基于超光谱成像系统快速检测混合细菌耐药性技术方案

本发明专利技术涉及一种基于超光谱成像系统快速检测混合细菌耐药性的方法。第一步，将待测混合细菌样本在含有不同抗生素的培养液中孵育1小时；第二步，将待测样本在含有活细胞指示剂的培养液中孵育1小时；第三步，将待测样本离心清洗后涂在基片上，进行超光谱成像检测；第四步，结合训练好的细菌数据库，进行单细菌识别分类；第五步，判断单细菌光谱中是否含有活细胞指示剂的光谱信号，确定该细菌的活性；第六步，分别计算处理组和对照组的活细菌数和总细菌数的比值，并以处理组和对照组的比值作为耐药性判别标准。本发明专利技术的检测方法具有操作简便、检测速度快、准确度高、可重复性好等优点，对于临床诊断和治疗具有重要的应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于超光谱，涉及一种基于超光谱成像系统快速检测混合细菌耐药性的方法。

技术介绍

1、病原微生物的诊断，尤其是临床常见的细菌诊断，是体外诊断技术的一大应用领域。目前细菌感染的临床诊断方法需要先对样本进行富集培养和分纯，再分别对样本中的病原菌进行种属鉴定和药敏测试(或称抗生素敏感性测试，ast)。临床细菌检测的过程极其缓慢，即使在最先进的实验室条件下也可能需要两天以上的时间。血液样本的表型抗生素敏感性测试因为涉及3个过夜培养步骤，其全流程的周转时间通常至少需要3-4天。而对于尿路感染这样的样本细菌密度较高的感染而言，即使其体外诊断不需要对原始样本进行扩增培养，但其耗时仍然长达36小时。由此可见，现行的病原菌感染临床体外诊断过程较为漫长，以上的方法无法在关键的感染早期对抗生素治疗进行指导。

2、临床病原菌诊断的主要瓶颈在于病原菌的诊断和药敏测试往往需要经过长时间的富集培养，或者需要通过牺牲准确性和成本来提升检测速度。因此，开发一种快速、无需培养、低成本的病原菌感染检测新方法，对于指导临床正确用药、延缓病原菌耐药性问题的发展至关重要。基于超光本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于活细胞指示剂的超光谱成像系统快速检测混合细菌耐药性的方法，其特征在于，利用超光谱成像系统的超光谱分辨率和高灵敏度特性，实现对混合细菌耐药性的快速、准确检测；

2.根据权利要求1所述的快速检测混合细菌耐药性的方法，其特征在于采用自开发的色散超光谱成像模块作为检测装置，提供高信噪比的透射/反射/荧光/拉曼超光谱图像，空间分辨率优于2µm，光谱分辨率优于1 nm，工作波段在400nm-1700nm，可以实现单个细菌物种的识别。

3.根据权利要求1所述的快速检测混合细菌耐药性的方法，其特征在于，是一种无需致病菌培养的快速检测致病菌种及其耐药性的新方法，超光谱成...

【技术特征摘要】

1.一种基于活细胞指示剂的超光谱成像系统快速检测混合细菌耐药性的方法，其特征在于，利用超光谱成像系统的超光谱分辨率和高灵敏度特性，实现对混合细菌耐药性的快速、准确检测；

2.根据权利要求1所述的快速检测混合细菌耐药性的方法，其特征在于采用自开发的色散超光谱成像模块作为检测装置，提供高信噪比的透射/反射/荧光/拉曼超光谱图像，空间分辨率优于2µm，光谱分辨率优于1 nm，工作波段在400nm-1700nm，可以实现单个细菌物种的识别。

3.根据权利要求1所述的快速检测混合细菌耐药性的方法，其特征在于，是一种无需致病菌培养的快速检测致病菌种及其耐药性的新方法，超光谱成像扫描时间可快至数分钟，结合计算机断层扫描成像系统(computed tomography imaging system)甚至可为快照式。

4.根据权利要求1所述的快速检测混合细菌耐药性的方法，其特征在于，活细胞指示剂可以是重水（d2o），活细菌会吸收d2o中的氘元素，生成碳-氘键，从而产生2040-2300cm-1处的拉曼峰，直接被超光谱成像系统探测到或者被集成于系统的的拉曼探头探测到。

5.根据权利要求4所述的快速检测混合细菌耐药性的方法，其特征在于，拉曼信号的激发波长为532nm，聚焦后的激光光斑直径小于2μm，通过共聚焦的方式，避免有效区域外...

【专利技术属性】
技术研发人员：何赛灵，杨安琪，
申请(专利权)人：台州安奇灵智能科技有限公司，
类型：发明
国别省市：