【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及分子遗传育种，特别是涉及一种与大豆主茎节数相关的kasp分子标记及其应用。
技术介绍
1、大豆为我国重要的经济粮油作物，大豆中含有异黄酮、蛋白质、氨基酸和脂肪等多种营养物质而饱受全球人民的青睐，同时大豆异黄酮、大豆多肽、大豆磷脂、大豆低聚糖、大豆皂甙等，具有抗肿瘤、降血脂、预防心血管疾病等作用，在保健食品和医学领域有着极高的潜在应用价值。野生大豆古时还被当作珍贵药材。
2、目前，中国大豆出口贸易量极低，而进口贸易量在较高水平的基础上仍持续不断攀升，且进口贸易被跨国公司控制，这样的贸易现状对大豆产业安全造成了影响。要想打赢这场粮食保卫战，中国人就要把饭碗牢牢抓在自己的手里，最有效的解决措施就是：第一加大大豆种植面积，第二提高大豆产量或者培育高产优质的大豆新品种。在耕地面积有限的情况下第一种解决方法显然是不可行的，可见我们要着手在第二种方法上下功夫。而现有技术中，牛永锋(2023)利用相关性分析、回归分析和灰色关联度分析等多元分析法明确了黄淮海地区(南片)大豆产量与主要性状的关系。结果表明，主茎节数和百粒重的关联度最高；仲义等(2011)发现，主茎节数、分枝数、荚数、株高对产量均有较大贡献；陆娣(2018)等通过研究发现大豆的蛋白质含量和脂肪含量与主茎节数也呈显著相关关系；通过以上研究结果均说明主茎节数是影响产量的主要因素。因此，在育种过程中应注重主茎节数的筛选，促进单株粒重和产量的提高。进一步探究大豆主茎节数数量相关候选基因，为后续功能性大豆分子育种奠定基础尤为重要。
技术实现
1、本专利技术的目的是提供一种与大豆主茎节数相关的kasp分子标记及其应用，以解决上述现有技术存在的问题，该kasp分子标记可以灵敏、高效、低成本的预测大豆主茎节数数量，利于筛选培育高产优质的大豆品种，辅助大豆功能性分子育种，进一步缩短育种进程。
2、为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：
3、本专利技术提供一种与大豆主茎节数相关的kasp分子标记，所述kasp分子标记的核苷酸序列如seq id no:1所示，seq id no:1所示序列的第20位存在a/g碱基突变。
4、本专利技术还提供一种扩增所述的分子标记的引物组，所述引物组包括seq id no:2-4所示的引物。
5、本专利技术还提供一种鉴定大豆主茎节数的试剂盒，包括所述的引物组。
6、本专利技术还提供一种所述的kasp分子标记或所述的引物组或所述的试剂盒在以下任一项中的应用：
7、(1)在鉴定大豆主茎节数中的应用；
8、(2)在培育选择大豆主茎节数多少的转基因大豆中的应用；
9、(3)在改良大豆种质资源中的应用；
10、(4)在培育高产大豆中的应用。
11、本专利技术还提供一种鉴定大豆主茎节数的方法，包括以下步骤：
12、以待测大豆样品的基因组dna为模板，利用seq id no:2-4所示的引物组进行荧光定量pcr扩增，根据所得扩增产物的荧光检测结果进行基因型分型，以鉴定所述待测大豆样品的主茎节数。
13、优选的是，若扩增产物的荧光与seq id no：2所示引物标记的荧光基团的荧光一致，则所述待测大豆样品为主茎节数多的大豆；若扩增产物的荧光与seq id no：3所示引物标记的荧光基团的荧光一致，则所述待测大豆样品为主茎节数较少的大豆。
14、优选的是，所述荧光定量pcr扩增的反应体系中seq id no:2所示的引物f1、seqid no:3所示的引物f2和seq id no:4所示的引物r的体积比为2:2:5。
15、优选的是，所述荧光定量pcr扩增的反应程序为：94℃预变性15min；94℃变性20s，61-55℃梯度复性/延伸1min，每个循环降低0.6℃，10个循环；94℃变性20s，55℃复性/延伸1min，26个循环。
16、本专利技术公开了以下技术效果：
17、本专利技术开发一个与大豆主茎节数显著相关的kasp分子标记，该分子标记的s19_45146919位点存在a/g突变(即seq id no：1所示序列的第20位存在a/g突变)，利用该分子标记对大豆茎节数进行关联性分析，发现基因型为aa的大豆品种主茎节数数量均值显著高于基因型为gg的大豆品种。本专利技术利用kasp分子标记可以灵敏、高效、低成本的预测大豆主茎节数多少，利于筛选培育高产优质量的大豆品种，辅助大豆功能性分子育种，进一步缩短育种进程。
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1.一种与大豆主茎节数相关的KASP分子标记，其特征在于，所述KASP分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，SEQ ID NO:1所示序列的第20位存在A/G碱基突变。
2.一种扩增权利要求1所述的分子标记的引物组，其特征在于，所述引物组包括SEQ IDNO:2-4所示的引物。
3.一种鉴定大豆主茎节数的试剂盒，其特征在于，包括权利要求2所述的引物组。
4.一种权利要求1所述的KASP分子标记或权利要求2所述的引物组或权利要求3所述的试剂盒在以下任一项中的应用：
5.一种鉴定大豆主茎节数的方法，其特征在于，包括以下步骤：
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，若扩增产物的荧光与SEQ ID NO：2所示引物标记的荧光基团的荧光一致，则所述待测大豆样品为主茎节数多的大豆；若扩增产物的荧光与SEQ ID NO：3所示引物标记的荧光基团的荧光一致，则所述待测大豆样品为主茎节数较少的大豆。
7.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述荧光定量PCR扩增的反应体系中SEQ IDNO:2所示的引物F1、SE
8.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述荧光定量PCR扩增的反应程序为：94℃预变性15min；94℃变性20s，61-55℃梯度复性/延伸1min，每个循环降低0.6℃，10个循环；94℃变性20s，55℃复性/延伸1min，26个循环。
...【技术特征摘要】
1.一种与大豆主茎节数相关的kasp分子标记，其特征在于，所述kasp分子标记的核苷酸序列如seq id no:1所示，seq id no:1所示序列的第20位存在a/g碱基突变。
2.一种扩增权利要求1所述的分子标记的引物组，其特征在于，所述引物组包括seq idno:2-4所示的引物。
3.一种鉴定大豆主茎节数的试剂盒，其特征在于，包括权利要求2所述的引物组。
4.一种权利要求1所述的kasp分子标记或权利要求2所述的引物组或权利要求3所述的试剂盒在以下任一项中的应用：
5.一种鉴定大豆主茎节数的方法，其特征在于，包括以下步骤：
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，若扩增产物的荧光与seq id ...
【专利技术属性】
技术研发人员：王军燕，陈华涛，王显生，周苗苗，王学军，魏利斌，张红梅，张威，王琼，
申请(专利权)人：江苏省农业科学院，
类型：发明
国别省市：
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