【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一株植物乳杆菌，具体涉及一株可以转化亚硒酸钠的植物乳杆菌及其应用。
技术介绍
1、硒是一种必需的微量元素，对动物和人类的正常发育至关重要。1817年，硒(se)被瑞典化学家jakob berzelius发现，最初被认为是一种有毒元素。随着对硒参与的各种生理反应的不断研究，发现硒是机体必不可少的膳食补充剂。植物是硒的主要来源，在谷物和坚果中有高浓度的硒，其他来源包括鸡蛋、肉类、牛肉、鸡肉、火鸡和一些鱼类，特别是金枪鱼和鳕鱼。然而，硒安全阈值较窄，根据世界卫生组织的建议硒的摄入量为40～400μg/天。有研究表明，在安全阈值范围内，硒不仅具有抗氧化、抗衰老、保护和修复细胞的活性，还可以增强机体的免疫系统和解毒功能，而在安全阈值外，缺硒可导致克山病和大骨节病，过量摄入硒则可能导致硒中毒。硒的营养价值主要取决于食物中存在的或者人为额外补充的硒的种类和浓度。在自然界中，硒主要以无机硒的形态存在，包括硒酸盐[se(vi)]、亚硒酸盐[se(iv)]、元素硒[se(0)]和[se(-ii)]。有机形式包括硒代半胱氨酸、硒代蛋氨酸、硒蛋白等。与无机硒相比，有机硒及纳米硒生物利用度更高、毒性更小、更有利于动植物吸收及安全利用。有机硒及纳米硒可以通过物理和化学方法合成，但其生产成本高，产量低，而利用微生物可以实现无机硒转化为高营养价值的有机及纳米形式的硒形态，硒的生物转化也逐渐成为人们关注的焦点。益生菌是富硒微生物研究领域的主要对象，包括富硒酵母、富硒乳酸菌和富硒双歧杆菌。富硒益生菌已被证明具有多种益处，如抗氧化、抗致病、抗诱变、抗癌
2、应用于食物中的富硒益生菌不仅能提供人体所需的胃肠蠕动、促进消化吸收、增强免疫力，还能直接提供丰富的有机硒源(主要是硒蛋白)。首先，益生菌的生物转化能力为我们提供了人类和动物营养所需的廉价有机硒来源。其次，益生菌在肠道中长期存活后，可以从饮食中积累硒，从而影响宿主的硒摄入量，进而改变宿主中几种硒蛋白的表达，最终从养生和营养元素补充两个角度满足人体的需求。目前，关于益生菌的富硒研究主要是将亚硒酸钠转化为有机硒，转化为其他形式的硒(例如，红色纳米硒)的研究较少，而相比与有机硒，纳米硒的安全阈值更宽且更利于人体吸收利用。针对目前人们及动植物对健康高效补硒的需求，进而需要提供一种更适的方式。
技术实现思路
1、本专利技术目的在于一株可以转化亚硒酸钠的植物乳杆菌及其应用。
2、为实现上述目的，本专利技术的技术方案如下：
3、一株植物乳杆菌，植物乳植杆菌(lactiplantibacillus plantarum)smb14，于2022年11月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物有中心，保藏编号为cgmcc no.26150。
4、所述植物乳杆菌(lactiplantibacillus plantarum)smb14培养于mrs培养基中，在30～40℃下培养保存。
5、进一步的说：
6、a.取山羊小肠10cm，用无菌蒸馏水将肠衣外表面冲洗干净，用无菌剪刀将肠衣剪开，随后用无菌刀片将小肠内含物刮出至无菌蒸馏水中，搅拌均匀，36℃摇床160rpm振荡20min，制备小肠内含物菌液。
7、b.将步骤a所得的菌液上清液以5％(v/v)接种于mrs培养基中，36℃摇床160rpm培养24h，得到小肠内含物菌悬液。
8、c.将步骤b所得的菌悬液稀释10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7、10-8的倍数，分别取不同浓度梯度的菌悬液50μl均匀涂布于mrs固体培养基平板。36℃静置培养48h。
9、d.观察步骤c所得的固体平板中菌落形态、颜色、表面质地、边缘形状等特征，选取不同特征菌落采用四区划线法接种于mrs固体平板中，36℃静置培养48h。
10、e.选取步骤d所得的固体平板中具有不同菌落特征的菌落，四区划线法接种于mrs固体平板上，36℃静置培养48h，重复步骤e，直至固体平板菌落单一，得到不同单一纯菌落固体平板。
11、f.将步骤e所得的固体平板中单一纯菌落划线接种于含有亚硒酸钠100mg·l-1的mrs固体培养基上，36℃静置培养48h。
12、g.观察步骤f所得的固体平板中菌落特征，选取具有生长优势，红色性状的菌株，即得到具有转化亚硒酸钠能力的菌株。
13、步骤g得到的菌株，结合菌落形态特征、生理生化特性和基于16s rdna基因序列的系统分析结果，鉴定从山羊小肠中筛选出的菌株为植物乳杆菌(lactiplantibacillusplantarum)。
14、上述mrs培养基(每升)为：蛋白胨10g、牛肉膏8g、酵母浸出粉4g、葡萄糖20g、磷酸氢二钾(无水)2g、柠檬酸三氨(无水)2g、乙酸钠(含3水)5g、硫酸镁(含7水)0.2g、硫酸锰(含4水)0.05g、吐温-80 1g。
15、一种所述的植物乳杆菌的应用，所述菌株在富硒中的应用。
16、一种富硒菌剂，菌剂含所述的菌株。
17、所述菌剂含有该菌株的培养物、培养菌悬液或发酵液。
18、所述菌剂中菌株smb14培养od600nm至0.8-1.2。
19、一种富硒方法，利用所述菌株在含有亚硒盐中进行培养，进而实现富集硒；具体为：
20、将培养od600nm至0.8-1.2的菌株在含亚硒盐的培养体系内25～35℃下震荡培养8-48小时，即可将亚硒盐转化为纳米硒，实现对硒的富集(富硒后菌株呈红色，所富集的硒形态为红色纳米硒)。
21、所述亚硒盐为亚硒酸钠，亚硒酸钠的硒浓度为100mg·l-1。
22、本专利技术所具有的优点：
23、本专利技术方式能够获得大量纳米硒，且积累量大，同时方法简单，本专利技术所获菌株纯度高，富硒应用成本低，富硒效果好，富硒菌株安全健康，可以应用于食品生产及动物饲料等行业。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一株植物乳杆菌，其特征在于：植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)SMB14，于2022年11月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物有中心，保藏编号为CGMCC NO.26150。
2.按权利要求1所述的植物乳杆菌，其特征在于：所述植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)SMB14培养于MRS培养基中，在30～40℃下培养保存。
3.一种权利要求1所述的植物乳杆菌的应用，其特征在于：所述菌株在富硒中的应用。
4.一种富硒菌剂，其特征在于：菌剂含权利要求1所述的菌株。
5.按权利要求1所述的富硒菌剂，其特征在于：所述菌剂含有该菌株的培养物、培养菌悬液或发酵液。
6.按权利要求5所述的富硒菌剂，其特征在于：所述菌剂中菌株SMB14培养OD600nm至0.8-1.2。
7.一种富硒方法，其特征在于：利用权利要求1所述菌株在含有亚硒盐中进行培养，进而实现富集硒。
8.按权利要求7所述的方法，其特征在于：将培养OD600nm
9.按权利要求7所述的方法，其特征在于：所述亚硒盐为亚硒酸钠。
...【技术特征摘要】
1.一株植物乳杆菌，其特征在于：植物乳杆菌(lactiplantibacillus plantarum)smb14，于2022年11月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物有中心，保藏编号为cgmcc no.26150。
2.按权利要求1所述的植物乳杆菌，其特征在于：所述植物乳杆菌(lactiplantibacillus plantarum)smb14培养于mrs培养基中，在30～40℃下培养保存。
3.一种权利要求1所述的植物乳杆菌的应用，其特征在于：所述菌株在富硒中的应用。
4.一种富硒菌剂，其特征在于：菌剂含权利要求1所述的菌株。
【专利技术属性】
技术研发人员：巩宗强，张志敏，贾春云，张晓蓉，
申请(专利权)人：中国科学院沈阳应用生态研究所，
类型：发明
国别省市：
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