梅毒螺旋体tp47 mRNA逆转录一步法实时荧光PCR检测试剂盒及其制备制造技术

梅毒螺旋体tp47mRNA逆转录一步法实时荧光PCR检测试剂盒及其制备，涉及分子医学。设计针对tp47基因片段的引物和探针构建含梅毒螺旋体tp47基因目标片段的装甲RNA溶液，制备PCR反应液、酶反应液、阴性对照品和阳性对照品用于逆转录实时荧光PCR体系优化，制备标准品建立靶基因检测试剂标准曲线用于体系定量分析，建立样品处理方法，完成梅毒螺旋体tp47mRNA逆转录实时荧光PCR检测试剂。含有活的梅毒螺旋体的标本tp47mRNA阳性，不含或含死的梅毒螺旋体的标本tp47mRNA阴性，tp47mRNA的载量与活梅毒螺旋体的数量正相关，tp47mRNA表达量可表示活的梅毒螺旋体数量。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分子医学，具体是涉及梅毒螺旋体tp47 mrna逆转录一步法实时荧光pcr检测试剂盒及其制备。

技术介绍

1、梅毒(syphilis)是一种由梅毒螺旋体(treponema pallidum，tp)引起的性传播疾病，其病原体是梅毒螺旋体，属螺旋体科。梅毒螺旋体主要通过性接触、输血、创口或者胎盘等途径传播。梅毒螺旋体从感染区附近的淋巴结进入血液播散全身，使机体几乎所有的组织及器官受累，临床表现为全身性的，可分为不同临床阶段，包括一期、二期、三期和潜伏期。显性梅毒的发生率逐年下降，隐性梅毒大幅上升，占比高达80％以上(岳晓丽,龚向东,李婧,等.2014—2019年中国梅毒流行趋势与特征分析[j].中华皮肤科杂志,2021,54(8):668-72.10.35541/cjd.20210098.)。

2、隐性梅毒患者无自觉症状，处于临床静止期(也称之为潜伏梅毒)，但仍具有传染性，可传染给胎儿或他人，是重要的传染源。一旦机体抵抗力下降，隐性梅毒将重新发作，进展为显性梅毒。研究表明约20％隐性梅毒可进展为神经梅毒(lin li rong,zh本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种梅毒螺旋体tp47 mRNA逆转录一步法实时荧光PCR检测试剂盒，其特征在于所述检测试剂盒中含有tp47基因的正向引物tp47-F、反向引物tp47-R和荧光探针tp47-P，以及RNaseP基因的正向引物RNaseP-F、反向引物RNaseP-R和荧光探针RNaseP-P；所述引物和探针的序列如下：

2.如权利要求1所述一种梅毒螺旋体tp47 mRNA逆转录一步法实时荧光PCR检测试剂盒，其特征在于所述检测试剂盒中还含有：PCR反应液、酶反应液、标准品和对照品；

3.如权利要求2所述一种梅毒螺旋体tp47 mRNA逆转录一步法实时荧光PCR检测试剂盒，其...

【技术特征摘要】

1.一种梅毒螺旋体tp47 mrna逆转录一步法实时荧光pcr检测试剂盒，其特征在于所述检测试剂盒中含有tp47基因的正向引物tp47-f、反向引物tp47-r和荧光探针tp47-p，以及rnasep基因的正向引物rnasep-f、反向引物rnasep-r和荧光探针rnasep-p；所述引物和探针的序列如下：

2.如权利要求1所述一种梅毒螺旋体tp47 mrna逆转录一步法实时荧光pcr检测试剂盒，其特征在于所述检测试剂盒中还含有：pcr反应液、酶反应液、标准品和对照品；

3.如权利要求2所述一种梅毒螺旋体tp47 mrna逆转录一步法实时荧光pcr检测试剂盒，其特征在于所述引物探针混合物中，引物的浓度为0.2μmol/l，荧光探针的浓度为0.2μmol/l。

4.如权利要求2所述一种梅毒螺旋体tp47 mrna逆转录一步法实时荧光pcr检测试剂盒，其特征在于所述标准品包括1.0×102copies/ml、1.0×103copies/ml、1...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑欣琪，童曼莉，林丽蓉，刘莉莉，庄江兴，杨天赐，
申请(专利权)人：厦门大学附属中山医院，
类型：发明
国别省市：