【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
技术介绍
1、g蛋白偶联受体(gpcr)调节许多细胞内的信号传导通路，并代表了一些最深入研究的药物靶点(hauser等，2017)。在配体结合后，gpcr经历构象变化并将其传递给异三聚体g蛋白，后者是包含gα和紧密结合的gβγ亚基的多亚基复合物。gq蛋白，为异三聚体gα亚基的亚家族，与一类gpcr偶联，在全身各处介导细胞对神经递质、感觉刺激和激素的应答。它们的主要下游信号传导靶点包括磷脂酶cβ(plc-β)酶，其催化磷脂磷脂酰肌醇二磷酸(pip2)水解成肌醇三磷酸(ip3)和二酰甘油(dag)。ip3触发细胞内储存的ca2+释放到细胞质中，并且ca2+与dag一起激活蛋白激酶c(pkc)。已经开发了包括化学遗传学和可光活化小分子在内的几种工具，来研究gq偶联的gpcr和细胞内ca2+释放的信号传导机制和生理功能。
2、光遗传学利用光响应性蛋白，以遗传特异性和高时空精度来实现对细胞活动的光学控制的扰动。自从早期发现使用光敏性离子通道和转运蛋白的光遗传学工具以来，已开发了多种多样的技术，它们现在支持对细胞内第二信使、蛋白质相互作用和降解，以及基因转录进行光学干预。opt-a1ar，一种创造性设计的gq偶联的视紫红质-gpcr嵌合体，可以对长时间的光刺激(60s)做出响应，诱导细胞内ca2+增加(airan等，2009)。然而，这种工具尚未被广泛使用，可能是因为其与光敏性和响应动力学相关的局限性(tichy等，2019)。大多数动物使用基于gpcr的光感受器来检测光，其中光感受器包含蛋白质部分(视蛋白)和既作为配体又作为
技术实现思路
1、本专利技术涉及一种分离的光敏视蛋白，其用于快速、可逆且精确地激活gq信号传导和/或激活细胞。
2、第一方面，本专利技术涉及一种分离的光敏视蛋白，其用于激活gq信号传导和/或激活细胞。
3、在某些实施方式中，所述光具有360nm-520nm、优选地450-500、更优选地460-480nm范围内的波长。
4、在某些实施方式中，所述分离的视蛋白是来自生物体的分离的视蛋白、其同源物、其直系同源物、其旁系同源物、其片段或变体，并具有激活gq信号传导和/或激活细胞的活性。
5、在某些实施方式中，所述分离的视蛋白与所述生物体中的野生型视蛋白、其同源物、其直系同源物、其旁系同源物、其片段或变体具有至少70％、至少80％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的同一性，并具有激活gq信号传导和/或激活细胞的活性。
6、在某些实施方式中，所述生物体是动物。
7、在某些实施方式中，所述分离的视蛋白是来自动物的分离的视蛋白5(opn5)、其同源物、其直系同源物、其旁系同源物、其片段或变体，并具有激活gq信号传导和/或激活细胞的活性。
8、在某些实施方式中，所述分离的视蛋白5(opn5)与所述动物中的野生型视蛋白5(opn5)、其同源物、其直系同源物、其旁系同源物、其片段或变体具有至少70％、至少80％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的同一性，并具有激活gq信号传导和/或激活细胞的活性。
9、在某些实施方式中，所述动物是脊椎动物。
10、在某些实施方式中，所述动物是鸟类、爬行类或鱼类、两栖类或哺乳类动物。
11、在某些实施方式中，所述动物是鸟类，包括但不限于鸡、鸭、鹅、鸵鸟、鸸鹋、美洲鸵、鹬舵、鹤鸵、火鸡、鹌鹑、鸡、猎鹰、鹰、隼、鸽子、长尾小鹦鹉、凤头鹦鹉、金刚鹦鹉、鹦鹉、雀形目(例如鸣禽)、松鸦、乌鸫、雀类、啭鸟和麻雀。
12、在某些实施方式中，所述动物是爬行类，包括但不限于蜥蜴、蛇、短吻鳄、海龟、鳄和陆龟。
13、在某些实施方式中，所述动物是鱼类，包括但不限于鲶鱼、鳗鱼、鲨鱼和剑鱼。
14、在某些实施方式中，所述动物是两栖类，包括但不限于蟾蜍、蛙、蝾螈和火蜥蜴。
15、在某些实施方式中，所述分离的视蛋白5(opn5)是来自鸡的分离的野生型视蛋白5(opn5)或其片段或变体，并具有激活gq信号传导和/或激活细胞的活性。
16、在某些实施方式中，所述分离的视蛋白5(opn5)与所述来自鸡的野生型视蛋白5(opn5)具有至少70％、至少80％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的同一性，并具有激活gq信号传导和/或激活细胞的活性。
17、在某些实施方式中，所述分离的视蛋白5(opn5)是来自海龟的分离的野生型视蛋白5(opn5)或其片段或变体，并具有激活gq信号传导和/或激活细胞的活性。
18、在某些实施方式中，所述分离的视蛋白5(opn5)与所述来自海龟的野生型视蛋白5(opn5)具有至少70％、至少80％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的同一性，并具有激活gq信号传导和/或激活细胞的活性。
19、在某些实施方式中，所述分离的视蛋白5(opn5)具有由seq id no：1所示的氨基酸序列(copn5)或其片段或变体，并具有激活gq信号传导和/或激活细胞的活性。
20、在某些实施方式中，所述分离的视蛋白5(opn5)与所述由seq id no：1所示的氨基酸序列具有至少70％、至少80％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的同一性，并具有激活gq信号传导和/或激活细胞的活性。
21、在某些实施方式中，所述分离的视蛋白5(opn5)具有由seq id no：2所示的氨基酸序列(topn5)或其片段或变体，并具有激活gq信号传导和/或激活细胞的活性。
22、在某些实施方式中，所述分离的视蛋白5(opn5)与所述由seq id no：2所示的氨基酸序列(topn5)具有至少70％、至少80％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的同一性，并具有激活gq信号传导和/或激活细胞的活性。
23、所述分离的视蛋白5(opn5)可以用作方便的光遗传学工具，精确地激活细胞内gq信号传导和/或激活细胞。
24、第二方面，本专利技术涉及一种分离的核酸，其编码第一方面中所述的分离的本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种分离的光敏视蛋白，其用于激活Gq信号传导和/或激活细胞。
2.根据权利要求1所述的分离的视蛋白，其是来自生物体的分离的视蛋白、其同源物、其直系同源物、其旁系同源物、其片段或变体，并具有激活Gq信号传导和/或激活细胞的活性。
3.根据权利要求1所述的分离的视蛋白，其与所述生物体中的野生型视蛋白、其同源物、其直系同源物、其旁系同源物、其片段或变体具有至少70％、至少80％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的同一性，并具有激活Gq信号传导和/或激活细胞的活性。
4.根据权利要求1所述的分离的视蛋白，其是来自动物的分离的视蛋白5(Opn5)、其同源物、其直系同源物、其旁系同源物、其片段或变体，并具有激活Gq信号传导和/或激活细胞的活性。
5.根据权利要求4所述的分离的视蛋白，其与所述动物中的野生型视蛋白5(Opn5)、其同源物、其直系同源物、其旁系同源物、其片段或变体具有至少70％、至少80％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的同一性，并具有激活Gq信号传导
6.根据权利要求2所述的分离的视蛋，其中所述生物体是脊椎动物。
7.根据权利要求6所述的分离的视蛋白，其中所述脊椎动物是鸟类、爬行类、鱼类、两栖类或哺乳类动物，
8.根据权利要求4所述的分离的视蛋白，其中所述分离的视蛋白5(Opn5)是来自鸡的分离的野生型视蛋白5(Opn5)或其片段或变体，并具有激活Gq信号传导和/或激活细胞的活性；或者
9.根据权利要求4所述的分离的视蛋白，其中所述分离的视蛋白5(Opn5)是来自海龟的分离的野生型视蛋白5(Opn5)或其片段或变体，并具有激活Gq信号传导和/或激活细胞的活性；或者
10.根据权利要求4所述的分离的视蛋白，其中所述分离的视蛋白5(Opn5)具有由SEQID NO：1所示的氨基酸序列(cOpn5)或其片段或变体，并具有激活Gq信号传导和/或激活细胞的活性；或者
11.根据权利要求4所述的分离的视蛋白，其中所述分离的视蛋白5(Opn5)具有由SEQID NO：2所示的氨基酸序列(tOpn5)或其片段或变体，并具有激活Gq信号传导和/或激活细胞的活性；或者
12.根据权利要求4所述的分离的视蛋白，其中所述光具有360nm-520nm、优选地450-500、更优选地460-480nm的范围内，特别是470nm的波长。
13.一种分离的核酸，其编码根据权利要求1～12中任一项所述的分离的视蛋白。
14.一种嵌合基因，其包含权利要求13所述的分离的核酸序列，所述核酸序列可操作地连接到适合的调控序列。
15.一种载体，其包含根据权利要求13所述的分离的核酸或根据权利要求14所述的嵌合基因。
16.根据权利要求15所述的载体，其是真核载体、原核表达载体、病毒载体或酵母载体。
17.根据权利要求16所述的载体，其是单纯性疱疹病毒载体、痘苗病毒载体或腺病毒载体、腺相关病毒载体、反转录病毒载体或昆虫载体，优选地，其中所述载体是重组的AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAVS、AAVO或AAV10。
18.根据权利要求17所述的载体，其是表达载体或基因治疗载体。
19.一种分离的细胞或细胞培养物，其包含根据权利要求13所述的分离的核酸、根据权利要求14所述的嵌合基因或根据权利要求15～18中任一项所述的载体。
20.根据权利要求1～12中任一项所述的分离的视蛋白、根据权利要求13所述的分离的核酸、根据权利要求14所述的嵌合基因、根据权利要求15～18中任一项所述的载体或根据权利要求19所述的分离的细胞或细胞培养物的用途，其用于治疗由激活Gq信号传导和/或激活细胞所介导的疾病或病症，或涉及激活Gq信号传导和/或激活细胞的疾病或病症。
21.一种在受试者中治疗由激活Gq信号传导和/或激活细胞所介导的疾病或病症，或涉及激活Gq信号传导和/或激活细胞的疾病或病症的方法，所述方法包括给药根据权利要求1～12中任一项所述的分离的视蛋白、根据权利要求13所述的分离的核酸、根据权利要求14所述的嵌合基因、根据权利要求15～18中任一项所述的载体或根据权利要求19所述的分离的细胞或细胞培养物。
22.根据权利要求21所述的方法，其中所述由激活Gq信号传导和/或激活细胞所介导的疾病或病症，或涉及激活Gq信号传导和/或激活细胞的疾病或病症包括但不限于从激活Gq信...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种分离的光敏视蛋白，其用于激活gq信号传导和/或激活细胞。
2.根据权利要求1所述的分离的视蛋白，其是来自生物体的分离的视蛋白、其同源物、其直系同源物、其旁系同源物、其片段或变体，并具有激活gq信号传导和/或激活细胞的活性。
3.根据权利要求1所述的分离的视蛋白，其与所述生物体中的野生型视蛋白、其同源物、其直系同源物、其旁系同源物、其片段或变体具有至少70％、至少80％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的同一性，并具有激活gq信号传导和/或激活细胞的活性。
4.根据权利要求1所述的分离的视蛋白，其是来自动物的分离的视蛋白5(opn5)、其同源物、其直系同源物、其旁系同源物、其片段或变体，并具有激活gq信号传导和/或激活细胞的活性。
5.根据权利要求4所述的分离的视蛋白，其与所述动物中的野生型视蛋白5(opn5)、其同源物、其直系同源物、其旁系同源物、其片段或变体具有至少70％、至少80％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的同一性，并具有激活gq信号传导和/或激活细胞的活性。
6.根据权利要求2所述的分离的视蛋，其中所述生物体是脊椎动物。
7.根据权利要求6所述的分离的视蛋白，其中所述脊椎动物是鸟类、爬行类、鱼类、两栖类或哺乳类动物，
8.根据权利要求4所述的分离的视蛋白，其中所述分离的视蛋白5(opn5)是来自鸡的分离的野生型视蛋白5(opn5)或其片段或变体，并具有激活gq信号传导和/或激活细胞的活性；或者
9.根据权利要求4所述的分离的视蛋白，其中所述分离的视蛋白5(opn5)是来自海龟的分离的野生型视蛋白5(opn5)或其片段或变体，并具有激活gq信号传导和/或激活细胞的活性；或者
10.根据权利要求4所述的分离的视蛋白，其中所述分离的视蛋白5(opn5)具有由seqid no：1所示的氨基酸序列(copn5)或其片段或变体，并具有激活gq信号传导和/或激活细胞的活性；或者
11.根据权利要求4所述的分离的视蛋白，其中所述分离的视蛋白5(opn5)具有由seqid no：2所示的氨基酸序列(topn5)或其片段或变体，并具有激活gq信号传导和/或激活细胞的活性；或者
12.根据权利要求4所述的分离的视蛋白，其中所述光具有360nm-520nm、优选地450-500、更优选地460-480nm的范围内，特别是470nm的波长。
13.一种分离的核酸，其编码根据权利要求1～12中任一项所述的分离的视蛋白。
14.一种嵌合基因，其包含权利要求13所述的分离的核酸序列，所述核酸序列可操作地连接到适合的调控序列。
15.一种载体，其包含根据权利要求13所述的分离的核酸...
【专利技术属性】
技术研发人员：于涛，戴睿成，翁丹玮，罗敏敏，
申请(专利权)人：健达九州北京生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。