【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于鼻软骨成分提取，具体涉及一种鼻软骨提取物的制备方法。
技术介绍
1、硫酸软骨素(chondroitin sulfate，cs)是由d-葡糖醛酸和c-4位或c-6位羟基上发生硫酸酯化的n-乙酰氨基半乳糖以β-1,4-糖苷键连接而成的重复二糖单位组成的黏多糖，主要存在于动物软骨组织中，具有抗炎、抗癌、抗hiv、降血脂、抗凝血活性、预防关节炎等重要生物功能。
2、随着硫酸软骨素的用途不断扩大，市场对硫酸软骨素的需求也呈现快速增长。目前，大规模生产的硫酸软骨素无法经过人工合成，只能通过提取法获得。常见的硫酸软骨素提取方法包括，中性盐法，碱提取法，酶提取法，超声提取法，乙酸抽提法等。酶法生产，由于其温和的提取条件、良好的提取效果以及产品质量较高等优点，逐步成为硫酸软骨素提取工艺的首选。但是，在整个提取的过程中，硫酸软骨素只占到提取物质总干重的3％，而且，目前对软骨的提取方法，大多数仅涉及到单种硫酸软骨素或氨基葡萄糖的制备，鲜少提及其他有效成分如多种氨基酸、钙、葡萄糖等的提取。
3、氨基葡萄糖是一种天然的氨基单糖，广泛存在于骨骼中，为人体关节软骨基质中合成蛋白聚糖所必需的物质；是形成软骨细胞的重要营养素，是健康关节软骨的天然组织成分。氨基葡萄糖能促进软骨的合成、抑制关节软骨的分解，同时还具有抗炎作用，并能刺激软骨细胞的生长。
4、氨基酸是组成蛋白质的基本单位，一般来说构成人体和食物的氨基酸有20多种，分为必需氨基酸和非必需氨基酸。氨基酸对人体可以有以下几个方面的作用：1、影响蛋白质的消化吸收
5、钙是生物必须的元素，是神经传递、肌肉收缩、血液凝结、激素释放等所必需的元素，并参与身体的新陈代谢。人类身体里面所含的钙，有大约1％是存在于血液以及细胞液或者是软组织间隙当中的，这些钙元素往往是以离子的形式存在，对于维持我们身体的正常生命体征特别的重要。如果人体钙摄入不足，血钙的含量会下降，这种现象如果较为严重是致命的。钙、氨基葡萄糖、氨基酸等多种活性成分具有多种有益功效，这些资源未被有效的提取出来，造成资源的浪费。
6、目前，并没有关于从软骨中同时提取硫酸软骨素、氨基葡萄糖、氨基酸和钙的方法，且单种或两种成分的提取方法大部分为化学或生物酶法。比如，中国专利技术专利cn1654670a公开了一种硫酸软骨素的制备方法，包括步骤物料预处理、物料溶液浸提、过滤去渣、解离去杂、静沉过滤、滤液浓缩、醇沉结晶、结晶洗涤、真空干燥及检测包装步骤。在物料溶液浸提工序中，将物料浸入氢氧化钠水溶液中通入超声波进行超声破碎处理，使物料细胞内所含的硫酸软骨素、蛋白质、氨基酸和无机盐等物质释放出来，在解离去杂工序，在碱性条件下进行超声处理、加热，保温，过滤去除溶液中蛋白质，在滤液浓缩工序，通过超滤膜过滤去除氨基酸和无机盐等杂质，得到硫酸软骨素浓缩液，再经醇沉结晶、真空干燥可得chs(硫酸软骨素)产品；该专利技术专利的方法需要消耗大量乙醇等有机溶剂造成环境污染，且不能对氨基酸等成分进行合理的提取利用。而且，目前的粉碎、破碎方法最细仅能将鼻软骨粉碎至300目左右，粒径较大，不能对有效成分进行充分的提取。
7、即便有技术给出了同时对软骨中硫酸软骨素和氨基酸提取的工艺，比如，中国专利技术专利cn105076725a公开的工艺中包括步骤：清洗、煮料、酶解、压滤、离心分离、离子交换、洗脱、氨基酸粉的提取：将穿透液进行纳滤，滤出液经浓缩后的浓缩液进行干燥得氨基酸粉的粗品；硫酸软骨素的提取。中国专利技术专利cn113599397a公开了一种软骨提取物及其制备方法和应用，软骨提取物主要含有硫酸软骨素、氨基葡萄糖和ⅱ胶原蛋白肽。中国专利技术专利cn101913583b公开了一种从动物软骨中提取软骨素、胶原蛋白和高钙粉的方法，包括以下步骤：a.将清洗后的动物软骨破碎成碎块，加入水混合后，放入反应釜中，加热，使蛋白质变性；b.在反应釜夹套中通入冷水降温，至反应釜内温度为30-60℃时，加入胶原蛋白酶和木瓜蛋白酶，保持30-70℃温度，ph值7-8，搅拌水解；c.水解后的溶液经粗滤得到含磷酸钙的骨渣；d.粗滤出的液体经压力过滤机精滤得澄清精滤液，所述精滤液加入乙醇沉淀软骨素结晶；e.沉淀软骨素结晶后剩余的液体为胶原蛋白及酒精的混合溶液。但是，上述工艺仍然涉及到化学和生物方法，仍需使用酶，不仅工艺过程需要严格控温，且酶的添加增加了额外的工艺成本。目前已公开的常规物理处理方法不能对硫酸软骨素、氨基葡萄糖、钙和氨基酸实现同时制备。
8、鉴于此，需要提供一种不需要有机溶剂和酶等参与的物理提取方法，仅仅采用真空冷冻干燥结合低温纳米物理粉碎技术对软骨进行提取，萃取有效成分，同时得到高浓度含量的硫酸软骨素、氨基葡萄糖、钙和氨基酸，以提高工艺产品的附加值，增加资源利用率，减少环境污染。该物理提取方法的研究对软骨的有效成分综合提取具有重要的意义。
技术实现思路
1、本专利技术针对现有技术存在的问题，提供了一种鼻软骨提取物的制备方法，使用真空冷冻干燥结合低温纳米物理粉碎技术对鼻软骨进行提取，将鼻软骨粉碎成d50在1000目以上的超微细粉；最终得到同时富含硫酸软骨素、氨基葡萄糖、16种氨基酸和钙元素的鼻软骨提取物；所制备得到的鼻软骨提取物能较好地分散、溶解于胃液中，增大与胃黏膜的接触面积，从而更易被胃肠道吸收，大大提高了生物利用度。
2、为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：
3、一方面，本专利技术提供一种鼻软骨提取物的制备方法，包括步骤：
4、(1)将前处理后的鼻软骨进行第一次冷冻干燥，得到冻干鼻软骨1；
5、(2)冻干鼻软骨1进行低温纳米物理粉碎，得到粉碎冻干鼻软骨1；
6、(3)粉碎冻干鼻软骨1进行第二次冷冻干燥，得到粉碎冻干鼻软骨2；
7、(4)粉碎冻干鼻软骨2进行低温纳米物理粉碎，得到粉碎冻干鼻软骨2；
8、(5)粉碎冻干鼻软骨2进行第三次冷冻干燥，得到冻粉碎干鼻软骨3；
9、(6)粉碎冻干鼻软骨3进行低温纳米物理粉碎，得到鼻软骨提取物。
10、优选地，步骤(1)、步骤(3)、步骤(5)中，所述冷冻干燥具体为：分别依次进行预冻、升华干燥和解析干燥操作。
11、进一步优选地，所述预冻具体步骤为：以0.5-3℃/h的速度降温至-40～-50℃，在-40～-50℃下保持3-8h。
12、更进一步优选地，所述预冻为：以1-2℃/h的速度降本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种鼻软骨提取物的制备方法，其特征在于，包括步骤：
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)、步骤(3)、步骤(5)中，所述冷冻干燥具体为：分别依次进行预冻、升华干燥和解析干燥操作；
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述预冻为：以1-2℃/h的速度降温至-45℃；所述升华干燥为：以5℃/h的速度升温至设定温度；所述解析干燥，温度控制在20℃。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)、步骤(3)、步骤(5)中，所述冷冻干燥采用真空冷冻干燥机进行，真空冷冻干燥机的工作参数设置为：
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述真空冷冻干燥机的工作参数设置为：
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)、步骤(4)、步骤(6)所述的低温纳米物理粉碎，采用超微细粉碎机进行粉碎；超微细粉碎机的工作参数设置为：
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述低温纳米物理粉碎中，超微细粉碎机的工作参数设置为：
8.根据权利要求1所述的制备
9.一种冷冻干燥结合低温纳米物理粉碎萃取技术在同时提取鼻软骨中多种有效成分中的应用，其特征在于，所述冷冻干燥结合低温纳米物理粉碎萃取技术具体为：先进行包括预冻、升华干燥和解析干燥的冷冻干燥，然后使用超微细粉碎技术进行低温纳米物理粉碎萃取，直至鼻软骨粒径D50在1000目以上。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述预冻为：以0.5-3℃/h的速度降温至-40～-50℃，在-40～-50℃下保持3-8h；所述升华干燥为：以4-6℃/h的速度升温至设定温度；所述解析干燥，温度控制在15-25℃；干燥的时间为4-8h；所述冷冻干燥采用真空冷冻干燥机进行，冷冻干燥机的工作参数设置为：
...【技术特征摘要】
1.一种鼻软骨提取物的制备方法，其特征在于，包括步骤：
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)、步骤(3)、步骤(5)中，所述冷冻干燥具体为：分别依次进行预冻、升华干燥和解析干燥操作；
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述预冻为：以1-2℃/h的速度降温至-45℃；所述升华干燥为：以5℃/h的速度升温至设定温度；所述解析干燥，温度控制在20℃。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)、步骤(3)、步骤(5)中，所述冷冻干燥采用真空冷冻干燥机进行，真空冷冻干燥机的工作参数设置为：
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述真空冷冻干燥机的工作参数设置为：
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)、步骤(4)、步骤(6)所述的低温纳米物理粉碎，采用超微细粉碎机进行粉碎；超微细粉碎机的工作参数设置为：
...【专利技术属性】
技术研发人员：范盘生，朱尧，赵洁如，张涛，陆剑，
申请(专利权)人：百瑞德南京生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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