【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物工程领域，尤其涉及一种耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体及其应用。
技术介绍
1、迟钝爱德华氏菌(edwardsiellatarda，et)是一种短杆状革兰氏阴性致病菌，能造成多种淡、海水鱼类的系统性出血败血症。还是一种重要的人畜共患病原菌，是爱德华氏菌属中唯一感染人类的成员。在感染过程中，e.tarda能以胞内寄生模式定植于宿主重要器官，造成宿主表皮溃烂、脓肿、肠道组织腐败，最终爆发形成爱德华氏菌病。目前，世界各地都有鱼类感染e.tarda的病例报道，造成水产养殖业的严重经济损失。
2、近年来，水产养殖的规模化使e.tarda成为严重威胁淡、海水鱼类的细菌性病原，给水产养殖业造成巨大经济损失。该菌能引起多种经济鱼种的消化道疾病，其感染引发的出血性败血症被认为迟钝爱德华氏菌病的典型病症。此外，e.tarda病害的地理位置范围很广泛。我国渤海、黄海、东海沿海海域的养殖场，甚至内陆的淡水鱼、鳖等养殖场都有相关病例报道。e.tarda还具有兼性胞内寄生特性，是一种造成人、鱼共患病的致病菌，直接威胁人类健康。目前为止，由生食鱼类制品或机体创伤造成的人类感染e.tarda病例呈现逐年增长的趋势，且能诱发多种并发症。因此，如何有效防治该病原菌是迫切需要解决的问题。
3、目前，针对水产动物出现的迟钝爱德华菌病害，通常使用抗生素或其他有关的化学药剂进行治疗。如庆大霉素、氨卞青霉素、新霉素、链霉素及磺胺类药物等。但是众所周知的是，抗生素等药物的使用在短期内固然可以起到很明显的疗效，但它有其很大的弊端就是引起病原的
4、噬菌体是特异性感染细菌并在细菌细胞内复制的病毒。它们是地球上最丰富，最普遍的生物，在微生物、生理学、进化和治疗方面发挥着重要作用。近年来，使用噬菌体治疗人类和动物的慢性细菌性感染，具有很多成功的案例。噬菌体与抗生素相比具有更高的有效性和安全性。与抗生素相比，噬菌体具有高度的特异性，这种作用机制的优点是噬菌体只会裂解目标菌株，不会导致共生肠道菌群的破坏。同时噬菌体具有自我复制、治疗所需剂量小、无毒性、研发周期短、生产成本低等优势。噬菌体治疗作为消除病原菌的替代手段具有十分广阔、诱人的前景，值得研究者深入探索。kwon等用迟钝爱德华菌菌体(etg)做为口服制剂饲喂牙鲆，能有效的抵抗迟钝爱德华菌的感染。因此，对控制迟钝爱德华菌感染迟钝爱德华菌噬菌体是一个很好的选择。
5、但是在实践过程中发现，大多数迟钝爱德华菌噬菌体可以耐受短时高温，制粉，但是在保存过程中，经过1-3个月，效价会大幅度下滑。如想解决此问题，除了优化噬菌体保护剂之外，筛选耐高温、效价稳定，可长期保存的噬菌体至关重要。
技术实现思路
1、本专利技术针对现有迟钝爱德华菌噬菌体仅能耐受短时高温，但长期保存过程中效价会大幅度降低的技术问题，提出一种耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体，该噬菌体具有耐高温、效价稳定、可长期保存的特点，能够用于制备防治病原菌造成的污染或引起的疾病的生物制剂。
2、为了达到上述目的，本专利技术采用的技术方案为：
3、耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体，该噬菌体被命名为rkp-et-22002，保藏编号为cgmcc no.45355，于2022年10月31日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
4、在一实施方式中，所述耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体的全基因组序列如seq idno.1所示。
5、所述耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体具有一个多面体立体对称的头部和尾部，所述头部和尾部通过颈部相连，所述头部包裹着核酸，其直径为100nm，所述尾部长度为120nm。
6、在一实施方式中，所述耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体在37℃下培养4小时，其效价大于1010pfu·ml-1；该噬菌体在85℃条件下水浴10min，其效价保持在109pfu·ml-1。
7、本专利技术还列举了基于上述实施方式所述的耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体的用途，该噬菌体用于制备防治病原菌造成的污染或引起的疾病的生物制剂。
8、在一实施方式中，所述病原菌为迟钝爱德华菌，所述生物制剂包括药物制剂、饲料添加剂、杀菌剂或者消毒剂。
9、药物制剂，为纯化后的耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体制备得到的单一制剂或以纯化后的耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体与其他有效成分组合使用得到的复配制剂。
10、饲料添加剂，其包含上述实施方式所列举的耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体，通过将饲料添加剂添加至水产养殖动物饲料中，以防治迟钝爱德华菌引发的疾病。
11、消毒剂，其包含上述实施方式所列举的耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体，通过向水产养殖动物的养殖环境中喷洒所述消毒剂，以防治迟钝爱德华菌的污染。
12、在一实施方式中，消毒剂的剂型为液体或冻干粉；水产养殖动物的养殖环境包括水产养殖动物体内、水产养殖动物体表、水产养殖动物养殖场所地面、水产养殖动物的养殖场所空气、水产养殖动物饲料、饮水以及养殖器具。
13、与现有技术相比，本专利技术的优点和积极效果在于：
14、1、本专利技术提出一种耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体，该噬菌体以迟钝爱德华菌作为宿主分离得到，具有耐高温的优良特性，不仅可以耐受短时高温，并且制粉后可长期保存，效价较高；
15、2、本专利技术提出一种耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体，噬菌体进行传代30次的条件下，仍然可以保持较高水平的效价，表明这株噬菌体具有较强的遗传稳定性。
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1.耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体，其特征在于，所述耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体被命名为RKP-ET-22002，保藏编号为CGMCC No.45355，于2022年10月31日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。
2.根据权利要求1所述的耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体，其特征在于，所述耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体的全基因组序列如SEQ ID NO.1所示。
3.根据权利要求1所述的耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体，其特征在于，所述耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体具有一个多面体立体对称的头部和尾部，所述头部和尾部通过颈部相连，所述头部包裹着核酸，其直径为100nm，所述尾部长度为120nm。
4.根据权利要求1所述的耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体，其特征在于，所述耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体在37℃下培养4小时，其效价大于1010pfu·mL-1；所述耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体在85℃条件下水浴10min，其效价保持在109pfu·mL-1。
5.根据权利要求1～4中任意一项所述的耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体的用途，其特征在于，该噬菌体用于制备防治病
6.根据权利要求5所述的用途，其特征在于，所述病原菌为迟钝爱德华菌，所述生物制剂包括药物制剂、饲料添加剂、杀菌剂或者消毒剂。
7.药物制剂，其特征在于，为纯化后的如权利要求1～3中任意一项所述的耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体制备得到的单一制剂或以纯化后的权利要求1～4中任意一项所述的耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体与其他有效成分组合使用得到的复配制剂。
8.饲料添加剂，其特征在于，其包含如权利要求1～4中任意一项所述的耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体，通过将所述饲料添加剂添加至水产养殖动物饲料中，以防治迟钝爱德华菌引发的疾病。
9.消毒剂，其特征在于，其包含如权利要求1～4中任意一项所述的耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体，通过向水产养殖动物的养殖环境中喷洒所述消毒剂，以防治迟钝爱德华菌的污染。
10.根据权利要求8所述的消毒剂，其特征在于，所述消毒剂的剂型为液体或冻干粉；所述水产养殖动物的养殖环境包括水产养殖动物体内、水产养殖动物体表、水产养殖动物养殖场所地面、水产养殖动物的养殖场所空气、水产养殖动物饲料、饮水以及养殖器具。
...【技术特征摘要】
1.耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体，其特征在于，所述耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体被命名为rkp-et-22002，保藏编号为cgmcc no.45355，于2022年10月31日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。
2.根据权利要求1所述的耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体，其特征在于，所述耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体的全基因组序列如seq id no.1所示。
3.根据权利要求1所述的耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体，其特征在于，所述耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体具有一个多面体立体对称的头部和尾部，所述头部和尾部通过颈部相连，所述头部包裹着核酸，其直径为100nm，所述尾部长度为120nm。
4.根据权利要求1所述的耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体，其特征在于，所述耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体在37℃下培养4小时，其效价大于1010pfu·ml-1；所述耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体在85℃条件下水浴10min，其效价保持在109pfu·ml-1。
5.根据权利要求1～4中任意一项所述的耐高温型迟钝爱德华菌噬菌体的用途，其特征在于，该噬菌体用于制备防治病原菌造成的污...
【专利技术属性】
技术研发人员：杜新永，刘长太，宋新慧，王甜甜，王立坤，
申请(专利权)人：青岛润达生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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