一种利用重组酶聚合酶等温扩增联合侧流免疫层析法的猴痘病毒核酸检测方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种利用重组酶聚合酶等温扩增联合侧流免疫层析法检测猴痘病毒核酸的方法及应用，属于核酸检测领域。该试剂的使用的DNA引物包括引物RL‑F和引物RL‑R，DNA引物与目标序列混合进行等温核酸扩增反应；DNA引物RL‑F的序列如SEQ ID NO.2所示；DNA引物RL‑R的序列如SEQ ID NO.3所示；引物RL‑F的5’端由地高辛修饰，且距5’端33bp处添加四氢呋喃间隔物，3’端添加C3‑间隔基；RL‑R的5’端由生物素修饰。本发明专利技术利用DNA引物与目标序列在重组酶聚合酶等酶类存在的恒温条件下进行核酸扩增反应并通过侧流免疫层析法对反应结果进行视查，该方法可快速、高灵敏度和特异性地检测猴痘病毒核酸，有望为今后应用于猴痘病毒的早期筛查、诊断和疗效评估奠定坚实的基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及猴痘核酸检测领域，具体涉及一种利用重组酶聚合酶等温扩增联合侧流免疫层析法的猴痘病毒核酸检测方法及应用。

技术介绍

1、猴痘(monkeypox，mpx)是由猴痘病毒(monkeypox virus，mpxv)引起的人畜共患性疾病。mpxv由双链dna和外膜组成，是痘病毒科(包括牛痘病毒、天花病毒和其他痘病毒)正痘病毒属(opxv)的成员，主要分为西非群株和刚果盆地群株。除了通过猴子传播外，该病毒还通过冈比亚袋鼠和非洲松鼠等啮齿动物传播。mpxv也能感染人类，但其感染率和死亡率明显低于天花病毒。mpxv主要通过直接接触感染者的体液、患病组织或呼吸道飞沫传播。患者会出现头痛、发热、淋巴结肿大以及类似水疱状皮疹等症状。潜伏期通常为7至14天，症状持续时间2至4周，致死率在0％～11％之间，绝大多数患者可康复。目前还没有针对mpx的针对性治疗方案，因此，准确的检测对于早期发现病例、快速鉴别诊断和控制病毒传播至关重要。

2、参照现有的诊断技术，可以通过病毒分离和培养技术、电子显微镜活检、痘病毒抗原的免疫组织化学染色以及抗正痘病毒igm和ig本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种检测猴痘病毒核酸的试剂，包括：

2.根据权利要求1所述的试剂，其特征在于，所述引物RL-F的5’端由地高辛修饰，且距5’端33bp处添加四氢呋喃间隔物，3’端添加C3-间隔基；所述引物RL-R的5’端由生物素修饰。

3.一种检测猴痘病毒核酸的试剂盒，包括：

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述反应试剂包括重组酶、单链结合蛋白、聚合酶与核酸内切酶。

5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述侧向流动试纸条包括玻璃纤维样品垫、结合垫、NC膜、吸收垫与PVC支撑板。

6.非诊断目的的权利要求1或2所述的试剂、...

【技术特征摘要】

1.一种检测猴痘病毒核酸的试剂，包括：

2.根据权利要求1所述的试剂，其特征在于，所述引物rl-f的5’端由地高辛修饰，且距5’端33bp处添加四氢呋喃间隔物，3’端添加c3-间隔基；所述引物rl-r的5’端由生物素修饰。

3.一种检测猴痘病毒核酸的试剂盒，包括：

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述反应试剂包括重组酶、单链结合蛋白、聚合酶与核酸内切酶。

5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述侧向流动试纸条包括玻璃纤维样品垫、结合垫、nc膜、吸收垫与...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴国球，范小波，古丽乃扎尔·阿布都沙拉木，
申请(专利权)人：东南大学，
类型：发明
国别省市：