【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于微生物发酵，具体涉及一种蝉棒束孢菌丝体水提物及制备改善痤疮的化妆品的应用。
技术介绍
1、在人体皮肤表层以及毛囊中栖息着多种微生物，在维持皮肤健康中发挥着重要的作用，又被称为皮肤的微生物屏障。皮肤微生物群、宿主皮肤及环境构成皮肤微生态系统，它们之间相互作用、相互制约，保持协调的、生理的、动态的平衡。平衡的皮肤微生态，有利于皮肤健康。日常生活中，紫外线辐射、化妆品频繁使用、生活压力、作息不规律等因素均会导致皮肤菌群稳态被破坏，从而引起皮肤问题的频频发生。
2、痤疮是一种慢性炎症性的常见皮肤疾病，多发于青少年，发病率高达90％以上。虽然该病一般不会危及生命，但由于其好发于面部，会造成患者损容或毁容，对患者的心理影响相当大，严重时可引起焦虑、抑郁等心理疾病，所以不容忽视。痤疮的发生与皮脂分泌过多、毛囊皮脂腺导管角化、病原菌感染和炎症性等因素密切相关。皮脂腺分泌皮脂旺盛造成毛孔堵塞，促进毛囊中可引发炎症的痤疮丙酸杆菌大量繁殖。研究表明，在痤疮病人皮肤存在皮肤菌群的失调，主要表现为痤疮丙酸杆菌数量增加，而表皮葡萄球菌减少，两者比例失衡，导致痤疮丙酸杆菌大量繁殖，分泌脂酶水解甘油三酯，代谢出较多的游离脂肪酸，从而加重炎症反应。目前痤疮主要使用激素类拮抗剂、维a酸类药物、抗生素等药物进行治疗，但长期用药有引起过敏、肾脏功能损害，甚至导致畸形等毒副作用风险。选择具有恢复菌群平衡、抗炎成分的祛痘类化妆品原料，是预防和治疗痤疮的安全、有效的手段。
3、蝉花(cordyceps cicade)俗称金蝉花，是一种珍
4、申请人之前获得了一株产胞外多糖的蝉棒束孢菌(isaria cicadae)，于2019年11月05日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心，保藏编号：cgmccno.18807，其提供的蝉棒束孢菌(记为蝉棒束孢菌c1)是一株生长快、胞外多糖产量高的菌株，该胞外多糖分子量分布较窄，均一性良好，表现出良好的抗氧化能力，具有良好的免疫活性和保湿性、表观黏度和悬浮性能，可作为抗氧化和保湿原料、增稠剂和悬浮稳定剂等应用到食品、化妆品中(参见：zh 202110230202.5，一株产胞外多糖的蝉棒束孢菌株、胞外多糖及制备方法和应用)。在此基础上，申请人对其菌丝体的功能进一步研发，以期用于痤疮的治疗。
技术实现思路
1、本专利技术首先提供了一种蝉棒束孢c1发酵菌丝体水提物，该水提物具有良好的抗炎、抗氧化、调节表皮葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌平衡的功效，将其作为功效添加剂于皮肤外用剂中，天然、安全、可显著缓解痤疮肌肤症状。
2、为了实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种蝉棒束孢菌丝体水提物的制备方法，其特征是，将蝉棒束孢菌c1(cgmcc no.18807)发酵，发酵液离心，收集菌丝体，然后经洗涤、冷冻干燥获得冻干菌丝体；冻干菌丝体粉碎后，采用纤维素酶协同热水浸提法提取。
3、进一步的，所述粉碎为冻干菌丝体粉碎过80目筛。
4、进一步的，所述采用纤维素酶协同热水浸提法提取为：粉碎后的冻干菌丝体加水和纤维素酶(≥8万u/g)(食品级)进行酶解，酶解温度40℃～50℃，酶解时间1～2h；酶解后迅速加热灭酶活；然后热水浸提法继续提取，提取温度90～100℃，提取时间2～4h，提取次数2～3次；提取液趁热抽滤，合并滤液后浓缩，冷冻干燥获得水提物。酶用量为0.10～0.30％(以冻干菌丝体质量计)。
5、上述方法制备的蝉棒束孢菌丝体水提物(简称ice-01)含有以下百分含量的组分：尿苷含量0.05～0.10％，腺苷含量0.05～0.10％，鸟苷含量0.04～0.08％，肌苷含量0.01～0.015％，尿嘧啶含量0.01～0.02％，赤藓糖醇含量为0.50～1.00％，虫草酸含量为5.00～10.00％，葡萄糖含量为1.00～1.50％，海藻糖含量为0.50～1.00％，多糖含量为5.00～10.00％，蛋白含量为0.15～0.20％。
6、本专利技术还提供了蝉棒束孢菌丝体水提物作为活性成分在制备具有抗氧化功效的皮肤外用剂中的应用。优选的，所述蝉棒束孢菌丝体水提物的浓度为2.00～10.00mg/ml。上述抗氧化功效为：具有较好的清除dpph自由基、羟自由基、abts自由基和铁离子还原能力中任一种或多种作用的抗氧化活性。当水提物ice-01浓度为10.00mg/ml时，dpph自由基清除率可达96.24％，对·oh的清除率达到70.82％；当水提物ice-01浓度为8.00mg/ml，abts自由基清除率可达90.71％；当ice-01样品浓度为0.05g/ml时，相当于0.88mm feso4·7h2o，铁离子还原能力较强。
7、本专利技术还提供了蝉棒束孢菌丝体水提物作为活性成分在制备具有抗炎功效的皮肤外用剂中的应用。优选的，所述蝉棒束孢菌丝体水提物的浓度为0.10～10.00mg/ml。上述抗炎具体为：降低了lps诱导的巨噬细胞raw264.7的炎症反应，降低炎症因子il-6、il-β、tnf-α的表达。相对于lps处理的模型组，所述水提物ice-01的浓度为1.0mg/ml可以抑制raw264.7细胞il-6、il-β和tnf-α的释放(p＜0.05，p＜0.01)。可见，中剂量本专利技术ice-01对lps诱导的炎症因子水平升高具有抑制作用。
8、本专利技术还提供了蝉棒束孢菌丝体水提物在制备促进表皮葡萄球菌生长，抑制痤疮丙酸杆菌生长，调节表皮葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌的平衡的皮肤外用剂中的应用。优选的，所述蝉棒束孢菌丝体水提物浓度为1.25～10.00mg/ml。所述水提物ice-01的浓度为7.50mg/ml时，对痤疮丙酸杆菌的抑菌率达到50.12％。水提物ice-01的浓度为10.00mg/ml时，对表皮葡萄球菌的促生长率达到66.58％。
9、优选的，上述的皮肤外用剂包括具备疾病治疗用途的药物，或者不具备疾病治疗用途的化妆品。
10、进一步的，本专利技术提供了蝉棒束孢菌丝体水提物在制备改善痤疮的化妆品中的应用。
11、优选的，当所述化妆品为乳液时，所述乳液包括以下重量份的原料：蝉棒束孢菌丝体水提物0.125～1份、a相6.23～16.88份、b相9～26份、c相0.1～0.4份，水补足100份；所述a相包括硬脂醇聚氧乙烯醚-2、硬脂醇聚氧乙烯醚-21、十六-十八醇、二甲基硅油、辛基/癸基三甘油酯、白油和bht本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种蝉棒束孢菌丝体水提物的制备方法，其特征是，将蝉棒束孢菌C1发酵，发酵液离心，收集菌丝体，然后经洗涤、冷冻干燥获得冻干菌丝体；冻干菌丝体粉碎后，采用纤维素酶协同热水浸提法提取。
2.如权利要求1所述的蝉棒束孢菌丝体水提物的制备方法，其特征是，所述采用纤维素酶协同热水浸提法提取为：粉碎后的冻干菌丝体加水和纤维素酶进行酶解，酶解温度40～50℃，酶解1～2h；酶解后迅速加热灭酶活；然后热水浸提法继续提取，提取温度90～100℃，提取时间2～4h，提取次数2～3次；提取液趁热抽滤，合并滤液后浓缩，冷冻干燥获得蝉棒束孢菌丝体水提物。
3.权利要求1或2所述的制备方法制备的蝉棒束孢菌丝体水提物，其特征是，含有以下质量百分含量的组分：尿苷含量0.05～0.10％，腺苷含量0.05～0.10％，鸟苷含量0.04～0.08％，肌苷含量0.01～0.015％，尿嘧啶含量0.01～0.02％，赤藓糖醇含量为0.5～1.0％，虫草酸含量为5～10％，葡萄糖含量为1.0～1.5％，海藻糖含量为0.5～1.0％，多糖含量为5～10％，蛋白含量为0.15～0.2％。
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