System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种低成本实现产酶菌高效产水解酶的驯化培养方法技术_技高网

一种低成本实现产酶菌高效产水解酶的驯化培养方法技术

技术编号:41013677 阅读:4 留言:0更新日期:2024-04-18 21:50
本发明专利技术涉及生物技术领域,具体为一种低成本实现产酶菌高效产水解酶的驯化培养方法。本发明专利技术通过首先使用以蔗糖为主要碳源的培养基进行产酶菌的接种培养,然后将菌株转移到以废糖蜜为主要碳源的培养基中进行驯化培养,成功产出水解酶,并且通过添加钙离子,提高水解酶活性,制备高效水解酶。本发明专利技术所制的生物酶可用于催化水解剩余污泥,进而提高污泥厌氧发酵效率。本发明专利技术可降低污泥预处理成本的同时,又实现制糖企业所产废糖蜜的同步处理。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物,具体为一种低成本实现产酶菌高效产水解酶的驯化培养方法


技术介绍

1、如何高效处理污泥成为了大众关注的话题。污泥厌氧发酵产酸则是一种高效处理污泥的方法。

2、然而,水解阶段为污泥厌氧发酵的限速环节。所以采用水解酶预处理将有助于厌氧发酵整个过程的优化及提升。目前,大多数人采用购置成品水解酶以加速提升厌氧发酵的水解阶段,但大量购置成品水解酶所需成本较高。现提出利用制糖厂区废糖蜜为培养基主要原材料,通过以废糖蜜为主要基质驯化培养产酶菌米曲霉(aspergillus oryzae),从而实现高效水解酶的产生,其包含有蛋白酶和淀粉酶,主要以蛋白酶为主,用于促进污泥溶胞水解,以加速提高厌氧发酵的水解阶段。该提出有利于制糖厂区废糖蜜的资源化处理,实现通过自培养产出大量的水解酶。

3、因此,我们提出一种低成本实现产酶菌高效产水解酶的驯化培养方法。


技术实现思路

1、本专利技术的目的在于提供一种低成本实现产酶菌高效产水解酶的驯化培养方法,以解决上述
技术介绍
中提出的问题。

2、为了解决上述技术问题,本专利技术提供如下技术方案:

3、一种低成本实现产酶菌高效产水解酶的驯化培养方法,包括以下步骤:

4、步骤s1:激活培养可产水解酶的米曲霉:配置蔗糖平板培养基,灭菌;

5、将米曲霉敲打活化后,接种于蔗糖平板培养基中,好氧培养5-7d,制得米曲霉孢子;

6、步骤s2:将米曲霉孢子接种于废糖蜜液体培养基中;</p>

7、步骤s3:加入钙离子,培养,得到高活性水解酶,实现产酶菌高效产水解酶。

8、进一步的,所述步骤s1中,蔗糖平板培养基的配方为:蔗糖30-35g/l,琼脂15-20g/l,硝酸钠3.0-3.5g/l,磷酸氢二钾1.0-1.5g/l,硫酸镁0.6-0.7g/l,氯化钾0.5-0.6g/l,硫酸亚铁0.02-0.03g/l。

9、进一步的,所述步骤s2中,废糖蜜液体培养基的配方为:废糖蜜38-50g/l,硝酸钠3.0-3.5g/l,磷酸氢二钾1.0-1.5g/l,硫酸镁0.6-0.7g/l,氯化钾0.5-0.6g/l,硫酸亚铁0.02-0.03g/l。

10、进一步的,所述步骤s3中,钙离子来源于氧化钙试剂,投加量1.96-2.24g/l。

11、进一步的,所述步骤s3中,培养时间为40-44h。

12、进一步的,所述步骤s2中,培养工艺条件为:温度28-30℃,摇床转速50-120r/min,培养瓶简单遮挡,无需密封。

13、进一步的,所述步骤s1中,灭菌工艺条件为:灭菌温度121℃,灭菌时间15min。

14、进一步的,所述步骤s1中,米曲霉的体积为蔗糖平板培养基体积的0.5%-2.0%。

15、进一步的,所述步骤s1中,培养工艺条件为:温度27-29℃、摇床转度90-110r/min。

16、进一步的,所述步骤s2中,米曲霉孢子的体积为废糖蜜液体培养基体积的10%-50%。

17、在上述技术方案中,先使用蔗糖为主要原材料碳源的固体培养基培养米曲霉,在特定的环境和条件下,菌株成功激活后,将其接种到以废糖蜜为主要原材料碳源的液体培养基中,并且通过添加钙离子的方法,制得了高效水解酶,这表明了我们所提出的低成本驯化培养产酶菌高效产水解酶的方法是可行的。

18、与现有技术相比,本专利技术的有益效果如下:

19、1.本专利技术的一种低成本实现产酶菌高效产水解酶的驯化培养方法,可提高污泥厌氧发酵的水解效率。即以废糖蜜为主要原材料的培养基中可产出大量水解酶,实现提高污泥厌氧发酵的水解,在降低成本的同时又可以使厂区废糖蜜的资源化利用。

20、2.本专利技术的一种低成本实现产酶菌高效产水解酶的驯化培养方法,通过首先使用以蔗糖为主要原材料碳源的培养基进行接种培养,然后转移到以废糖蜜为主要碳源的培养基中进行接种培养,并加入钙离子,从而实现高效产出水解酶。经过研究发现,最佳的产酶活性效果周期为40-44h。因此,本专利技术的方法可以有效地实现低成本、高效产酶菌产出水解酶的目的。

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【技术保护点】

1.一种低成本实现产酶菌高效产水解酶的驯化培养方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的一种低成本实现产酶菌高效产水解酶的驯化培养方法,其特征在于:所述步骤S1中,蔗糖平板培养基的配方为:蔗糖30-35g/L,琼脂15-20g/L,硝酸钠3.0-3.5g/L,磷酸氢二钾1.0-1.5g/L,硫酸镁0.6-0.7g/L,氯化钾0.5-0.6g/L,硫酸亚铁0.02-0.03g/L。

3.根据权利要求1所述的一种低成本实现产酶菌高效产水解酶的驯化培养方法,其特征在于:所述步骤S2中,废糖蜜液体培养基的配方为:废糖蜜38-50g/L,硝酸钠3.0-3.5g/L,磷酸氢二钾1.0-1.5g/L,硫酸镁0.6-0.7g/L,氯化钾0.5-0.6g/L,硫酸亚铁0.02-0.03g/L。

4.根据权利要求1所述的一种低成本实现产酶菌高效产水解酶的驯化培养方法,其特征在于:所述步骤S3中,钙离子来源于氧化钙试剂,投加量1.96-2.24g/L。

5.根据权利要求1所述的一种低成本实现产酶菌高效产水解酶的驯化培养方法,其特征在于:所述步骤S3中,培养时间为40-44h。

6.根据权利要求1所述的一种低成本实现产酶菌高效产水解酶的驯化培养方法,其特征在于:所述步骤S1中,灭菌工艺条件为:灭菌温度121℃,灭菌时间15min。

7.根据权利要求1所述的一种低成本实现产酶菌高效产水解酶的驯化培养方法,其特征在于:所述步骤S1中,米曲霉的体积为蔗糖平板培养基体积的0.5%-2.0%。

8.根据权利要求1所述的一种低成本实现产酶菌高效产水解酶的驯化培养方法,其特征在于:所述步骤S1中,培养工艺条件为:温度27-29℃,摇床转度50-120r/min。

9.根据权利要求1所述的一种低成本实现产酶菌高效产水解酶的驯化培养方法,其特征在于:所述步骤S2中,米曲霉孢子的体积为废糖蜜液体培养基体积的10%-50%。

10.根据权利要求1所述的一种低成本实现产酶菌高效产水解酶的驯化培养方法,其特征在于:所述步骤S2中,培养工艺条件为:温度28-30℃,摇床转速50-120r/min,培养瓶简单遮挡,无需密封。

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【技术特征摘要】

1.一种低成本实现产酶菌高效产水解酶的驯化培养方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的一种低成本实现产酶菌高效产水解酶的驯化培养方法,其特征在于:所述步骤s1中,蔗糖平板培养基的配方为:蔗糖30-35g/l,琼脂15-20g/l,硝酸钠3.0-3.5g/l,磷酸氢二钾1.0-1.5g/l,硫酸镁0.6-0.7g/l,氯化钾0.5-0.6g/l,硫酸亚铁0.02-0.03g/l。

3.根据权利要求1所述的一种低成本实现产酶菌高效产水解酶的驯化培养方法,其特征在于:所述步骤s2中,废糖蜜液体培养基的配方为:废糖蜜38-50g/l,硝酸钠3.0-3.5g/l,磷酸氢二钾1.0-1.5g/l,硫酸镁0.6-0.7g/l,氯化钾0.5-0.6g/l,硫酸亚铁0.02-0.03g/l。

4.根据权利要求1所述的一种低成本实现产酶菌高效产水解酶的驯化培养方法,其特征在于:所述步骤s3中,钙离子来源于氧化钙试剂,投加量1.96-2.24g/l。

5.根据权利要求1所述的一种低成本实现产酶菌高效产水解酶...

【专利技术属性】
技术研发人员:辛晓东李林娟
申请(专利权)人:东莞理工学院
类型:发明
国别省市:

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