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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于微生物领域,涉及一种假单胞菌,特别是指一种假单胞菌、菌剂、林可霉素降解剂及其应用。
技术介绍
1、林可霉素是一种林可酰胺类抗生素,作用于敏感菌核糖体的50s亚基,阻止肽链的延长,从而抑制细菌细胞的蛋白质合成。林可霉素具有抗菌谱广、价格低、疗效稳定和供应充足等优点,因此作为兽药,被广泛应用于畜牧业。
2、林可霉素原料药主要是通过链霉菌发酵、萃取、纯化生产,生产过程中会产生大量废水。该废水主要包含:未被提取的林可霉素、蛋白质、残存的提取试剂和无机盐等。林可霉素分子结构稳定,传统的污水处理方法难以降解林可霉素且在环境中较难被生物降解,导致林可霉素在自然和人文环境中广泛存在。目前,已经在地表水、地下水和土壤等多种环境中检测到林可霉素残留。残留的林可霉素如果不妥善处理,会迫使环境中出现大量的耐药细菌和抗生素抗性基因,从而对人类和生态系统健康构成潜在风险。
3、目前,已有多种方式处理林可霉素生产废水,其中主要包含物理法、化学法和生物法。生物法处理抗生素残留设备简单、费用低廉且效果良好,被广泛应用于抗生素生产废水的处理。因此,国内外关于林可霉素降解菌的筛选和特性的研究日渐增多。已报道有半乳糖霉、梭状芽孢杆菌、苍术杆菌、束缚杆菌和枯草芽孢杆菌等多种微生物能够降解林可霉素。苍白杆菌1天内能够将20 mg/l的林可霉素降解、枯草芽孢杆菌在六天内能够降解92.9%的林可霉素,然而在处理实际工业废水中单菌株效果往往较差;公开号为cn 104962495 a的申请,公开了一种可降解林可霉素的小麦苍白杆菌,该小麦苍白杆
技术实现思路
1、为解决上述技术问题,本专利技术提出一种假单胞菌、菌剂、林可霉素降解剂及其应用。
2、本专利技术的技术方案是这样实现的:
3、本专利技术提供的假单胞菌 ( pseudomonassp.)lda12是从安徽某污水处理厂的好氧池里分离得到。
4、一株假单胞菌,所述假单胞菌的分类名pseudomonas sp.,于2023年10月16日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号为cctcc m 20231911,保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号。
5、上述假单胞菌为革兰氏阴性菌,能够以林可霉素为唯一碳源和氮源进行生长,并在40小时内完全降解初始浓度为20-1000 mg/l的林可霉素。
6、上述假单胞菌lda12菌株在平板上呈现圆形,颜色为白色,呈扁平状,表面湿润;中间有突起,菌落直径约0.3-2.5 mm。
7、上述假单胞菌能够在较宽的ph范围(4-11)和较广的环境温度(10-45℃)条件下,将初始浓度为100 mg/l的林可霉素完全降解。这对于该菌株在处理实际林可霉素生产废弃物和养殖废弃物中的实际应用提供了基础。
8、上述假单胞菌lda12能够在含高浓度的镉、铅、铜和锰(cd2+、pb2+、cu2+和 mn2+)离子以及在高盐环境中生长和发挥降解林可霉素的功能。这些特点使该菌株能够在伴随重金属污染和高盐的环境中处理林可霉素残留。
9、上述高浓度的上限为重金属盐的质量百分比为10%。
10、进一步地,该菌株在林可霉素降解过程中,不会产生有抗菌活性的代谢产物。
11、进一步地,上述林可霉素高效降解菌剂能够将实际林可霉素生产废水中的林可霉素完全降解。
12、上述的假单胞菌的培养方法,将假单胞菌接种于营养培养基中于30℃,200 rpm振荡培养6-8小时即可。
13、一种菌剂,包含上述的假单胞菌。
14、一种林可霉素降解剂,包含上述的假单胞菌;所述林可霉素降解剂为假单胞菌的菌悬液、含有假单胞菌的瓷珠或者假单胞菌的菌落。
15、上述假单胞菌的菌悬液的制备方法为:在营养肉汤培养基中接种林可霉素降解菌株单菌落于25-35℃,150-250 rpm振荡培养6-8小时,即获得林可霉素高效降解菌剂。
16、其中所述营养肉汤培养基的成分为:胰蛋白胨10 g/l,酵母浸粉5 g/l,氯化钠10g/l,溶剂为超纯水。
17、上述的假单胞菌、菌剂或林可霉素降解剂在完全降解废水、土壤或粪肥中的林可霉素中的应用。
18、进一步的,上述废水、土壤或粪肥中假单胞菌的浓度为20-1000 mg/l。
19、上述假单胞菌、菌剂或林可霉素降解剂的使用ph为4-11、温度为10-45℃。
20、本专利技术具有以下有益效果:
21、1、本专利技术筛选得到的假单胞菌lda12能够完全降解林可霉素,120小时内能够将初始浓度为20~1000 mg/l的林可霉素完全降解。该菌株具有良好的抗逆性能够适应实际生产废水,具有很好的实际应用价值。
22、2、假单胞菌lda12菌剂具有较好的抗逆性能够完全降解林可霉素生产污水中的林可霉素,代谢产物无抗菌活性。该菌剂在降解效率、抗逆性和代谢产物毒性方面均具有明显的优势,对环境保护和水资源循环利用具有重要意义。
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1. 一株假单胞菌,其特征在于:所述假单胞菌的分类名Pseudomonas sp.,于2023年10月16日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC M 20231911,保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号。
2. 根据权利要求1所述的假单胞菌,其特征在于:所述在平板上呈圆形,颜色为白色,呈扁平状,表面湿润,中间有突起,菌落直径约0.3-2.5 mm。
3.根据权利要求2所述的假单胞菌,其特征在于:所述假单胞菌具有耐高浓度重金属的特征。
4.根据权利要求3所述的假单胞菌,其特征在于:所述重金属为镉、铅、铜和锰中的一种或多种;高浓度的上限为重金属盐的质量百分比=10%。
5. 权利要求1-4任一项所述的假单胞菌的培养方法,其特征在于:将假单胞菌的单克隆菌落接种于营养培养基中于25-35℃,150-250 rpm振荡培养6-8小时即可。
6.一种菌剂,其特征在于:包含权利要求1-3任一项所述的假单胞菌。
7.一种林可霉素降解剂,其特征在于:包含权利要求1-3任一项所述的假单胞菌。
8.
9. 根据权利要求8所述的应用,其特征在于:所述废水、土壤或粪肥中假单胞菌的浓度为20-1000 mg/L。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于:所述假单胞菌、菌剂或林可霉素降解剂的使用pH为4-11、温度为10-45℃。
...【技术特征摘要】
1. 一株假单胞菌,其特征在于:所述假单胞菌的分类名pseudomonas sp.,于2023年10月16日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号为cctcc m 20231911,保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号。
2. 根据权利要求1所述的假单胞菌,其特征在于:所述在平板上呈圆形,颜色为白色,呈扁平状,表面湿润,中间有突起,菌落直径约0.3-2.5 mm。
3.根据权利要求2所述的假单胞菌,其特征在于:所述假单胞菌具有耐高浓度重金属的特征。
4.根据权利要求3所述的假单胞菌,其特征在于:所述重金属为镉、铅、铜和锰中的一种或多种;高浓度的上限为重金属盐的质量百分比=10%。
5. 权利要求1-4任一项所述的假单胞菌的培养方法,其...
【专利技术属性】
技术研发人员:魏勇军,赵鑫波,唐进峰,张晓玲,梁家伟,朱卫星,戢博阳,高健,
申请(专利权)人:郑州大学,
类型:发明
国别省市:
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