【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物工程，具体涉及一种含重组胶原白的干细胞培养液及其制备方法和应用。
技术介绍
1、随着人类寿命延长和生活水平的提高，对面部皮肤的修饰护理以减缓皮肤衰等已是人们日常生活中不可缺少的内容。人体的衰老和皱纹的出现根本原因是细胞代谢缓慢和更替减少，细胞的衰老和减少也跟干细胞紧密相关。
2、人脐带华通氏胶间充质干细胞是一种具有自我更新，多向分化潜能的成体干细胞，取自分娩过程中的废弃物-脐带，因此来源广泛、取材方面、不受伦理学限制，相比其他成体干细胞来源，免疫原性更弱，增殖能力更强，干细胞性能更加原始，具有多项分化潜能，相比其他类型的干细胞，是一种比较理想的种子细胞，是干细胞家族的新生代表，可以用于衰老和病变引起的组织损伤修复。
3、脐带间充质干细胞可以快速激活休眠的干细胞并促使其生长，可以调节机体内环境，为干细胞的生长提供有利条件，富含多种生长因子，如表皮生长因子，成纤维细胞生长因子，等该类生长因子在美容方面功能强大，能对受损皮肤、敏感皮肤、创伤皮肤剂改建性皮肤具有良好的修复、护理缩短创伤愈合时间剂减少疤痕形成，再生血管，促进胶原蛋白合成延缓衰老。
4、已经上市的美容保养品，多数通过化工方法合成或者植物提取，产品中会有化学有害成分残留，长期使用会对皮肤产生不利影响，且多数产品无生物活性，不能从根源上改善细胞新陈代谢或解决皮肤松弛无光泽等问题。因此研究开发一种天然的、对皮肤更友好且减缓皮肤衰老的皮肤保养产品具有重要意义。
技术实现思路
1、本
2、为实现上述目的，本专利技术所采取的技术方案是：
3、本专利技术一方面提供了一种含重组胶原白的干细胞培养液，其含有重组ⅲ型胶原蛋白，所述重组ⅲ型胶原蛋白在干细胞培养过程中加入。
4、本专利技术另一方面提供了上述含重组胶原蛋白的干细胞培养液的制备方法，具体包括如下步骤：
5、s1: 取新鲜脐带，清洗分离，获得华通氏胶；
6、s2：剪成0.1-5cm3的组织块，置于含重组ⅲ型胶原蛋白的dmem/f12无血清的复合培养基中培养，复合培养基和胶块的质量比为10-50∶1，放于37±2℃和4-6％co2培养箱中，培养5-7天后，胰蛋白酶消化后进行传代培养；
7、s3:收集各代培养结束后消化离心得到的上清液即得。
8、作为本专利技术的进一步改进，所述培养基中重组ⅲ型胶原蛋白的浓度为0.5-10mg/ml。
9、作为本专利技术的进一步改进，传代培养的条件为：按照每个培养瓶1-3*104个细胞进行传代培养，每个培养瓶中加入复配培养基10-30ml，放于37±2℃和4-6％co2培养箱中静置贴壁培养，72h后胰蛋白酶消化收集细胞，7000-12000rpm离心收集上清液，剩余细胞继续进行传代培养。
10、作为本专利技术的进一步改进，所述步骤s3中的上清液为第2代到第15代的上清液。
11、本专利技术再一方面提供了上述培养液在美容产品中的应用。
12、进一步的，应用为向所述培养液中补充0.1-0.5％的重组ⅲ型胶原蛋白冻干品，和5％-20％海藻糖，再冻干，制备成复合产品。
13、采用上述技术方案所产生的有益效果在于：
14、本专利技术在获取干细胞培养液的过程中使用了复配培养基，缩短干细胞的培养时间，促进干细胞增殖和相关细胞因子（表皮生长因子，成纤维细胞生长因子）的分泌，得到的干细胞培养含有丰富的含生长因子、细胞因子、趋化因子、sod等多种具有生理活性的物质。
15、本专利技术得到的医美复合产品经试验验证，可以促进纤维细胞增殖、迁移、黏附，具有提高细胞生长效率，调控细胞功能及生物学行为的优点。
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1.一种含重组胶原白的干细胞培养液，其特征在于，其含有重组Ⅲ型胶原蛋白，所述重组Ⅲ型胶原蛋白在干细胞培养过程中加入。
2.一种如权利要求1所述的含重组胶原蛋白的干细胞培养液的制备方法，其特征在于，具体包括如下步骤：
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述培养基中重组Ⅲ型胶原蛋白的浓度为0.5-10mg/ml。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，传代培养的条件为：按照每个培养瓶1-3*104个细胞进行传代培养，每个培养瓶中加入复配培养基10-30ml，放于37±2℃和4-6％CO2培养箱中静置贴壁培养，72h后胰蛋白酶消化收集细胞，7000-12000rpm离心收集上清液，剩余细胞继续进行传代培养。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S3中的上清液为第2代和第3代的培养的上清液。
6.由权利要求2-5所述的制备方法得到的含重组胶原白的干细胞培养液在美容产品中的应用。
7.根据权利要求1所述的应用为向所述培养液中补充0.1％-0.5％的重组Ⅲ型胶原蛋白冻干品和5％-20
...【技术特征摘要】
1.一种含重组胶原白的干细胞培养液，其特征在于，其含有重组ⅲ型胶原蛋白，所述重组ⅲ型胶原蛋白在干细胞培养过程中加入。
2.一种如权利要求1所述的含重组胶原蛋白的干细胞培养液的制备方法，其特征在于，具体包括如下步骤：
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述培养基中重组ⅲ型胶原蛋白的浓度为0.5-10mg/ml。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，传代培养的条件为：按照每个培养瓶1-3*104个细胞进行传代培养，每个培养瓶中加入复配培养基10-30ml，...
【专利技术属性】
技术研发人员：徐兰举，杨利霞，于月欣，李华，刘鑫，
申请(专利权)人：河北纳科生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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