检测小鼠基因型的PCR试剂盒和方法技术

本申请涉及一种用于检测小鼠基因型的PCR试剂盒和方法。用于检测小鼠基因型的PCR试剂盒包括裂解液和PCR预混液；所述裂解液包括Tris‑HCl、Na<subgt;2</subgt;EDTA和蛋白助沉剂，所述蛋白助沉剂包括表面修饰有十二烷基硫酸钠的磁珠微球；所述PCR预混液包括Tris‑HCl、Mg<supgt;2+</supgt;、NH<subgt;4</subgt;<supgt;+</supgt;、K<supgt;+</supgt;、表面活性剂、牛血清白蛋白、甜菜碱、dNTP、单链DNA结合蛋白、Taq mut4 DNA聚合酶、PfuDNA聚合酶和纳米抗体。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及分子生物学检测领域，特别涉及到一种检测小鼠基因型的pcr试剂盒和方法。

技术介绍

1、转基因小鼠常常作为研究人类疾病的重要动物模型，其在生命科学和医学领域的研究十分广泛。多数实验室构建的转基因小鼠模型都是自养自繁，品系繁多。在利用这些小鼠开展科学研究之前，通常需要对小鼠基因型进行鉴定分组，小鼠基因型分型的常见步骤包括：（1）小鼠基因组dna的获得；（2）常规pcr扩增，最终通过比对特定基因的扩增条带来确定小鼠的基因型。

2、目前常见的小鼠基因型鉴定方法有两种，第一种是利用动物基因组试剂盒法提取鼠dna进行常规pcr mix扩增，这种方法的优点是提取基因组dna纯度高，杂质少，缺点则是时间长，步骤繁琐、成本略高；第二种是利用碱裂解法提取鼠尾dna进行常规pcr mix扩增，这种方法的优点是提取时间短、操作简单，缺点则是提取基因组dna纯度低，杂质多，鉴定成功率低。第二种方法的缺陷一方面在于naoh溶液直接裂解时会导致基因组dna断裂，因此一般需要增加中和碱性的步骤；另一方面在于粗提的dna模板有时候含有较多杂质或pcr抑制剂，它们仅适合本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于检测小鼠基因型的PCR试剂盒，其特征在于，包括裂解液和PCR预混液；

2.根据权利要求1所述的用于检测小鼠基因型的PCR试剂盒，其特征在于，在所述裂解液中，所述Tris-HCl的浓度为20mM～100mM，所述Na2EDTA的浓度为0.5mM～1mM、所述蛋白助沉剂的质量百分含量为1%~7%。

3.根据权利要求2所述的用于检测小鼠基因型的PCR试剂盒，其特征在于，在所述裂解液中，所述Tris-HCl的浓度为20mM～100mM，所述Na2EDTA的浓度为0.5mM～1mM、所述蛋白助沉剂的质量百分含量为3%~5%。

4.根据权利要求1~3任...

【技术特征摘要】

1.一种用于检测小鼠基因型的pcr试剂盒，其特征在于，包括裂解液和pcr预混液；

2.根据权利要求1所述的用于检测小鼠基因型的pcr试剂盒，其特征在于，在所述裂解液中，所述tris-hcl的浓度为20mm～100mm，所述na2edta的浓度为0.5mm～1mm、所述蛋白助沉剂的质量百分含量为1%~7%。

3.根据权利要求2所述的用于检测小鼠基因型的pcr试剂盒，其特征在于，在所述裂解液中，所述tris-hcl的浓度为20mm～100mm，所述na2edta的浓度为0.5mm～1mm、所述蛋白助沉剂的质量百分含量为3%~5%。

4.根据权利要求1~3任一项所述的用于检测小鼠基因型的pcr试剂盒，其特征在于，在所述pcr预混液中，所述tris-hcl的浓度为40mm～60mm，所述mg2+的浓度为1mm～3mm，所述nh4+的浓度为10mm～30mm，所述k+的浓度为5mm～20mm，所述表面活性剂的体积百分含量为0.2％～0.5％，所述牛血清白蛋白的质量百分含量为0.01％～0.1％，所述甜菜碱的浓度为0.3m～0.8m，所述dntp的浓度为10μm～50μm，所述单链dna结合蛋白的浓度为5ng/μl~20ng/μl，所述taq mut4 dna聚合酶的浓度为90ng/μl～200ng/μl，所述pfudna聚合酶的浓度为5ng/μl～20ng/μl...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜军，汪江涵，宋辉，曹文刚，
申请(专利权)人：湖北擎科生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：