一种重组人源弹性蛋白的制备与应用制造技术

技术编号:41177882 阅读:96 留言:0更新日期:2024-05-07 22:13
本发明专利技术公开了一种重组人源弹性蛋白的制备与应用,目的在于通过调节序列的组成,将弹性蛋白的核心片段进行合理组合,去除非必要或者一些对结构具有较大影响的结构域,通过合理优化,得到纯度较高,产量较好的重组人弹性蛋白,具有溶解度高,稳定性好的优势,重组表达的人弹性蛋白在细胞增殖方面仍保留高效的生物学活性,在化妆品,医疗器械等方面具有较好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种重组人源弹性蛋白的制备与应用,属于基因工程。


技术介绍

1、弹性蛋白(elastin),一种细胞外基质的组成蛋白,广泛存在于多种细胞中。在生物体内的含量仅次于胶原蛋白,在组织伸缩运动、抗外力形变等方面发挥着不可替代的作用,最大的特点即赋予组织弹性。在不同的组织中,弹性蛋白的含量也有差异,例如在承受骨骼间运动负荷的韧带中,弹性蛋白含量最高(80%),主动脉中弹性蛋白占干重的30%-50%、肺中的含量为10%-25%、皮肤中为3%。弹性蛋白原(tropoelastin)交联形成大分子网状结构,再与微原纤维结合组装成弹性纤维,是天然弹性蛋白的主要存在形式。与纤维结合的弹性蛋白高度交联、热稳定性好、半衰期长(70年)、具有优异的抗酶解能力。

2、弹性蛋白合成主要发生在胎儿晚期和新生儿早期。弹性蛋白由几种细胞类型合成和分泌,包括平滑肌细胞、成纤维细胞、内皮细胞、成软骨细胞和间皮细胞,在发育过程中组织特异性诱导弹性蛋白表达。弹性蛋白沉积后,其合成就基本停止了;当弹性纤维受到损伤时,弹性蛋白的新合成程序则可以被迅速激活。

3、研本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种重组人源弹性蛋白,其特征在于,氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.编码权利要求1所述蛋白的基因。

3.携带权利要求2所述基因的重组质粒。

4.基因工程菌,所述基因工程菌为表达有权利要求1所述弹性蛋白,或含有权利要求2所述的基因,或转化有权利要求3所述质粒的宿主细胞。

5.一种重组弹性蛋白的制备方法,所述方法为培养权利要求4所述的基因工程菌,并诱导其表达重组弹性蛋白,破碎菌体,获得重组弹性蛋白粗品。

6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述基因工程菌接种在液体培养基中,于37℃,220rpm培养4-6h,添...

【技术特征摘要】

1.一种重组人源弹性蛋白,其特征在于,氨基酸序列如seq id no.1所示。

2.编码权利要求1所述蛋白的基因。

3.携带权利要求2所述基因的重组质粒。

4.基因工程菌,所述基因工程菌为表达有权利要求1所述弹性蛋白,或含有权利要求2所述的基因,或转化有权利要求3所述质粒的宿主细胞。

5.一种重组弹性蛋白的制备方法,所述方法为培养权利要求4所述的基因工程菌,并诱导其表达重组弹性蛋白,破碎菌体,获得重组弹性蛋白粗品。

6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述基因工程菌接种在液体培养基中,于37℃,220rpm培养4-6h,添加0.1~1m的iptg,于25-37℃,220rpm诱导6-8h,离心去上清,超声破碎菌体,离心收集上清得到粗品。

7.根据权利要求5所述的方法,...

【专利技术属性】
技术研发人员:张加慧金成东王文洁张锦玉范杰陈依唐包康娜李贝贝
申请(专利权)人:杭州三言生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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