【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于微生物生产，具体涉及一种适用于两歧双歧杆菌发酵培养的改良培养基及其发酵培养方法。
技术介绍
1、两歧双歧杆菌（ bifidobacterium bifidum），0.5～1.3 μm×1.5～8μm，常呈弯、棒状和分支状。单生、成对、v字排列，有时成链，细胞平行成栅栏状，或玫瑰花结状。偶尔呈膨大的球杆状。革兰氏阳性，通常染色不规则。不运动，不产芽孢，抗酸染色阴性，厌氧生长，少数几个种可在含10%co2的空气中生长。ph低于4.5和高于8.5时不生长，化能有机营养。发酵碳水化合物活跃，发酵产物主要是乙酸和乳酸，二者的摩尔比是3:2；不产生co2，不产生丁酸和丙酸。接触酶阴性。通常要求多种维生素。最适生长温度是37～41℃。两歧双歧杆菌具有以下治疗效果：（1）维护肠道正常细菌菌群平衡，抑制病原菌的生长，防止便秘，下痢和胃肠障碍等；（2）抗肿瘤；（3）在肠道内合成维生素、氨基酸和提高机体对钙离子的吸收；（4）降低血液中胆固醇水平，防治高血压；（5）改善乳制品的耐乳糖性，提高消化率；（6）增强人体免疫机能，预防抗生素的副作用，抗衰老，延年益寿。
2、现有技术中通常使用常规的培养基进行两歧双歧杆菌的发酵培养，然而常规的培养基在发酵两歧双歧杆菌终点时，生物量较低，产业上亟待提高。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是解决上述现有技术的不足，提供一种适用于两歧双歧杆菌发酵培养的改良培养基及其发酵培养方法。
2
3、一种适用于两歧双歧杆菌发酵培养的改良培养基，在常规培养基中做如下至少一种处理：
4、（1）有机氮源完全选用胰蛋白胨；
5、（2）添加无机氮源；
6、（3）添加抗氧化剂。
7、优选地，所述无机氮源为氨水、硝酸盐、铵盐，更优选氯化铵。
8、优选地，所述抗氧化剂为硫酸亚铁铵、抗坏血酸、二硫苏糖醇、茶多酚等。
9、优选地，所述胰蛋白胨的浓度为15-25g/l。
10、优选地，所述无机氮源的浓度为5-10g/l。
11、优选地，所述抗氧化剂的浓度为0.25-4g/l。
12、优选地，所述常规培养基为pyg（蛋白胨酵母葡萄糖）培养基、mrs（莫匹罗星锂盐改良）培养基、tpy（酪蛋白植物胨酵母）培养基、bbl（双歧杆菌）培养基、双歧杆菌bs培养基、或其他适用于培养双歧杆菌的培养基，所述培养基来源于商品化市售或者根据公开配方自行配制。
13、优选地，每升改良培养基包含以下成分：
14、胰蛋白胨15-25g，
15、葡萄糖10-20g，
16、l-半胱氨酸盐酸盐一水物0.55-1.1g，
17、七水硫酸镁0.2-0.4g，
18、吐温80 1-2g，
19、三水乙酸钠4-16g，
20、柠檬酸三铵1-4g，
21、三水磷酸氢二钾1.25-5g，
22、一水硫酸锰0.02-0.2g，
23、无机氮源5-10g，
24、抗氧化剂0.25-4g，
25、其余为纯化水。
26、利用上述适用于两歧双歧杆菌发酵培养的改良培养基的发酵培养方法，包括以下步骤：
27、s1、将两歧双歧杆菌接入一级种子培养基进行菌种活化；
28、s2、当od600达到1~3后，结束种子培养，镜检；
29、s3、将镜检无杂菌的种子培养液在无菌环境下倒入含有上述改良培养基的发酵装置中进行发酵。
30、优选地，步骤s1所述一级种子培养基每升的配方为：酵母粉10g、胰蛋白胨15g、葡萄糖20g、三水乙酸钠8g、柠檬酸三铵2g、吐温-80 1ml、三水磷酸氢二钾2.5g、七水硫酸镁0.4g、一水硫酸锰0.06g，其余为纯化水。
31、优选地，步骤s1所述两歧双歧杆菌的接种量为0.25-1%。
32、优选地，步骤s3所述的发酵参数为：温度35-42℃、ph6-8、搅拌转速50-80rpm。
33、本专利技术的有益效果在于：
34、本申请通过将氮源集中、添加抗氧化剂、添加无机氮源促进了两歧双歧杆菌的生长，有利于两歧双歧杆菌培养生物量的积累，为产业化生产研究打下坚实基础。其中将氮源集中降低了成本、简化了成分，且胰蛋白胨还含有生长因子、维生素等，双歧杆菌利用度好；添加无机氮降低了成本且成分确定；而抗氧化剂的添加可以与培养基中的氧气结合，使培养基保持无氧状态，更适合于厌氧的两歧双歧杆菌的生长。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种适用于两歧双歧杆菌发酵培养的改良培养基，其特征在于，在常规培养基中做如下至少一种处理：
2.根据权利要求1所述的适用于两歧双歧杆菌发酵培养的改良培养基，其特征在于：所述胰蛋白胨的浓度为15-25g/L。
3.根据权利要求1所述的适用于两歧双歧杆菌发酵培养的改良培养基，其特征在于：所述无机氮源的浓度为5-10g/L。
4.根据权利要求1所述的适用于两歧双歧杆菌发酵培养的改良培养基，其特征在于：所述抗氧化剂的浓度为0.25-4g/L。
5.根据权利要求1所述的适用于两歧双歧杆菌发酵培养的改良培养基，其特征在于：所述常规培养基为PYG培养基、MRS培养基、TPY培养基、BBL培养基、双歧杆菌BS培养基、或其他适用于培养双歧杆菌的培养基，所述培养基来源于商品化市售或者根据公开配方自行配制。
6.根据权利要求1所述的适用于两歧双歧杆菌发酵培养的改良培养基，其特征在于，每升改良培养基包含以下成分：
7.利用权利要求1-6任一项所述的适用于两歧双歧杆菌发酵培养的改良培养基的发酵培养方法，其特征在于，包括以下步骤：<...
【技术特征摘要】
1.一种适用于两歧双歧杆菌发酵培养的改良培养基，其特征在于，在常规培养基中做如下至少一种处理：
2.根据权利要求1所述的适用于两歧双歧杆菌发酵培养的改良培养基，其特征在于：所述胰蛋白胨的浓度为15-25g/l。
3.根据权利要求1所述的适用于两歧双歧杆菌发酵培养的改良培养基，其特征在于：所述无机氮源的浓度为5-10g/l。
4.根据权利要求1所述的适用于两歧双歧杆菌发酵培养的改良培养基，其特征在于：所述抗氧化剂的浓度为0.25-4g/l。
5.根据权利要求1所述的适用于两歧双歧杆菌发酵培养的改良培养基，其特征在于：所述常规培养基为pyg培养基、mrs培养基、tpy培养基、bbl培养基、双歧杆菌bs培养基、或其他适用于培养双歧杆菌的培养基，所述培养基来源于商品化市售或者根据公开配方自行配制。
6.根...
【专利技术属性】
技术研发人员：李浩，张宜胜，薛聪，
申请(专利权)人：合肥瀚微生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。