【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及免疫层析诊断领域，具体涉及一种乙型流感病毒的检测试剂盒及其用途。
技术介绍
1、流行性感冒，通常称为“流感”，是由流感病毒引起的急性呼吸道传染病，具有很强的传染性，主要通过咳嗽和打喷嚏传播，一般春季和冬季爆发。流行性感冒病毒(influenzavirus)属于正黏病毒科的流感病毒属，依据内部核蛋白与基质蛋白的抗原性差异，可被分为甲、乙、丙三型(即a、b、c三型)。流感是一种主要由呼吸道传播、人群普遍易感的病毒，以发热、肌肉酸痛和鼻塞流涕等症状为主要临床表现。流感病毒的传染性强、传播快、潜伏期短、发病率高。甲型和乙型流感病毒是人群中主要的流行病毒。乙型流感病毒没有亚型的区分，只是根据抗原性的差异分为yamagata系(by)和victoria(bv)两个系。乙型流感病毒每年在全球多在局部暴发，呈季节性、地区性流行。
2、目前，实验室诊断金标准方法是病毒分离培养法，细胞培养鉴定周期是14天，严重影响临床中对病人及时用药指导，该法在临床应用中受到限制。反转录-聚合酶链式反应(pt-pcr)与细胞培养法比较，灵敏度较高，但由于pt-pcr法耗费昂贵，需要6小时，仅在专业实验室进行，故现场应用受到限制。目前，在疫病快速诊断检测领域，胶体金免疫层析技术具有快速、便捷、检测效果直观和不需要检测仪器等优势，应用在流感病毒检测的一线。但是目前的流感病毒检测试纸仍然存在灵敏度低、特异性差的缺陷。
技术实现思路
1、因此，本专利技术要解决的技术问题在于克服现有技术中的流感病毒检
2、为此，本专利技术提供了如下的技术方案：
3、一种乙型流感病毒检测试剂盒，包括乙型流感病毒裂解液和试纸条；
4、所述试纸条为包括底板和在所述底板上依次重叠搭接的样品垫、胶体金吸附垫、抗体承载膜和吸水垫：所述的抗体承载膜上设置有相间隔的检测线t和质控线c，所述检测线t靠近所述胶体金吸附垫，所述质控线c靠近所述吸水垫；
5、胶体金吸附垫上包被有胶体金标记的乙型流感病毒单克隆抗体和与乙型流感病毒无关的动物单抗；
6、所述检测线t包被乙型流感病毒单克隆抗体；所述质控线上包被与所述动物单抗结合的动物多抗；
7、所述乙型流感病毒裂解液，包括：tris-hcl为1.8-2.2mol/l，sds为质量百分比0.9％-1.1％，pvp为质量百分比0.5％-0.8％，edta-二钠质量百分比为0.02％-0.03％，ph8.0-9.0。
8、可选的，所述裂解液包括tris-hcl为2mol/l，sds为质量百分比1％，pvp质量百分比0.5％，edta-二钠质量百分比为0.02％。
9、可选的，所述检测线t包被乙型流感病毒单克隆抗体为鼠抗乙型流感单抗4a9hb；鼠抗乙型流感单抗4a9hb所针对的乙型流感病毒的抗原表位如seq id no.1所示；
10、所述胶体金标记的乙型流感病毒单克隆抗体为鼠抗乙型流感单抗8d5mb；鼠抗乙型流感单抗8d5mb所针对的乙型流感病毒的抗原表位如seq id no.2所示。
11、可选的，所述检测线t包被乙型流感病毒单克隆抗体的包被浓度为0.8～1.2mg/ml；
12、和/或，所述胶体金标记的乙型流感病毒单克隆抗体中，乙型流感病毒单克隆抗体的标记浓度为8～10μg/ml。
13、可选的，所述质控线c包被抗鼠igg多抗；
14、可选的，所述质控线c包被抗鼠igg多抗的包被浓度为1.5～2.0mg/ml。
15、可选的，胶体金吸附垫上包被的胶体金标记的与乙型流感病毒无关的动物单抗为胶体金标记的鼠igg抗体；
16、可选的，胶体金标记的鼠igg抗体中，鼠igg抗体的标记浓度为3～6μg/ml。
17、可选的，所述抗体承载膜为硝酸纤维素膜。
18、可选的，所述试纸条的制备方法包括：样品垫、胶体金吸附垫、抗体承载膜和吸水垫的制备；
19、抗体承载膜的制备：将用于包被检测线t的乙型流感病毒单克隆抗体稀释至0.8～1.2mg/ml，进行划膜；将用于包被质控线c的抗鼠igg抗体稀释至1.5～2.0mg/ml，进行划膜；
20、胶体金吸附垫的制备：将胶体金标记的乙型流感病毒单克隆抗体溶液喷涂在胶体金吸附垫上，乙型流感病毒单克隆抗体标记的浓度为8～10μg/ml；将胶体金标记的鼠igg抗体溶液喷涂在胶体金吸附垫上，鼠igg抗体标记的浓度为3～6μg/ml。
21、一种所述的乙型流感病毒检测试剂盒在制备检测乙型流感病毒的产品中的用途；
22、可选的，待测样品包括鼻腔分泌物和咽喉分泌物；
23、和/或，所述乙型流感病毒包括b/victoria乙型流感病毒和b/yamagata乙型流感病毒。
24、本专利技术技术方案，具有如下优点：
25、1.本专利技术提供的一种乙型流感病毒检测试剂盒，包括：乙型流感病毒的裂解液和试纸条，所述试纸条为包括底板和在所述底板上依次重叠搭接的样品垫、胶体金吸附垫、抗体承载膜和吸水垫：所述的抗体承载膜上设置有相间隔的检测线t和质控线c，所述检测线t靠近所述胶体金吸附垫，所述质控线c靠近所述吸水垫；所述检测线t包被乙型流感病毒单克隆抗体；胶体金吸附垫上包被有胶体金标记的乙型流感病毒单克隆抗体；乙型流感病毒的裂解液包括：1.8-2.2mol/l tris-hcl(ph 9.0)，质量百分比为0.9％-1.1％ sds，质量百分比为0.5％-0.8％ pvp，质量百分比为0.02％-0.03％edta-二钠，ph8.0-9.0；本专利技术在研究中发现，已有的样品处理液在处理不同来源的样品时不能充分裂解样品，导致乙型流感病毒检测的灵敏度和特异性差，为此，本专利技术提供了一种乙型流感病毒的裂解液，所述裂解液可以对不同来源且目前的流行的乙流病毒毒株的样品进行充分裂解，将病毒乙型流感病毒蛋白抗原充分暴露出来，同时配合双抗体夹心法原理及免疫层析金标记技术检测样本中乙型(a型)流感病毒，具有高灵敏度和特异性。
26、进一步的，所述试纸条的检测原理为：在胶体金吸附垫上预包被金标记小鼠抗-乙型流感单抗和鼠单抗，在抗体承载膜的检测线和质控线处分别包被重组鼠源抗-乙型流感抗体和动物多抗(如抗鼠igg抗体)。测定时，将处理后的待测样品滴入试纸加样区内，然后混合物在毛细效应下向上层析。当样本中含乙型流感病毒抗原时，乙流抗原首先和胶体金标记的小鼠抗-乙型流感单抗结合，形成"乙流抗原﹣乙流抗体﹣胶体金"复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线时与预包被的重组鼠源抗-乙型流感抗体结合形成胶体金标记的双抗体夹心复合物，从而在检测线处显示紫红色条带。如是阴性，则测试区内将没有红色条带。
27、2.本专利技术提供的一种乙型流感病毒检测试剂盒，所述检测线t包被乙型流感病毒单克隆抗体为鼠抗本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种乙型流感病毒检测试剂盒，其特征在于，包括乙型流感病毒裂解液和试纸条；
2.根据权利要求1所述的乙型流感病毒检测试剂盒，其特征在于，所述裂解液包括Tris-HCl为2mol/L，SDS为质量百分比1％，PVP质量百分比0.5％，EDTA-二钠质量百分比为0.02％。
3.根据权利要求1或2所述的乙型流感病毒检测试剂盒，其特征在于，
4.根据权利要求1-3任一项所述的乙型流感病毒检测试剂盒，其特征在于，所述检测线T包被乙型流感病毒单克隆抗体的包被浓度为0.8～1.2mg/ml；
5.根据权利要求1-4任一项所述的乙型流感病毒检测试剂盒，其特征在于，所述质控线C包被抗鼠IgG多抗；
6.根据权利要求1-5任一项所述的乙型流感病毒检测试剂盒，其特征在于，胶体金吸附垫上包被的胶体金标记的与乙型流感病毒无关的动物单抗为胶体金标记的鼠IgG抗体；
7.根据权利要求1-6任一项所述的乙型流感病毒检测试剂盒，其特征在于，所述抗体承载膜为硝酸纤维素膜。
8.根据权利要求1-7任一项所述的乙型流感病毒检测试剂盒
9.一种如权利要求1-8任一项所述的乙型流感病毒检测试剂盒在制备检测乙型流感病毒的产品中的用途。
10.根据权利要求9所述的用途，其特征在于，待测样品包括鼻腔分泌物和咽喉分泌物；
...【技术特征摘要】
1.一种乙型流感病毒检测试剂盒，其特征在于，包括乙型流感病毒裂解液和试纸条；
2.根据权利要求1所述的乙型流感病毒检测试剂盒，其特征在于，所述裂解液包括tris-hcl为2mol/l，sds为质量百分比1％，pvp质量百分比0.5％，edta-二钠质量百分比为0.02％。
3.根据权利要求1或2所述的乙型流感病毒检测试剂盒，其特征在于，
4.根据权利要求1-3任一项所述的乙型流感病毒检测试剂盒，其特征在于，所述检测线t包被乙型流感病毒单克隆抗体的包被浓度为0.8～1.2mg/ml；
5.根据权利要求1-4任一项所述的乙型流感病毒检测试剂盒，其特征在于，所述质控线c包被抗鼠igg多抗；
【专利技术属性】
技术研发人员：张逸寒，顾飞，欧卫军，黄海亮，褚晖，
申请(专利权)人：南通伊仕生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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