【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于体外诊断领域，具体涉及一种艾滋样本检测试剂盒。
技术介绍
1、hiv感染早期缺乏临床症状和体征，部分出现症状但不特异，病程时间短，但感染性极强，血清标志物变化快，不同检测方法窗口期存在差异，作为筛查试剂，hiv检测试剂必须具有很好的的灵敏度和特异性，避免误诊或漏诊。现阶段实验室诊断通常是通过酶联免疫吸附试验(elisa)、化学发光或快速抗体试验检测hiv-1或hiv-2抗体。
2、hiv化学发光法采用双抗原夹心法进行测定hiv抗体。样本、羧基磁珠交联hiv抗原和抗体、生物素化hiv-p24抗体依次加入到反应杯中，孵育、洗涤，样本中hiv抗体和hiv-p24抗原被捕获在磁微粒上。之后，加入碱性磷酸酶和酶标亲和素，孵育、洗涤。加入化学发光底物，测定产生的化学发光信号，以相对发光单位(rlu)进行表示。然而现阶段试剂检测存在p24抗原检测灵敏度较低等问题，血清中抗原含量较少时会造成漏检等问题。
3、如何提高p24抗原检测灵敏度是目前hiv检测迫切需要解决的问题。
技术实现思路
1、为解决上述技术问题，本专利技术第一方面提供了一种hiv抗体检测试剂盒，包括：试剂1，包含hiv-1交联磁微粒、hiv-2交联磁微粒、hiv-o交联磁微粒和hiv-p24与羧基交联磁微粒；试剂2，包含生物素化的hiv-p24抗体；试剂3，包含hiv-1抗原hiv-1-ap和酶标亲和素；试剂4，包含hiv-2抗原hiv-2-ap和hiv-o抗原hiv-o-ap。
2
3、在某些实施方式中，所述试剂2还包含pb缓冲液，小牛血清，吐温-20和叠氮钠；优选地，所述pb缓冲液的浓度为10mm，所述小牛血清浓度为10％，所述吐温-20浓度为2％，所述叠氮钠浓度为0.4％。
4、在某些实施方式中，所述试剂3还包含pb缓冲液，氯化镁，氯化锌，酪蛋白酸钠，小牛血清，tritonx-100和叠氮钠；优选地，所述pb缓冲液的浓度为10mm，所述氯化镁浓度为0.1％，所述氯化锌浓度为0.5％，所述酪蛋白酸钠浓度为0.4％，所述小牛血清浓度为10％，所述tritonx-100浓度为2.05％，所述叠氮钠浓度为0.4％。
5、在某些实施方式中，所述试剂4还包含pb缓冲液、氯化镁，氯化锌，酪蛋白酸钠，小牛血清，tritonx-100和叠氮钠；优选地，pb缓冲液的浓度为10mm，所述氯化镁浓度为0.1％，所述氯化锌浓度为0.5％，所述酪蛋白酸钠浓度为0.4％，所述小牛血清浓度为10％，所述tritonx-100浓度为2.05％，所述叠氮钠浓度为0.4％。
6、在某些实施方式中，所述试剂盒进一步包含阴性定标品a和阳性定标品b。
7、在某些实施方式中，所述阴性定标品a包含10mm pbs缓冲液，15％丙三醇、2％ bsa和2‰proclin300，ph 7.4±0.05；所述阳性定标品b为在定标品a中添加合适浓度的hiv-1阳性物质，使结果s/co为10。
8、在某些实施方式中，所述hiv-1阳性物质为艾滋病患者血浆。
9、在某些实施方式中，所述试剂1中所述hiv-1交联磁微粒、hiv-2交联磁微粒、hiv-o交联磁微粒交联过程包括如下步骤：1)磁珠活化清洗；2)磁珠与抗原原料混合反应；3)清洗后加入封闭液封闭反应；4)再次清洗后保存。
10、在某些实施方式中，所述抗原原料为抗原hiv-1、hiv-2、hiv-o，各抗原分别与磁珠进行包被。
11、在某些实施方式中，所述hiv-p24与羧基交联磁微粒交联过程包括如下步骤：1)磁珠活化、清洗；2)磁微粒与edc溶液、nhs溶液混合；3)磁珠清洗后与原料母液p24混合反应；3)清洗后加入封闭液封闭反应；4)再次清洗后保存。
12、与现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：
13、本专利技术提供了一种优化的hiv抗体检测试剂盒，优化后的试剂盒相对于对照组灵敏度较提高了54.96％，有效解决了现有技术方法hiv检测时p24抗原低灵敏度问题，容易造成误诊的问题。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.HIV抗体检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：试剂1，包含HIV-1交联磁微粒、HIV-2交联磁微粒、HIV-O交联磁微粒和HIV-p24与羧基交联磁微粒；试剂2，包含生物素化的HIV-p24抗体；试剂3，包含HIV-1抗原HIV-1-AP和酶标亲和素；试剂4，包含HIV-2抗原HIV-2-AP和HIV-O抗原HIV-O-AP。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂1还包含Good’s缓冲液、表面活性剂RPE1740，吐温20和蔗糖；优选地，所述Good’s缓冲液为MOPSO，所述表面活性剂RPE1740浓度为1‰，所述吐温20浓度为0.1‰，所述蔗糖浓度为2.5％。
3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂2还包含PB缓冲液，小牛血清，吐温-20和叠氮钠；优选地，所述PB缓冲液的浓度为10mM，所述小牛血清浓度为10％，所述吐温-20浓度为2％，所述叠氮钠浓度为0.4％。
4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂3还包含PB缓冲液，氯化镁，氯化锌，酪蛋白酸钠，小牛血清，TritonX-100和叠
5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂4还包含PB缓冲液、氯化镁，氯化锌，酪蛋白酸钠，小牛血清，TritonX-100和叠氮钠；优选地，PB缓冲液的浓度为10mM，所述氯化镁浓度为0.1％，所述氯化锌浓度为0.5％，所述酪蛋白酸钠浓度为0.4％，所述小牛血清浓度为10％，所述TritonX-100浓度为2.05％，所述叠氮钠浓度为0.4％。
6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒进一步包含阴性定标品A和阳性定标品B。
7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述阴性定标品A包含10mM PBS缓冲液，15％丙三醇、2％BSA和2‰Proclin300，pH 7.4±0.05；所述阳性定标品B为在定标品A中添加合适浓度的HIV-1阳性物质，使结果S/CO为10。
8.根据权利要求1-7任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂1中所述HIV-1交联磁微粒、HIV-2交联磁微粒、HIV-O交联磁微粒交联过程包括如下步骤：1)磁珠活化清洗；2)磁珠与抗原原料混合反应；3)清洗后加入封闭液封闭反应；4)再次清洗后保存。
9.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，所述抗原原料为抗原HIV-1、HIV-2、HIV-O，分别与磁珠进行包被。
10.根据权利要求1-9任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述HIV-p24与羧基交联磁微粒交联过程包括如下步骤：1)磁珠活化、清洗；2)磁微粒与EDC溶液、NHS溶液混合；3)磁珠清洗后与原料母液p24混合反应；3)清洗后加入封闭液封闭反应；4)再次清洗后保存。
...【技术特征摘要】
1.hiv抗体检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：试剂1，包含hiv-1交联磁微粒、hiv-2交联磁微粒、hiv-o交联磁微粒和hiv-p24与羧基交联磁微粒；试剂2，包含生物素化的hiv-p24抗体；试剂3，包含hiv-1抗原hiv-1-ap和酶标亲和素；试剂4，包含hiv-2抗原hiv-2-ap和hiv-o抗原hiv-o-ap。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂1还包含good’s缓冲液、表面活性剂rpe1740，吐温20和蔗糖；优选地，所述good’s缓冲液为mopso，所述表面活性剂rpe1740浓度为1‰，所述吐温20浓度为0.1‰，所述蔗糖浓度为2.5％。
3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂2还包含pb缓冲液，小牛血清，吐温-20和叠氮钠；优选地，所述pb缓冲液的浓度为10mm，所述小牛血清浓度为10％，所述吐温-20浓度为2％，所述叠氮钠浓度为0.4％。
4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂3还包含pb缓冲液，氯化镁，氯化锌，酪蛋白酸钠，小牛血清，tritonx-100和叠氮钠；优选地，所述pb缓冲液的浓度为10mm，所述氯化镁浓度为0.1％，所述氯化锌浓度为0.5％，所述酪蛋白酸钠浓度为0.4％，所述小牛血清浓度为10％，所述tritonx-100浓度为2.05％，所述叠氮钠浓度为0.4％。
5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂4还包含pb缓冲液、氯化镁，氯化...
【专利技术属性】
技术研发人员：李诗幻，毛鑫磊，林杰，胡忠双，
申请(专利权)人：上海科华生物工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。