一种用于分泌表达乳铁蛋白的马克斯克鲁维酵母及其构建方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种用于分泌表达乳铁蛋白的马克斯克鲁维酵母及其构建方法与应用。本发明专利技术提供了一种构建用于分泌表达人乳铁蛋白的马克斯克鲁维酵母工程菌株的方法，包括如下步骤：在马克斯克鲁维酵母受体菌中表达人乳铁蛋白的同时，采用马克斯克鲁维酵母内源的Gap3启动子增加二硫键异构酶Pdi的表达，从而获得用于分泌表达人乳铁蛋白的马克斯克鲁维酵母工程菌株。本发明专利技术对于提高马克斯克鲁维酵母分泌表达乳铁蛋白的产量具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，具体涉及一种用于分泌表达乳铁蛋白的马克斯克鲁维酵母及其构建方法与应用。

技术介绍

1、乳铁蛋白（lactoferrin，lf）是一种非血红素铁结合糖蛋白，广泛分布于哺乳动物乳汁，可能除了狗和老鼠。乳汁中乳铁蛋白的浓度取决于哺乳期。已经证明，初乳的lf含量是成熟乳的7倍。人体细胞可以产生乳铁蛋白，它也存在于人体的许多器官和细胞中。在肾脏、肺、胆囊、胰腺、肠、肝、前列腺、唾液、眼泪、精子、脑脊液、尿液、支气管分泌物、阴道分泌物、滑液、脐带中均有证实。乳铁蛋白分子量为80 kda，它由689个氨基酸组成，无味，易溶于水，该多肽链由两个球形裂片组成，其中羧基和氨基端由α螺旋连接。每个叶瓣由两个结构域分子组成，结构域被称为c1、c2、n1和n2，它们形成一个β-薄片，且每个乳铁蛋白分子能够螯合两个fe3+。

2、乳铁蛋白是一种多功能蛋白，具有铁结合/转移、抗菌、抗病毒、抗真菌、抗炎、抗癌等特性，从而具有调节细胞生长，清除有害的自由基并抑制几种有毒化合物形成的功能。lf的多功能性是由于它属于杂交蛋白，既具有有序结构域，又具有重要功能的内本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种构建用于分泌表达人乳铁蛋白的马克斯克鲁维酵母工程菌株的方法，包括如下步骤：在马克斯克鲁维酵母受体菌中表达人乳铁蛋白的同时，采用马克斯克鲁维酵母内源的Gap3启动子增加二硫键异构酶Pdi的表达，从而获得用于分泌表达人乳铁蛋白的马克斯克鲁维酵母工程菌株。

2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述二硫键异构酶Pdi的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。

3. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述人乳铁蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNo.4所示。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：在所述马克斯克鲁维酵母受体菌中表达所述人乳铁蛋...

【技术特征摘要】

1.一种构建用于分泌表达人乳铁蛋白的马克斯克鲁维酵母工程菌株的方法，包括如下步骤：在马克斯克鲁维酵母受体菌中表达人乳铁蛋白的同时，采用马克斯克鲁维酵母内源的gap3启动子增加二硫键异构酶pdi的表达，从而获得用于分泌表达人乳铁蛋白的马克斯克鲁维酵母工程菌株。

2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述二硫键异构酶pdi的氨基酸序列如seq id no.1所示。

3. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述人乳铁蛋白的氨基酸序列如seq idno.4所示。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：在所述马克斯克鲁维酵母受体菌中表达所述人乳铁蛋白是通过向所述马克斯克鲁维酵母受体菌中导入所述人乳铁蛋白的编码基因实现的；

5. 根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述人乳铁蛋白的编码基因的核苷酸序列如seq id no.5所示。

6. 根据权利要求4所述的方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：田愉，金城，刘翔远，
申请(专利权)人：北京国科星联科技有限公司，
类型：发明
国别省市：