【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医学，涉及一种脂质体纳米诱饵、含有其的免疫细胞机器人及应用。
技术介绍
1、目前免疫疗法已成为肿瘤治疗最有希望的途径之一，其通过激活宿主免疫功能来抑制肿瘤生长和转移，同时具有免疫特异性和免疫记忆性，尤其是活细胞能够以常规药物所不能做到的方式动态执行复杂的生物功能，但在实体瘤肿瘤中，免疫抑制环境和肿瘤间质纤维化等问题，导致免疫细胞浸润有限，尤其是在肿瘤微环境中，巨噬细胞不同的激活状态将导致肿瘤朝不同方向发展。m1型巨噬细胞分泌tnf-α、il-1β和il-12等细胞因子参与炎症反应，并通过分泌趋化因子cxcl9和cxcl10招募th1细胞到炎症部位。同时，m1型巨噬细胞可上调参与抗原加工和呈递的基因以及共刺激分子，以增强t细胞应答。而存在于肿瘤微环境中的肿瘤相关巨噬细胞往往被诱导为m2型巨噬细胞，其通过分泌活性氧、上调免疫抑制表面蛋白、产生抑制t细胞功能的细胞因子和分泌招募treg细胞的趋化因子，从而抑制内源性抗肿瘤免疫，促进肿瘤增殖转移。
2、近年来，依赖于巨噬细胞在肿瘤抑制方面的功能，研究者通过将小鼠体内巨噬细胞提取改造后，再重新输入体内，例如利用ifn-γ在体外“教育”巨噬细胞以诱导m1表型，从而具有炎症靶向功能，可主动迁移至肿瘤组织；以及通过病毒转染等基因工程方式打造car-巨噬细胞，进一步提高巨噬细胞对肿瘤的靶向和杀伤能力。巨噬细胞在调节免疫应答方面的独特功能，使其在肿瘤治疗中表现出巨大的应用前景。因此，以巨噬细胞为基础的癌症治疗，简单来说，关键之处即为如何减少抗炎巨噬细胞和增加促炎巨噬细胞
3、现有技术中，将体内巨噬细胞提取、载药并回输，需要对提取的巨噬细胞进行体外扩增、药物负载、细胞分选等步骤，其制备工艺复杂，导致生产周期长，价格昂贵等问题。此外，免疫细胞疗法虽然在血液瘤中取得良好的治疗效果，但在实体瘤中面临苛刻的物理屏障和免疫抑制微环境等问题，导致只有部分实体瘤患者对这种疗法有效，其临床结果和预后不良。随着细胞微纳机器人技术的发展，细胞微纳机器人因运动特性，可主动穿透生理屏障，规避障碍。同时，目前已经提出了细胞微纳机器人的各种非接触式操作，如利用光驱动、磁力驱动或声力驱动等，这些非接触式操控为细胞疗法的靶向递送提供了巨大的希望。将细胞微型机器人靶向功能与局部生物效应相结合可开辟一项新的治疗技术，从而提高免疫细胞在肿瘤部位富集程度，并减少毒副作用。如cn117018210a公开了一种游动细胞机器人及其制备方法，步骤一、采用脱溶法联合共挤出法制备大肠杆菌外膜伪装的载药纳米凝胶颗粒；步骤二、对步骤一的载药纳米凝胶颗粒进行双酶修饰，得到载药双酶驱动纳米机器人；步骤三、将中性粒细胞与步骤二的载药双酶驱动纳米机器人共培养，诱导中性粒细胞吞噬纳米颗粒，制备得到游动细胞机器人；其中，双酶为葡萄糖氧化酶和过氧化氢酶。
4、然而，目前关于细胞机器人的报道十分有限，如何利用原位工程化技术构造细胞微型机器人并靶向肿瘤，解除免疫抑制微环境，抑制肿瘤生长仍是亟待解决的难题之一。
技术实现思路
1、针对现有技术的不足和实际需求，本专利技术提供一种脂质体纳米诱饵、含有其的免疫细胞机器人及应用，设计能够有效靶向免疫细胞以及易被吞噬的脂质体纳米诱饵，可应用于高效制备免疫细胞机器人，尤其涉及活体原位自组装的免疫细胞机器人。
2、为达上述目的，本专利技术采用以下技术方案：
3、第一方面，本专利技术提供一种脂质体纳米诱饵，所述脂质体纳米诱饵包括：脂质体和铁磁性材料，所述铁磁性材料被包裹于脂质体内，所述脂质体外表面修饰有免疫细胞吞噬信号分子和靶向免疫细胞抗体。
4、本专利技术中，设计一种脂质体纳米诱饵，纳米诱饵核心为铁磁性材料，外层脂质体膜由靶向免疫细胞(如巨噬细胞等)抗体和诱导特异性吞噬的信号分子所修饰，能够靶向免疫细胞并诱导特异性吞噬，从而与免疫细胞组装成细胞微型机器人，尤其能够实现体内原位自组装。
5、可以理解，本领域中用于负载和递送的脂质体均适用于本专利技术。
6、优选地，所述脂质体的制备原料可包括磷脂酰丝氨酸、1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱、胆固醇和dspe-peg3400-nhs；优选地，质量比为(5～15):(50～60):30:5。
7、优选地，所述铁磁性材料包括磁性氧化铁纳米粒。
8、优选地，所述磁性氧化铁纳米粒包括油酸修饰的四氧化三铁、聚乙烯亚胺修饰的四氧化三铁、氨基化四氧化三铁、羧基化四氧化三铁或羟基化四氧化三铁等各类强磁性四氧化三铁中任意一种或至少两种的组合。
9、优选地，所述免疫细胞吞噬信号分子包括磷脂酰丝氨酸、肽聚糖、脂多糖、甘露糖或β-葡聚糖中任意一种或至少两种的组合。
10、优选地，所述靶向免疫细胞抗体包括anti-cd11b抗体、anti-cd68抗体、anti-cd14抗体、anti-f4/80抗体、anti-cd16抗体、anti-cd18抗体、anti-cd32抗体或anti-cd11c抗体等识别免疫细胞表面特异靶点的抗体中任意一种或至少两种的组合。
11、本专利技术中，可针对多种免疫细胞进行设计，例如针对巨噬细胞，所述脂质体纳米诱饵靶向巨噬细胞并诱导特异性吞噬，从而与巨噬细胞组装成细胞微型机器人，巨噬细胞受铁离子刺激转变为m1型巨噬细胞。最后，在磁场作用下，实现巨噬细胞精准靶向肿瘤，促进巨噬细胞在肿瘤组织中的浸润，提高肿瘤中m1/m2相对比，激活cd8+t细胞，抑制treg细胞，从而解除肿瘤免疫抑制，增强肿瘤免疫疗效。
12、第二方面，本专利技术提供第一方面所述的脂质体纳米诱饵的制备方法，所述制备方法包括：
13、将脂质体的制备原料、免疫细胞吞噬信号分子、铁磁性材料和溶剂混合，超声处理，随后除去溶剂，得到脂质体包裹的颗粒，将所述脂质体包裹的颗粒与靶向免疫细胞抗体混合，得到所述脂质体纳米诱饵。
14、优选地，所述脂质体纳米诱饵的制备方法具体包括以下步骤：
15、(1)纳米诱饵的制备，将脂质体的制备原料、免疫细胞吞噬信号分子、铁磁性材料和溶剂混合，通过超声充分混合，再除去有机溶剂，使脂质体包裹铁磁性材料，再利用超声进行水合及分散，得到脂质体包裹的颗粒；
16、(2)纯化纳米诱饵，利用磁珠分选器吸附脂质体包裹的颗粒，除去杂质，重复操作，得到纯化的颗粒；
17、(3)将纯化的颗粒与靶向免疫细胞抗体共孵育，得到所述脂质体纳米诱饵。
18、第三方面，本专利技术提供第一方面所述的脂质体纳米诱饵在制备免疫细胞机器人中的应用。
19、第四方面，本专利技术提供一种免疫细胞机器人的制备方法，所述制备方法包括：
20、将第一方面所述的脂质体纳米诱饵与免疫细胞混合，诱导免疫细胞吞噬脂质体纳米诱饵，得到所述免疫细胞机器人；所述免疫细胞包括巨噬细胞、中性粒细胞或树突状细胞中任意一种或至少两种的组合。
21、第五方面，本专利技术提供一种体内原位自组装免疫细胞机器人的制备本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种脂质体纳米诱饵，其特征在于，所述脂质体纳米诱饵包括：脂质体和铁磁性材料，所述铁磁性材料被包裹于脂质体内，所述脂质体外表面修饰有免疫细胞吞噬信号分子和靶向免疫细胞抗体。
2.根据权利要求1所述的脂质体纳米诱饵，其特征在于，所述脂质体的制备原料包括磷脂酰丝氨酸、1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱、胆固醇和DSPE-PEG3400-NHS；
3.权利要求1或2所述的脂质体纳米诱饵的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：
4.权利要求1或2所述的脂质体纳米诱饵在制备免疫细胞机器人中的应用。
5.一种免疫细胞机器人的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：
6.一种体内原位自组装免疫细胞机器人的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：
7.一种免疫细胞机器人，其特征在于，所述免疫细胞机器人包括含有权利要求1或2所述的脂质体纳米诱饵的免疫细胞；
8.一种免疫细胞机器人系统，其特征在于，所述免疫细胞机器人系统包括权利要求7所述的免疫细胞机器人和控制单元；
9.一种操控免疫细胞机器人
10.权利要求1或2所述的脂质体纳米诱饵、权利要求7所述的免疫细胞机器人或权利要求8所述的免疫细胞机器人系统在制备靶向和/或治疗肿瘤的产品中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种脂质体纳米诱饵，其特征在于，所述脂质体纳米诱饵包括：脂质体和铁磁性材料，所述铁磁性材料被包裹于脂质体内，所述脂质体外表面修饰有免疫细胞吞噬信号分子和靶向免疫细胞抗体。
2.根据权利要求1所述的脂质体纳米诱饵，其特征在于，所述脂质体的制备原料包括磷脂酰丝氨酸、1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱、胆固醇和dspe-peg3400-nhs；
3.权利要求1或2所述的脂质体纳米诱饵的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：
4.权利要求1或2所述的脂质体纳米诱饵在制备免疫细胞机器人中的应用。
5.一种免疫细胞机器人的制备方法，其特征在...
【专利技术属性】
技术研发人员：蔡林涛，潘宏，龚含，廖健洪，唐忠亮，黄国俊，邓冠军，
申请(专利权)人：中国科学院深圳先进技术研究院，
类型：发明
国别省市：
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