测定多磺酸黏多糖抑制透明质酸酶活性的方法技术

本发明专利技术属于酶活性检测技术领域，具体涉及一种测定多磺酸黏多糖抑制透明质酸酶活性的方法。本发明专利技术方法利用多磺酸黏多糖在具有一定活性透明质酸酶的条件下反应生成N‑乙酰葡萄糖胺，与稀碱共热后生成产物与酸性对二甲基氨基苯甲醛反应通过分光光度法测定N‑乙酰葡萄糖胺的含量可得知透明质酸酶被水解的程度，进而得出透明质酸酶活性。本方法简单、准确、易于操作，适用于各种多糖的透明质酸酶活性抑制测定。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于酶活性检测，具体涉及一种测定多磺酸黏多糖抑制透明质酸酶活性的方法。

技术介绍

1、透明质酸酶(hyaluronidase)，一种内源性糖苷酶，可以将透明质酸(hyaluronan或hyaluronic acid，ha)及部分糖胺聚糖(glycosaminoglycan，gag)降解成二糖或小分子寡糖。透明质酸酶在自然界中分布广泛，从复杂的哺乳动物，无脊椎动物、到低等的真菌、细菌和噬菌体中均有发现。透明质酸是一种广泛存在于人体组织中的高分子聚合物，它的降解主要通过透明质酸酶的作用完成。透明质酸酶可作为药物扩散剂，降解人体组织的透明质酸以增加其通透性，促进注射液的扩散；还可用于制备有生物活性的低分子量糖胺寡糖。透明质酸酶调节不仅在研究其酶促反应的复杂机制具有宝贵的价值缺，在gly-cotechnology应用和解决透明质酸相关疾病的未来医学应用方面举足轻重。所以，研究透明质酸酶抑制剂有着非常重要的意义。

2、已知的透明质酸酶抑制剂主要有金属阳离子(na+、fe2+、fe3+等)、苯乙醇苷类化合物、抗组胺药物、抗坏血酸、水杨酸盐、绣球酚本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.检测多糖对透明质酸酶的抑制活性的方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述多糖包括多磺酸黏多糖、硫酸软骨素D、硫酸软骨素E和类肝素中的任一种或多种。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述溶剂A为氯化钠和乙酸的混合溶液；所述溶剂B为氯化钠试液。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述底物溶液浓度5.0mg/mL；所述透明质酸酶试液的浓度为80-130IU/mL，优选为100IU；所述样品溶液浓度为0.25ug/mL。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述系统溶液Ⅰ中，底物溶...

【技术特征摘要】

1.检测多糖对透明质酸酶的抑制活性的方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述多糖包括多磺酸黏多糖、硫酸软骨素d、硫酸软骨素e和类肝素中的任一种或多种。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述溶剂a为氯化钠和乙酸的混合溶液；所述溶剂b为氯化钠试液。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述底物溶液浓度5.0mg/ml；所述透明质酸酶试液的浓度为80-130iu/ml，优选为100iu；所述样品溶液浓度为0.25ug/ml。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述系统溶液ⅰ中，底物溶液、透明质酸酶试液和溶剂b的体积比为2:1:1；所述系统溶液ⅱ中，底物溶液、透明质酸酶试液和供试品溶液的体积比为2:1:1；所述系统溶液ⅲ中，底物溶液和溶剂b的体积比为2...

【专利技术属性】
技术研发人员：尹怀君，徐静，吕佳，张岩岩，
申请(专利权)人：重庆望业药物研究有限公司，
类型：发明
国别省市：