【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于致密结缔组织的加工，具体涉及一种硫酸软骨素钠、弹性蛋白肽和胶原蛋白肽的提取工艺。
技术介绍
1、牛筋包括牛蹄筋、牛板筋、牛韧带等，是致密结缔组织，主要由水、胶原纤维、弹性纤维、成纤维细胞、基质构成，新鲜牛筋含水量70％以上，不同部位的牛筋弹性纤维含量差别较大，按干基占比算，牛板筋约20％～30％，牛蹄筋只有1％～3％，含硫酸软骨素的蛋白多糖占比只有1％～5％，铜、锰、钙等离子约占0.2％，胶原纤维约70％～90％，主要是ⅰ型胶原蛋白。来源硫酸软骨素钠生产一般选择软骨素含量较高的肋软骨、鼻骨软骨、肩胛软骨、气管软骨等。
2、硫酸软骨素(简称cs)是一种酸性黏多糖，广泛存在于牛骨、猪骨、鸡骨、鲨鱼骨、鱿鱼骨中，属于糖胺聚糖的一种，是一种天然来源的生物大分子，在组织中多为由多糖链与蛋白质组成蛋白聚糖，结合方式为通过一个糖链与核心蛋白共价结合。硫酸软骨素钠由50～70个双糖单元组成，其双糖单元是由葡糖醛酸和n-乙酰半乳糖胺通过β(1-3)糖苷键形成，双糖再以β(1-4)糖苷键连接聚合成大分子，部分n-乙酰半乳糖胺的c-6或c-4位硫酸化，通过硫酸基或羟酸基与钠离子结合。硫酸软骨素钠具有降血脂、抗凝血、抗炎症及抗肿瘤等生理功能。临床上主要作为骨关节炎、高血脂、心绞痛、动脉粥样硬化等疾病的治疗，其滴眼液具有治疗角膜损伤、角膜溃疡或角膜炎；在食品上硫酸软骨素钠被美国fda归类为膳食补充剂，澳大利亚将其作为改善或预防关节病的营养保健品。目前，硫酸软骨素钠工业生产均采用酶解法从动物软骨中提取，主要包括去杂、清洗、煮料、酶
3、胶原蛋白是哺乳动物体内含量最多动物蛋白，主要存在于骨、腱、韧带、皮肤等组织中，是结缔组织中一种重要的结构蛋白。胶原蛋白由三条肽链组成，三条肽链以特有方式构成复合螺旋，变性后才能被蛋白酶水解。胶原蛋白肽是牛骨的水解产物，富含羟脯氨酸，由2个以上氨基酸构成，可用于食品、保健食品、化妆品、生物材料、微生物培养基、高端饲料等多个领域。分子量较少的易吸收，胶原蛋白肽国家食品标准要求相对分子质量10000以下的大于90％。
4、弹性蛋白是弹性纤维的主要成分。弹性纤维主要存在于韧带和脉管壁，在肌腱和皮肤中也有少量存在。弹性纤维与胶原纤维共同存在，赋予组织以弹性和抗张能力。提取的弹性蛋白肽中锁链素和异锁链素作为特征成分。特别强调的是，小分子的弹性蛋白肽更容易吸收，行业要求相对分子质量5000以下的大于80％。
5、现有技术中，牛筋的提取工艺中面临牛筋干燥后复水性差、时间长、易酸败、效率低等问题，牛筋直接提取弹性蛋白肽牛脂去除不够影响气味，产品中其他异味物质的去除不足也影响气味，生色物质糖、血色素、脂肪酸的去除不足会影响颜色。现有企业备案标准弹性蛋白肽和胶原蛋白肽检测指标相似，难以评价品种的纯度，有研究表明锁链素和异锁链素是弹性蛋白肽的特征成分，以此作为弹性蛋白肽的纯度标准，使用牛筋等含有胶原蛋白又含弹性蛋白的致密结缔组织提取出高纯度弹性蛋白肽的工艺有待研究。
技术实现思路
1、本专利技术克服现有技术中无法同时在牛筋中提取硫酸软骨素钠、弹性蛋白肽和胶原蛋白肽的技术问题，而且解决现有技术中对牛筋中弹性蛋白肽提取纯度较低、综合效益低、污染较大的问题，促进产业绿色节能稳步发展和规模持续扩大。本专利技术的目的在于提供一种硫酸软骨素钠、弹性蛋白肽和胶原蛋白肽的提取工艺，该工艺改造成本低，原料利用率高，综合效益好，绿色环保；产品质量达到国标，超过行标，如弹性蛋白肽中的锁链素含量高，肽的分子量较低。
2、本专利技术提供一种硫酸软骨素钠、弹性蛋白肽和胶原蛋白肽的提取工艺，其包括以下步骤：
3、s1.对牛筋进行前处理；
4、s2.将牛筋进行亚临界萃取脱脂；
5、s3.碱水浸取，固液分离，得到滤渣和碱水提取液；
6、s3.1.收集步骤s3的滤渣，将滤渣蒸煮、复合蛋白酶酶解、调节ph、静置、过滤，得到滤液；
7、s3.2.将滤液分别经过强酸型阳离子交换树脂、强碱型阴离子交换树脂、弱碱型大孔树脂，收集流出液；
8、s3.3.流出液再经精密过滤、纳滤、双效浓缩、灭菌、喷雾干燥即可得到弹性蛋白肽；
9、s4.收集s3中固液分离后的碱水提取液；
10、s4.1.碱水提取液经复合蛋白酶酶解、压滤、过阳离子交换树脂、过阴离子交换树脂、弱碱型大孔树脂后收集流出液；
11、s4.2.流出液再经精密过滤、纳滤、双效浓缩、灭菌、喷雾干燥后得到胶原蛋白肽；
12、s5.将步骤s4.1中阴离子交换树脂上的吸附物洗脱出来得到洗脱液；
13、s5.1.将洗脱液经精密过滤、超滤、醇沉、脱水、干燥得到硫酸软骨素钠。
14、本专利技术中，所述牛筋的种类包括牛蹄筋、牛板筋、牛韧带。
15、s1中，所述前处理的操作为将新鲜牛筋去杂、水洗、泡酸水、冷冻切片、清洗、滤干、酒精脱水、真空干燥；其中，针对牛筋韧性大且湿滑不易加工的特性，特增加前处理的步骤；冻溶法可以通过控制冷冻速率来影响动物组织中冰晶的大小，从而刺破组织细胞；冷冻切片，切横薄片，特别适用于肌肉、筋、韧带等新鲜动物组织的机械切片；这两种方法可以提高去除血红素、核酸、糖、乳酸等杂质的效率。
16、进一步s1中，所述酸水为ph值为1的盐酸水或醋酸水溶液较佳的为ph值为1的醋酸水溶液；其中，泡酸水可固定牛筋组织中的蛋白质。
17、进一步s1中，所述酸水的添加量为牛筋1～2倍质量。
18、进一步s1中，所述泡酸水的时间为20～30h。
19、进一步s1中，所述泡酸水后还需使用反渗透水浸洗2～3次，再用0.5倍牛筋质量的水顺筋纤维方向冷冻固定；所述反渗透水的添加量为牛筋2～3倍质量。
20、进一步s1中，所述切片为将牛筋切成0.5～1.0mm厚的薄片。
21、进一步s1中，所述清洗为在10℃以下使用反渗透水洗，洗三次。
22、进一步s1中，所述酒精为浓度为95％的酒精。
23、进一步s1中，所述酒精脱水的次数为2～4次，较佳地为3次；其中，酒精可使动物组织蛋白变性和脱水，有效避免了干燥过程中切片粘连成块降低干燥效率及影响后期的破碎，还可以去除部分亲水性稍低的异味成分。
24、进一步s1中，所述真空干燥的温度为40～60℃，较佳的为50～60℃。
25、进一步s1中，所述真空干燥采用乙醇回收设备。
26、进一步s1中，所述粉碎的操作为粉碎至颗粒状或纤维状。
27、s2中，所述亚临界萃取采用的溶剂为油脂提取常规使用的溶剂，较佳的为复合萃取剂，更佳的为非极性溶剂，例如丁烷；所述亚临界萃取采用的溶剂中还可以添加乙醇。
28、s2中，亚临界萃取采用的温度为本领域常规温度；其中亚临界萃取是常用的高效油脂提取工艺，牛筋异味去除效果好本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种硫酸软骨素钠、弹性蛋白肽和胶原蛋白肽的提取工艺，其特征在于，其包括以下步骤：
2.如权利要求1所述的硫酸软骨素钠、弹性蛋白肽和胶原蛋白肽的提取工艺，其特征在于，所述牛筋的种类包括牛蹄筋、牛板筋、牛韧带。
3.如权利要求1所述的硫酸软骨素钠、弹性蛋白肽和胶原蛋白肽的提取工艺，其特征在于，S1中，所述前处理的操作为将新鲜牛筋去杂、水洗、泡酸水、冷冻切片、清洗、滤干、酒精脱水、真空干燥、粉碎；
4.如权利要求3所述的硫酸软骨素钠、弹性蛋白肽和胶原蛋白肽的提取工艺，其特征在于，S1中，所述酸水为pH值为1的盐酸水或醋酸水溶液；
5.如权利要求1所述的硫酸软骨素钠、弹性蛋白肽和胶原蛋白肽的提取工艺，其特征在于，S3中，所述碱水为pH＝9的氢氧化钠水溶液；
6.如权利要求1所述的硫酸软骨素钠、弹性蛋白肽和胶原蛋白肽的提取工艺，其特征在于，S3.1中，所述蒸煮的加热温度为120℃；
7.如权利要求1所述的硫酸软骨素钠、弹性蛋白肽和胶原蛋白肽的提取工艺，其特征在于，S3.1中所述过滤使用的助滤剂为中细比3/1硅藻土；
8.如权利要求1所述的硫酸软骨素钠、弹性蛋白肽和胶原蛋白肽的提取工艺，其特征在于，S3.3、S4.2和S5.1中，所述精密过滤的孔径为5μm；
9.如权利要求1所述的硫酸软骨素钠、弹性蛋白肽和胶原蛋白肽的提取工艺，其特征在于，S4.1中，所述酶解在pH为7～9、温度为50～60℃条件下酶解5～8h。
10.如权利要求1所述的硫酸软骨素钠、弹性蛋白肽和胶原蛋白肽的提取工艺，其特征在于，S5中，所述洗脱使用的洗脱液为10％氯化钠水溶液；
...【技术特征摘要】
1.一种硫酸软骨素钠、弹性蛋白肽和胶原蛋白肽的提取工艺，其特征在于，其包括以下步骤：
2.如权利要求1所述的硫酸软骨素钠、弹性蛋白肽和胶原蛋白肽的提取工艺，其特征在于，所述牛筋的种类包括牛蹄筋、牛板筋、牛韧带。
3.如权利要求1所述的硫酸软骨素钠、弹性蛋白肽和胶原蛋白肽的提取工艺，其特征在于，s1中，所述前处理的操作为将新鲜牛筋去杂、水洗、泡酸水、冷冻切片、清洗、滤干、酒精脱水、真空干燥、粉碎；
4.如权利要求3所述的硫酸软骨素钠、弹性蛋白肽和胶原蛋白肽的提取工艺，其特征在于，s1中，所述酸水为ph值为1的盐酸水或醋酸水溶液；
5.如权利要求1所述的硫酸软骨素钠、弹性蛋白肽和胶原蛋白肽的提取工艺，其特征在于，s3中，所述碱水为ph＝9的氢氧化钠水溶液；
6.如权利要...
【专利技术属性】
技术研发人员：邹高远，谭岸，谭子金，朱小丰，谭金茂，李爱斌，
申请(专利权)人：湖南伍星生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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