一种基于氮掺杂碳量子点荧光探针检测微生物活性的试剂盒及其检测方法技术

本发明专利技术涉及一种基于氮掺杂碳量子点荧光探针检测微生物活性的试剂盒及其检测方法。所述试剂盒包括氮掺杂碳量子点荧光探针(N‑CDs)和荧光染料碘化丙啶(PI)。所述氮掺杂碳量子点荧光探针作为新型荧光探针，以地衣芽孢杆菌为前体合成，对细菌或真菌等微生物的活体具有标记作用，具有较好的荧光成像效果，且不会影响微生物结构完整性，可以用于检测微生物的活性。本发明专利技术还提供了利用该试剂盒检测微生物活性的方法，可通过菌群位置分布，准确测定微生物活性，结合细菌计数微球后还能够得出活菌与死菌的绝对数量。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于微生物，涉及一种基于氮掺杂碳量子点荧光探针检测微生物活性的试剂盒及其检测方法。

技术介绍

1、细菌活性检测是医药、卫生及食品、工业生产等多个行业质量检测的重要内容，细菌的活性决定其侵袭力，因此必须严格控制微生物含量确保产品符合相关行业标准，并通过探明细菌活性情况为疾病诊断、治疗、分析提供客观依据。在传统方法上，活细菌的数量是通过平板计数法测定，其细菌活性的判定结果完全取决于细胞的繁殖能力，仅对能形成菌落的细菌进行计数，无法提供死亡细菌或存活但不可培养状态细菌的指示。此外，平板计数法由于需要培养，导致其过程耗时长(24～48h甚至更长)，无法快速获得样本中细菌活性情况。除平板计数法外，常见的细菌活性检测方法是基于pcr技术的研究，通过利用可透过细胞膜与死菌dna结合的核酸交联剂以抑制死菌dna扩增；或扩增仅存在于活菌中的mrna，达到检测活菌的目的。但该方法中，死菌的dna或mrna很难完全从样本内完全去除，易导致结果假阳性，无法满足实际需要。因此，目前细菌活性测定仍以与单细胞技术结合检测为主，如流式细胞术、显微镜观察或分子鉴定等。其中流式细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于氮掺杂碳量子点荧光探针检测微生物活性的试剂盒，其特征在于，包括氮掺杂碳量子点荧光探针(N-CDs)和荧光染料碘化丙啶(PI)；

2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述氮掺杂碳量子点荧光探针的制备方法如下：

3.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，步骤a)中，所述地衣芽孢杆菌和LB液体培养基体积比为(1～4)：(500～2000)；所述活化后菌悬液和LB液体培养基的体积比为(1～4)：(500～2000)。

4.一种利用权利要求1所述试剂盒检测微生物活性的方法，其特征在于，包括步骤如下：

5.如权利要求4所述检测微生物活...

【技术特征摘要】

1.一种基于氮掺杂碳量子点荧光探针检测微生物活性的试剂盒，其特征在于，包括氮掺杂碳量子点荧光探针(n-cds)和荧光染料碘化丙啶(pi)；

2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述氮掺杂碳量子点荧光探针的制备方法如下：

3.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，步骤a)中，所述地衣芽孢杆菌和lb液体培养基体积比为(1～4)：(500～2000)；所述活化后菌悬液和lb液体培养基的体积比为(1～4)：(500～2000)。

4.一种利用权利要求1所述试剂盒检测微生物活性的方法，其特征在于，包括步骤如下：

5.如权利要求4所述检测微生物活性的方法，其特征在于，所述待检测菌为真菌或细菌；

6.如权利要求4所述检测微生物活性的方法，其特征在于，所述流式细胞仪在检测前进行区域门圈定及补偿调节参数设置，具体如下：

7.如权利要求4所述检测微生物活...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱翎嘉，张东春，张绍明，
申请(专利权)人：山东省大健康精准医疗产业技术研究院，
类型：发明
国别省市：