、华法林等抗凝剂治疗时也可产生假阳性结果。
5、目前尚无la检测的统一标准和参考值，关于la检测的三种指南【国际血栓与止血学会(isth)2009，英国血液学标准委员会(bcsh)2012和临床实验室和标准化协会(clsi)2014】也不完全一致。
6、因此，对于优良的适用于普通患者及与la相关的患者的aptt测定用试剂仍然存在需求。
技术实现思路
1、以下是对本文详细描述的主题的概述。本概述并非是为了限制权利要求的保护范围。
2、本申请提供了一种aptt检测试剂、其制备方法及其应用。所述aptt检测试剂改善aptt试剂对la患者的敏感度并且所述aptt检测具有提高的热稳定性。
3、本申请的实施方式中，提供了一种aptt检测试剂，所述aptt检测试剂可以包括r1试剂和r2试剂，所述r1试剂包括激活剂以及选自磷脂酰丝氨酸、磷脂酰乙醇胺和磷脂酰胆碱中任意两种的磷脂混合物；并且所述磷脂混合物的浓度范围为0.1g/l-1g/l。
4、本申请的一些实施方式中，优选地，所述磷脂混合物可以是磷脂酰乙醇胺和磷脂酰胆碱的磷脂混合物。
5、本申请的一些实施方式中，优选地，所述磷脂混合物可以是磷脂酰乙醇胺和磷脂酰丝氨酸的磷脂混合物。
6、本申请的一些实施方式中，优选地，所述磷脂混合物可以是磷脂酰丝氨酸和磷脂酰胆碱的磷脂混合物。
7、本申请的一些实施方式中，所述的磷脂混合物中的两种磷脂的重量比范围是3:7-7:3。
8、优选地，磷脂酰丝氨酸和磷脂酰胆碱的磷脂混合物中磷脂酰丝氨酸和磷脂酰胆碱的重量比范围是3:7-7:3
9、本申请的一些实施方式中，所述r1试剂还可以包括缓冲液和金属离子化合物；
10、优选地，所述金属离子化合物选自以下的任意一种：氯化镁、氯化铝、硫酸铜；并且所述金属离子化合物的浓度范围为20mg/l-50mg/l。
11、本申请的一些实施方式中，任选地，所述r1试剂还可以包括表面活性剂、抗氧化剂和稳定剂中的一种或多种；
12、优选地，所述表面活性剂选自以下的任意一种：聚乙烯吡咯烷酮和聚乙二醇，并且聚合度为2000-20000；并且所述表面活性剂的浓度范围为1g/l-8g/l。
13、优选地，所述抗氧化剂选自以下的任意一种：迷迭香酸、丁基羟基茴香醚、儿茶酸；并且所述抗氧化剂的浓度范围为1mm-6mm。
14、优选地，所述稳定剂选自以下的任意一种或多种：甘氨酸、甘露醇、bsa和proclin300；并且所述甘氨酸的浓度范围为5g/l-20g/l；所述甘露醇的浓度范围为2g/l-10g/l；所述bsa的浓度范围为0g/l-10g/l；所述proclin300的比例为0.15％。
15、本申请的一些实施方式中，所述r1试剂可以包括表面活性剂、抗氧化剂和稳定剂；
16、优选地，所述表面活性剂选自以下的任意一种：聚乙烯吡咯烷酮和聚乙二醇，并且聚合度为2000-20000；并且所述表面活性剂的浓度范围为1g/l-8g/l。
17、优选地，所述抗氧化剂选自以下的任意一种：迷迭香酸、丁基羟基茴香醚、儿茶酸；并且所述抗氧化剂的浓度范围为1mm-6mm。
18、优选地，所述稳定剂选自以下的任意一种或多种：甘氨酸、甘露醇、bsa和proclin300；并且所述甘氨酸的浓度范围为5g/l-20g/l；所述甘露醇的浓度范围为2g/l-10g/l；所述bsa的浓度范围为0g/l-10g/l；所述proclin300的比例为0.15％。
19、本申请的一些实施方式中，所述r2试剂可以包括钙盐；
20、优选地，所述钙盐可以选自钙与无机酸或有机酸的盐；
21、所述钙盐可以是cacl2；并且所述cacl2的浓度可以是25mm。
22、本申请的一些实施方式中，任选地，所述r2试剂还可以包括保护剂。
23、本申请的一些实施方式中，可选地，所述保护剂可以是proclin300。
24、本申请的一些实施方式中，所述缓冲液选自以下的任意一种：三羟基氨基甲烷缓冲液、哌嗪-1,4-二乙磺酸缓冲液、4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液、3-(n-吗啉)丙磺酸缓冲液；并且所述缓冲液的浓度范围为10mm-100mm，ph 7.0-9.0。
25、本申请的一些实施方式中，优选地，所述缓冲液可以为4-羟乙基哌嗪乙硫磺酸缓冲液。
26、本申请的一些实施方式中，优选地，所述缓冲液可以为三羟基氨基甲烷缓冲液。
27、本申请的一些实施方式中，优选地，所述缓冲液可以为哌嗪-1,4-二乙磺酸缓冲液。
28、本申请的一些实施方式中，优选地，所述缓冲液可以为4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液。
29、本申请的一些实施方式中，优选地，所述缓冲液可以为3-(n-吗啉)丙磺酸缓冲液。
30、本申请本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种APTT检测试剂，其中，所述APTT检测试剂包括R1试剂和R2试剂，所述R1试剂包括激活剂以及选自磷脂酰丝氨酸、磷脂酰乙醇胺和磷脂酰胆碱中任意两种的磷脂混合物；并且所述磷脂混合物的浓度范围为0.1g/L-1g/L。
2.根据权利要求1所述的APTT检测试剂，其中，所述磷脂混合物是磷脂酰乙醇胺和磷脂酰胆碱的磷脂混合物。
3.根据权利要求2所述的APTT检测试剂，其中，所述的磷脂混合物中的两种磷脂的重量比范围是3:7-7:3。
4.根据权利要求1所述的APTT检测试剂，其中，所述R1试剂还包括缓冲液和金属离子化合物；
5.根据权利要求4所述的APTT检测试剂，其中，所述R1试剂还包括表面活性剂、抗氧化剂和稳定剂中的一种或多种；
6.根据权利要求1至5中任一项所述的APTT检测试剂，其中，所述R2试剂包括钙盐；
7.根据权利要求4所述的APTT检测试剂，其中，所述激活剂选自以下的任意一种：鞣花酸、高岭土、白陶土、硅藻土、胶体氧化硅；并且所述激活剂的浓度范围为20mg/L-500mg/L；
8.根
9.根据权利要求1-7中任一项所述的APTT检测试剂用于APTT检测的应用。
10.根据权利要求1-7中任一项所述的APTT检测试剂用于疑似具有LA及凝血因子缺乏的受试者的APTT检测的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种aptt检测试剂，其中，所述aptt检测试剂包括r1试剂和r2试剂，所述r1试剂包括激活剂以及选自磷脂酰丝氨酸、磷脂酰乙醇胺和磷脂酰胆碱中任意两种的磷脂混合物；并且所述磷脂混合物的浓度范围为0.1g/l-1g/l。
2.根据权利要求1所述的aptt检测试剂，其中，所述磷脂混合物是磷脂酰乙醇胺和磷脂酰胆碱的磷脂混合物。
3.根据权利要求2所述的aptt检测试剂，其中，所述的磷脂混合物中的两种磷脂的重量比范围是3:7-7:3。
4.根据权利要求1所述的aptt检测试剂，其中，所述r1试剂还包括缓冲液和金属离子化合物；
5.根据权利要求4所述的aptt检测试剂，其中，所述r1试剂还包括表面活...
【专利技术属性】
技术研发人员：饶微，刘坤，陈华，文慧，俞方舟，
申请(专利权)人：深圳市新产业生物医学工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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