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【技术实现步骤摘要】
技术介绍
1、gjb6基因(gap junction beta6)属于间隙链接蛋白家族的β亚类,编码间隙链接蛋白30(connexin30,cx30,30kda),该基因被发现于1996年,其后的研究表明该基因在人体中发挥重要作用,是分子在相邻细胞之间进行交换和信号传递的重要通道,对于维持细胞的正常生理功能和信号转导具有重要意义。该基因已被证明与人类的多种耳聋和多种皮肤疾病密切相关。例如在一个意大利中-高频耳聋家系中,该基因蛋白在第五位氨基酸发生了苏氨酸被蛋氨酸取代的突变,从而阻碍了cx30的跨膜链接传导,导致细胞间连接子偶联异常。此外,常见的还有先天性耳聋、多汗性外胚层发育不良、角膜炎-鱼鳞病-耳聋综合征、非综合性常染色体显性遗传听力障碍等。
2、蝙蝠又称为翼手目,是唯一能够真正飞行的哺乳动物,其特有的飞行能力和回声定位能力使得其能够生活在全球的大部分地方。蝙蝠在飞行中使用的翼手,由薄而坚韧的皮膜构成,连接着蝙蝠的除拇指之外均极力伸长的各手指以及前臂、上臂、体侧直到踝部甚至两腿之间,从而形成了独特的飞行器官。而蝙蝠飞行时能够在狭窄的空间中灵活转身,则得益于其特有的回声定位系统。回声定位是一种通过分析自身发出的声波回音并将其转化为声音图像的系统,以感知周围环境的方法。在生物体中,这是一个极为复杂且高度进化的过程。虽然在鲸目、食虫目中的一些动物也拥有这种能力。然而,在所有使用回声定位能力的动物中,蝙蝠被认为达到了最高的进化水平。这些能力使得蝙蝠能够利用其他动物无法利用的生态位夜空。
3、蝙蝠可以发出人类无
4、大足鼠耳蝠( myotis ricketti)属于小蝙蝠亚目蝙蝠科鼠耳蝠属,是亚洲特有的蝙蝠种类,主要分布于我国东南、西南地区,常栖息于丘陵、山区的岩洞内。
5、人们已成功的将蝙蝠的回声定位用于专利技术雷达,极大推动了人类在潜水、航空、夜间探测等技术的发展和进步,属于成功的生物仿生学应用,而对于其相关基因的应用则还属于空白。
6、因此,大足鼠耳蝠的gjb6基因在人类的听力障碍以及皮肤疾病领域具有巨大的商业潜力和广阔的应用前景。然而,目前尚未有对该基因的充分开发和应用。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供来自大足鼠耳蝠间隙链接蛋白成员gjb6基因的cdna完整序列、对应蛋白序列及其应用,并为基于该序列开发的基因工程产品奠定基础。该专利技术可应用于解决上述问题。
2、为了达成上述目标,本专利技术通过以下技术方案来实现:
3、提供一种完整的大足鼠耳蝠间隙链接蛋白成员gjb6基因cdna序列,所述的cdna序列为以下编码(i)或(ii)所述任一项蛋白的核苷酸序列:
4、(i)一种具有如seq id no.3所示氨基酸序列的蛋白质;
5、(ii)一种在氨基酸序列(i)中,由加成、缺失或取代一个、或多个氨基酸的氨基酸序列所组成的,与氨基酸序列(i)中蛋白质具有相同功能的蛋白质。
6、本专利技术所述大足鼠耳蝠间隙链接蛋白成员gjb6基因的完整cdna序列优选的具有如seq id no.1所示的核苷酸序列。
7、提供一种由完整的大足鼠耳蝠间隙链接蛋白成员gjb6基因的cdna序列所编码的蛋白质序列,所述蛋白质序列如以下(i)或(ii)所述任一项蛋白的序列:
8、(i)一种具有如seq id no.3所示氨基酸序列的蛋白质;
9、(ii)一种在氨基酸序列(i)中,由加成、缺失或取代一个、或多个氨基酸的氨基酸序列所组成的,与氨基酸序列(i)中蛋白质具有相同功能的蛋白质。
10、本专利技术所述的大足鼠耳蝠间隙链接蛋白成员gjb6基因的蛋白质序列优选的具有如seq id no.3所示的氨基酸序列。
11、本专利技术还提供了一种通过设计简并引物和race引物,从大足鼠耳蝠的组织样本中扩增得到间隙链接蛋白成员gjb6基因的cdna完整序列的方法。具体包括以下步骤:
12、a) 设计并合成哺乳类gjb6基因cdna保守区简并引物用于扩增得到大足鼠耳蝠gjb6基因的部分cdna序列;
13、b) 设计并合成大足鼠耳蝠gjb6基因的race引物,race扩增得到大足鼠耳蝠gjb6基因5‘端和3‘端的完整序列,继而得到该基因完整的cdna序列’;
14、c) 将上述所得基因扩增产物进行胶回收和连接、转化,pcr鉴定挑取阳性克隆送测序,多克隆比对得到可信的大足鼠耳蝠gjb6基因的cdna完整序列。
15、经由上述方法,本专利技术获取了大足鼠耳蝠间隙链接蛋白成员gjb6基因的cdna完整序列,并经由分析得到该基因的蛋白质序列及相关重要功能信息。
16、本专利技术还提供一种大足鼠耳蝠间隙链接蛋白成员gjb6基因在听力障碍相关和皮肤相关疾病中的重要作用。
17、本专利技术所述大足鼠耳蝠间隙链接蛋白成员gjb6基因在听力障碍和皮肤疾病领域的重要作用涉及该基因序列和蛋白序列在听力障碍和皮肤疾病治疗中的应用,包括但不限于:
18、一种大足鼠耳蝠gjb6基因序列和蛋白序列在听力障碍治疗中的应用;
19、一种大足鼠耳蝠gjb6基因序列和蛋白序列在皮肤疾病治疗中的应用。
20、与现有技术相比,本专利技术的优点在于:
21、本专利技术从具有飞行和回声定位能力的大足鼠耳蝠组织样本中获取了一种间隙链接蛋白gjb6基因的完整cdna序列,并经由分析获得其蛋白质序列及其在蝙蝠听力和飞行能力中的重要功能信息,大足鼠耳蝠gjb6基因序列及蛋白序列为听力障碍和皮肤疾病治疗
提供了新的思路和方向,并且大足鼠耳蝠的gjb6基因序列和蛋白序列具备后续改造条件,具有作为产品开发的应用价值。
【技术保护点】
1.一种完整大足鼠耳蝠的间隙链接蛋白成员GJB6基因的蛋白,其特征在于所述GJB6基因蛋白为以下(i)或(ii)中所述的任一项蛋白质:
2.根据权利要求1所述大足鼠耳蝠间隙链接蛋白成员GJB6基因的蛋白,其特征在于该蛋白质具有SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列,特别的具有氨基酸第131位的精氨酸。
3.一种完整的编码大足鼠耳蝠间隙链接蛋白成员GJB6基因蛋白的cDNA序列,其特征在于所述大足鼠耳蝠的间隙链接蛋白成员GJB6基因的cDNA序列为编码以下(i)或(ii)中所述的任一项蛋白质:
4.根据权利要求3所述完整的大足鼠耳蝠间隙链接蛋白成员GJB6基因的cDNA序列,其特征在于所述cDNA序列具有如SEQ ID NO.1所示核苷酸序列,特别的具有编码氨基酸第131位精氨酸的核苷酸。
5.根据权利要求1或3所述,大足鼠耳蝠间隙链接蛋白成员GJB6基因的完整核苷酸序列及氨基酸序列,其在哺乳动物的听力及皮肤组织中具有重要作用。
6.根据权利要求5所述的完整大足鼠耳蝠间隙链接蛋白成员GJB6基因序列的核苷酸序列及氨基酸序列
7.根据权利要求5所述的完整大足鼠耳蝠间隙链接蛋白成员GJB6基因序列的核苷酸序列及氨基酸序列,其特征在于可应用于皮肤疾病相关治疗领域。
...【技术特征摘要】
1.一种完整大足鼠耳蝠的间隙链接蛋白成员gjb6基因的蛋白,其特征在于所述gjb6基因蛋白为以下(i)或(ii)中所述的任一项蛋白质:
2.根据权利要求1所述大足鼠耳蝠间隙链接蛋白成员gjb6基因的蛋白,其特征在于该蛋白质具有seq id no.3所示的氨基酸序列,特别的具有氨基酸第131位的精氨酸。
3.一种完整的编码大足鼠耳蝠间隙链接蛋白成员gjb6基因蛋白的cdna序列,其特征在于所述大足鼠耳蝠的间隙链接蛋白成员gjb6基因的cdna序列为编码以下(i)或(ii)中所述的任一项蛋白质:
4.根据权利要求3所述完整的大足鼠耳蝠间隙链接蛋白成员gjb...
【专利技术属性】
技术研发人员:雷鸣,何灵江,茹炳华,
申请(专利权)人:嘉兴元圣生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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